《fusca3通过介导生长素合成和极性运输调控拟南芥根的再生》由会员分享，可在线阅读，更多相关《fusca3通过介导生长素合成和极性运输调控拟南芥根的再生（72页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
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2、密论文在解密后应遵守此规定。 论文作者签名：盏塑 导师签名：盈复盆 日 说明 2 , 4 一D ：2 ，4 - d i c h l o r o p h e n o x y a c e t i ca c i d ，2 ，4 一二氯苯氧乙酸 6 - B A ：6 - b e n z y l a m i n o p u r i n e ，6 一苄氨基嘌呤 A B A ：a b s c i s i ca c i d ，脱落酸 A m p ：a m p i c i l l i n ，氨苄青霉素 A R E ：a u x i nr e s p o n s ef a c t o r , 拟南芥生长素响应因子
3、 C a M V 3 5 S ：p r o m o t e ro fc a u l i f l o w e rm o s a i cv i r u s ，花椰菜花叶病毒启动子 C H I P ：c h r o m a t i ni m m u n o p r e c i p i t a t i o n ，染色质免疫共沉淀 D E P C ：d i e t h y lp y r o c a r b o n a t e ，焦碳酸二乙酯 E B ：e t h i d i u mb r o m i d e ，溴化乙锭 E s t r a d i o l ：1 7 p e s t r a d i o l
4、 ，1 7 一p 雌二醇 G A ：g i b b e r e l l i ca c i d ，赤霉素 G U S ：g l u c u r o n i d a s e ，1 3 - 葡糖苷酸酶 K a n ：k a n a m y c i n ，卡那霉素 N P A ：N - 1 一n a p h t h y p h t h a l a m i ca c i d ，N l 一萘基邻氨甲酰苯甲酸 Q R T - P C R ：r e a lt i m eq u a n t i t a t i v er e v e r s et r a n s c e r p t i o nP C R , 实时
5、定量反转录P C R R A M ：r o o ta p i c a lm e r i s t e m ，根端分生组织 R I M ：r o o ti n d u c e dm e d i u m ，根诱导培养基 S A M ：s h o o ta p i c a lm e r i s t e m ，茎端分生组织 S I M s h o o ti n d u c e dm e d i u m ，芽再生培养基 S D S ：s o d i u md o d e c y ls u l f a t e ，十二烷基硫酸钠 T E ：T r i s H C I ，E D T Ab u f f e r ,
6、 T r i s C I ，E D T A 缓冲液 T r i s ：t r i s h y d r y x y m e t h yl a m i n o m e t h a n e ，三羟甲基氨基甲烷 W T ：w i d et y p e ，野生型 3洲3帅66岫mnI- 2Y 目录 中文摘要一1 英文摘要3 1 前言5 1 1 拟南芥合子胚胎发生5 1 1 1F 嘞及其相关基因的发现5 1 1 2F U S 3 及其相关基因在拟南芥胚胎发生过程中的作用8 1 2 植物激素与离体器官发生。9 1 2 1 植物细胞全能性。9 1 2 2 植物离体器官发生1 0 1 2 2 1 离体芽的发生1
7、 1 1 2 2 2 离体根的发生1 2 1 2 3 植物激素与离体器官发生1 2 1 2 3 1 生长素的生物合成1 3 1 2 4 2 生长素的极性运输1 4 1 2 ，3 3 生长素调控离体器官发生1 5 1 3 植物激素与F U S 3 及其相关基因的相互作用1 6 1 3 1 植物激素调控F U S 3 基因1 6 1 3 2F U S 3 及其相关基因与生长素1 7 1 3 3F U S 3 与其他植物激素1 8 1 。4 本研究的目的及意义1 9 2 材料与方法：2 l 2 1 实验材料2 1 2 1 1 植物材料及生长条件2 l 2 1 2 菌株及质粒2 1 2 1 3 酶与各
8、种生化试剂2 l 2 1 4 主要实验仪器2 l 2 1 5P C R 引物2 1 2 2 实验方法2 2 2 2 1 拟南芥的种植与培养2 2 2 2 2 拟南芥离体再生根的培养2 2 2 2 3 植物基因组D N A 的提取与纯化2 2 2 2 4 植物组织总R N A 的提取与纯化2 3 2 2 4 1T r i z o l 法提取总R N A 2 3 2 2 4 2R N A 中基因组D N A 的去除2 4 2 2 5 反转录e D N A 第一链的合成2 4 2 2 6 实时定量P C R 2 5 2 2 7 表达载体的构建及其转化拟南芥2 6 2 2 7 1P C R 扩增2 6
9、 2 2 7 2 连接反应2 6 2 2 7 3 大肠杆菌感受态细胞的制备及转化。2 6 2 2 7 4 碱法小量质粒D N A 的提取2 7 2 2 7 。5 质粒D N A 的酶切鉴定2 8 2 2 7 6D N A 序列测定2 8 2 2 7 7 诱导型F U S 3 过量表达及反义表达载体的构建2 8 2 2 7 8p B A 0 0 2 m y c F U S 3 标记过量表达载体的构建2 9 2 2 7 9 农杆菌G V 3 1 0 1 感受态细胞的制备与转化2 9 2 2 7 1 0 拟南芥的转化3 0 2 2 7 1 l 转基因植株的分析3 1 2 2 8 转基因植物G U S
10、 组织化学染色分析3l 2 2 9 共聚焦显微镜观察3 2 2 2 1 0 染色质免疫共沉淀( C h I P ) 步骤及其检测3 2 2 2 1 0 1 染色质免疫共沉淀( C H I P ) 步骤3 2 2 2 1 0 2 染色质免疫共沉淀( C H I P ) 结果检测及分析3 4 3 结果与分析3 6 3 1 诱导型过量表达和反义表达F U S 3 转基因植株的获得3 6 3 2F U S 3 在根再生过程中的作用3 6 3 2 1F U S 3 表达量的改变对根再生的影响3 6 3 2 2F U S 3 表达量的改变对根端特征基因表达的影响3 8 3 3F U S 3 在芽再生过程中的作用：4 0 3 4F U S 3 通过调控生长素响应和极性运输影响根再生4 1 3 4 1 在根再生过程中生长素诱导F 矾泞表达4 l 3 4 2 在根再生过程中F U S 3 影响生长素响应与极性运输。4 2 3 4 2 1 在根再生过程中F U S 3 影响生长素的响应4 2 3 4 2 2 在根再生过程中F U S 3 影响生长素的极性运输4 3 3 5F 明沿调控生长素的合成4 6 3 5 1 根再生过程中F 哪调控生长素合成基因的表达4 6 3 5 2 生长素合成基因在根再生过程中的作用
