18 附录 A （规范性附录） 方法特性指标确定方法 A.1 方法检出限 A.1.1 方法检出限的一般确定方法 ① 空白试验中检测出目标物质 按照样品分析的全部步骤，重复n（n≥7）次空白试验（以各类便携式、集成式仪器为 基础建立的方法标准应根据仪器的性能尽可能增加重复测定次数） ，将各测定结果换算为样 品中的浓度或含量，计算n次平行测定的标准偏差，按公式（A.1）计算方法检出限 StMDL n )99. 0, 1( （A.1） 式中：MDL——方法检出限； n——样品的平行测定次数； t——自由度为n-1，置信度为 99%时的t分布值（单侧） ； S——n次平行测定的标准偏差 其中，当自由度为n-1，置信度为 99%时的 t 值可参考表 A.1 取值 表 A.1 t值表 平行测定次数（n） 自由度（(n-1） )99. 0, 1( n t 7 6 3.143 8 7 2.998 9 8 2.896 10 9 2.821 11 10 2.764 16 15 2.602 21 20 2.528 如果空白试验的测定值过高，或变动较大时，无法计算检出限。
因此，本方法计算的检 出限以下述条件为前提：任意测定值之间可允许的差异范围为“空白试验测定值的均值估 计检出限的 1/2”以内 ② 空白试验中未检测出目标物质 按照样品分析的全部步骤，对浓度值或含量为估计方法检出限值 2～5 倍的样品进行n （n≥7）次平行测定计算n次平行测定的标准偏差，按公式（A.2）和公式（A.3）计算方 法检出限 19 MDL值计算出来后，需判断其合理性： 对于针对单一组分的分析方法，如果样品浓度超过计算出的方法检出限 3～5 倍，或者 样品浓度低于计算出的方法检出限， 则都需要调整样品浓度重新进行测定 在进行重新测定 后，将前一批测定的方差（即S 2）与本批测定的方差相比较，较大者记为 A 2 S，较小者记 为B 2 S若A 2 S/B 2 S>3.05，则将本批测定的方差标记为前一批测定的方差，再次调整样品 浓度重新测定若A 2 S/B 2 S<3.05，则按下列公式计算方法检出限： BA B B A A p vv SvSv S 22 （A.2） pvv StMDL BA )99. 0,( （A.3） 式中： A v——方差较大批次的自由度，1nA； B v——方差较小批次的自由度，1nB； p S——组合标准偏差； t——自由度为 BA vv ，置信度为 99%时的 t 分布。
对于针对多组分的分析方法，一般要求至少有 50％的被分析物样品浓度在 3～5 倍计算 出的方法检出限的范围内，同时，至少 90％的被分析物样品浓度在 1～10 倍计算出的方法 检出限的范围内， 其余不多于10％的被分析物样品浓度不应超过20倍计算出的方法检出限 若满足上述条件，说明用于测定 MDL 的初次样品浓度比较合适对于初次加标样品测定平 均值与 MDL 比值不在 3～5 之间的化合物，要增加或减少浓度，重新进行平行分析，直至 比值在 3～5 之间选择比值在 3～5 之间的 MDL 作为该化合物的 MDL A.1.2 分光光度法 可以用 A.1.1 的方法计算方法检出限在没有前处理的情况下，也可以以扣除空白值后 的与 0.01 吸光度相对应的浓度值作为检出限，按公式（A.4）进行计算 bMDL/01. 0 （A.4） 式中：b——回归直线斜率 A.1.3 滴定法 可以用 A.1.1 的方法计算方法检出限在没有前处理的情况下，也可根据所用的滴定管 产生的最小液滴的体积来计算，计算公式为： 10 10 VM MV kMDL （A.5） 式中：——被测组分与滴定液的摩尔比； ——滴定液的质量浓度，g/ml； 0 V——滴定管所产生的最小液滴体积，ml； 0 M——滴定液的摩尔质量，g/mol； 1 V——被测组分的取样体积，ml； 20 1 M——被测项目的摩尔质量，g/mol； k——当为一次滴定时，k＝1；当为反滴定或间接滴定时，k＝2。
A.1.4 离子选择电极法 可以用 A.1.1 的方法计算方法检出限在没有前处理的情况下，当校准曲线的直线部分 外延的延长线与通过空白电位且平行于浓度轴的直线相交时， 其交点所对应的浓度值即为该 离子选择电极法的检出限 A.1.5 微生物计数法 微生物计数法的检出限基于泊松概率分布，指在单次计数过程中，发现的概率不低于 99%时最低的微生物密度计算方法如下： 01. 0 1 ln n - （A.6） 式中：——单个计数单元中微生物平均数量，个； n——观察的计数单元数量，个 V N MDL （A.7） 式中：——单个计数单元中微生物平均数量，个； MDL——方法检出限，个/L； N——计数单元的总数，个； V——参与计数的样品总体积，L A.1.6 定性方法 在空白样品中添加若干个不同浓度水平的标液，每个浓度水平检测 10 次，记录检出结 果（阳性或阴性） ，绘制样品检出的阳性率（%）或阴性率（%）对添加浓度的曲线，临界 浓度即为方法检出限 A.1.7 其他 其他物理分析方法、生物毒性测试方法等，方法检出限的确定根据具体情况确定。
A.2 测定下限 一般情况下以 4 倍检出限作为测定下限 微生物计数法测定下限与检出限一致 其他物理分析方法、生物毒性测试方法等测定下限的确定根据具体情况确定 A.3 测定上限 有条件时， 结合方法校准曲线的上限、 适宜的稀释倍数以及一定条件下的吸附富集容量 等因素，提出方法测定上限 21 A.4 精密度 A.4.1 总体要求 一般分析方法直接采用 A.4.2～A.4.4 确定方法精密度； 测定数据呈偏态分布的方法 （如 微生物测定方法等） ， 测定结果需经对数转换后再按 A.4.2～A.4.3 确定实验室内相对标准偏 差和实验室间相对标准偏差，按照 A.4.5～A.4.6 确定实验室内和实验室间 95%置信区间 A.4.2 实验室内相对标准偏差 对某一水平浓度的样品在第i个实验室内进行n次平行测定，实验室内相对标准偏差按 如下公式进行计算： n x x n k k i 1 （A.8） 1 1 2 n xx S n k k i （A.9） %100 i i i x S RSD （A.10） 式中： k x——第i个实验室内对某一浓度水平样品进行的第k次测试结果； ix ——第i个实验室对某一浓度水平样品测试的平均值； i S——第i个实验室对某一浓度水平样品测试的标准偏差； i RSD——第i个实验室对某一浓度水平样品测试的相对标准偏差。
A.4.3 实验室间相对标准偏差 对某一水平浓度的样品在l个实验室内进行测定，实验室间相对标准偏差按如下公式进 行计算： l x x l i i 1 （A.11） 1 1 2 l xx S l i i （A.12） %100 x S RSD （A.13） 式中： ix ——第i个实验室对某一浓度水平样品测试的平均值； 22 x——l个实验室对某一浓度水平样品测试的平均值； S——实验室间标准偏差； RSD——实验室间相对标准偏差 A.4.4 重复性限 r 和再现性限 R 对某一水平浓度的样品进行l个实验室的验证实验，每个实验室平行测定n次，按如下 公式进行重复性限r和再现性限R的计算： l S S l i 2 1i r （A.14） n S ll xxl S l i i l i i2 r 2 1 2 1 L 1 （A.15） 2 r 2 LR SSS （A.16） 2 r 8 . 2Sr （A.17） 2 R 8 . 2SR （A.18） 式中： ix ——第i个实验室对某一浓度水平样品测试的平均值； i S——第i个实验室对某一浓度水平样品测试的标准偏差； r S——重复性限标准差； R S——再现性限标准差； L S——实验室间标准差； l——参加验证实验的实验室总数； n——每个实验室对某一浓度水平样品进行平行测定的次数； r——重复性限； R——再现性限。
A.4.5 实验室内 95%置信区间 采用如下公式计算测定结果对数值的 95%置信区间，再取反对数得到测定结果的 95% 置信区间： n s tx a/2 （A.19） 式中：x——样品测试结果对数值的平均值； s——样品测试结果对数值的标准差； n——测定次数； a/2 t——自由度为 n-1，置信度为 95%的 t 分布值（双侧） 23 A.4.6 实验室间 95%置信区间 采用如下公式计算测定结果对数值的 95%置信区间，再取反对数得到测定结果的 95% 置信区间： l s tx a/2 （A.20） 式中：x——l个实验室对某一浓度水平样品测试结果对数值的平均值 s——实验室间样品测试结果对数值的标准差； l——参加验证实验的实验室总数； a/2 t——自由度为 l-1，置信度为 95%的 t 分布值（双侧） A.5 正确度 A.5.1 总体要求 一般分析方法直接采用 A.5.2～A.5.3 确定方法正确度；测定数据呈偏态分布的方法（如 微生物测定方法等） ，测定结果需经对数转换后再按 A.5.2～A.5.3 确定方法正确度。
A.5.2 相对误差 %100 i i x RE （A.21） l RE RE l i i 1 （A.22） 1 1 2 l RERE S l i i RE （A.23） 相对误差最终值： RE S2RE 式中： ix ——第i个实验室对某一浓度或含量水平标准物质测试的平均值； ——标准物质的浓度或含量； i RE——第i个实验室对某一浓度或含量水平标准物质测试的相对误差； RE——l个验证实验室的相对误差均值； RE S ——l个验证实验室的相对误差的标准偏差 A.5.3 加标回收率 %100 i i i xy P （A.24） 24 l P P l i i 1 （A.25） 1 1 2 l PP S l i i P （A.26） 加标回收率最终值： P SP2 式中： ix ——第i个实验室对某一浓度或含量水平样品测试的平均值； i y——第i个实验室对加标样品测试的平均值； ——加标量，加标量应为本底量的 0.5～2 倍，加标后的浓度不应超过方法线性范 围的上限； i P——第i个实验室的加标回收率； P——l个验证实验室加标回收率的均值。