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1、鼠全血、肝脏谷胱甘肽过氧化物酶( G S H P x ) 活性及还原型谷胱甘肽( G S H ) 含量升高，并能明显抑制小鼠 脑单胺氧化酶B ( M A 0 一B ) 活性，且能明显提高小鼠血清乳酸脱氢酶( L D H ) 活性及加速运动后血乳酸的清 除。本实验不仅进一步证实了普通螺旋藻这方面的作用，而且更进一步证实了富硒螺旋藻在抗氧化与抗 衰老方面比普通螺旋藻更强的效果。 3 结论 本文以生理盐水为参照，通过对比服用富硒螺旋藻和普通螺旋藻的小鼠血液中C A T 、G S H P x 与S O D 三种抗氧化、抗衰老指标的活性变化研究富硒螺旋藻在抗氧化、抗衰老方面的强化作用，结果证实：富 硒螺
2、旋藻可显著提高小鼠体内C A T 、G S H - P x 、S O D 三种酶的活力，其效果要明显优越于普通螺旋藻，具有 更好的抗氧化与抗衰老功能。因此，以富硒螺旋藻为原料可以生产出具有更强保健功能的健康食品。 参考文献( 略) 几种重要无机离子在南极冰藻低温适应性中的作用 缪锦来o ，王波。，阚光锋。，姜英辉o ，侯旭光。，李光友。 ( 。国家海洋局海洋生物活性物质重点实验室青岛2 6 6 0 6 1 ) ( 中国海洋大学生命学院青岛2 6 6 0 0 3 ) ( 山东大学生命学院济南2 5 0 1 0 0 ) 生存在海冰中的南极冰藻，不仅可以在低温下快速生长，而且可以耐受胞外海冰形成过程
3、中对细胞 造成的渗透脱水，以及胞内结冰等压力。一些重要的无机离子在南极冰藻细胞的生存中扮演重要角色。 例如，C a “+ 作为植物细胞生长发育的第二信使，在植物的对环境的反应和适应性中发挥了重要作用( B u s h ， 1 9 9 5 ) 。生活在海冰环境中的南极冰藻，周围环境的高含量的N a + ，C l 一以及低温，也会影响南极冰藻细 胞对无机离子的吸收和利用。因此，南极冰藻细胞的低温适应性也应同南极冰藻细胞内的无机离子的变 化相关。近年来，由于生物样品的制备技术和分析电镜技术的发展，这使我们可以采用此方法研究南极 冰藻的离子水平变化成为可能。 1 材料与方法 1 1 藻种和处理 南极冰
4、藻为绿藻，即C h l o r o p h y c e a eL - 4 ，设一5 、O C 、6 C 等3 种温度，培养至对数生长期。设 常温藻扁藻( P a t y m o n a ss p ) 为对照，培养温度为1 5 ，6 和O ，培养至对数生长末期。每种藻的每 个温度变化均分别处理6 ，1 2 ，2 4 ，4 8 h 。测定藻细胞内无机离子的含量。 1 2 电镜样品的制备和x 一射线微区分析 分以下3 个步骤进行：( 1 ) 将藻细胞经40 0 0 r m i n 。转速离心3 m i n 收集，置于网眼致密的铝质网 小袋中，迅速投入液氮冷却的异戊烷一丙烷中( 睁1 ：3 ) 冷冻l
5、 2 m i n ，于一1 0 6 C 下冷冻干燥：室温平 3 9 8 衡2 4 h 。( 2 ) 将材料转入T 形真空渗透管中，用乙醚高压渗透2 4 h ；此后进行常压分步渗透包埋，包埋液 为等量的苯乙烯和甲基丙烯酸丁酯。( 3 ) 将包埋好的细胞转入盛有包埋液的小胶囊中，6 0 1 3 至少聚合7 d ； 包埋后的材料用超薄切片机干刀切片，厚度为1I lm ，置于5 0 目的铜网上，在表面喷涂一层碳膜，贮存 于硅胶中。 将制备好的样品，在H I T A C H IH 0 0 型透射电子显微镜下进行测定，加速电压为1 2 0 k V ，取出角为2 5 。， 测定细胞质中的c a + ，N a
6、 ，K + 和C l 一等元素。在检测时，每个样品处理两个切片进行重复检测，每次测 定7 个值，取其平均值。单位为c p s ( = c o u n tp e rs e c o n d ) 。 2 结果 2 1 不同温度对C h l o r o p h y c e a eL - 4 细胞质中C a 2 + 含量的影响 3 种温度对C h l o r o p h y c e a eL - 4 细胞质中C a + 的影响见图l a 。1 2 h 时，3 种温度条件下细胞质中c a + 含量均上升，但随着时间的延长含量急剧下降，第4 8 h 降到最小。扁藻细胞质中C a + 含量的变化见图1 b 。
7、 1 5 C 时，6 一- 4 8 h 内，c a + 的含量略有增加，但始终保持较低的水平。随着温度的降低，在6 1 2 和O C 的条 件下，C a 外含量迅速上升，6 时，在1 2 h 达到最高值：O C 时在6 h 达到最大值：4 8 h 后，6 和O 条件 下的C a p 含量分别下降至2 4 和2 5 c p s 。C h l o r o p h y c e a eL - 4 在一6 ，扁藻在6 C 时，细胞质内的C a 2 + 含量的变化趋势一致。6 1 2 h 增加，并在1 2 h 达到最大值，此后迅速下降至最低值。 6122448 时阃( hJ 臣勿0 霞广 一1 儿 图1温
8、度对C h l o r o p h y c e a eL - 4 ( a ) 和扁藻( b ) 细胞质中C a 2 + 变化的影响 2 2 不同温度对C h l o r o p h y c e a eL 一4 细胞质中N a + 含量的影响 3 种温度对C h l o r o p h y c e a eL - 4 细胞质内N a + 含量的影响结果不同见图2 a 。6 和0 时， C h l o r o p h y c e a eL - 4 细胞质内N a + 的含量在4 8 h 内均很低，但保持相对稳定。在- 6 条件下，1 2 - - 一4 8 hN a 含量由1 9 9 4 1 5 3
9、c p s 。增加到3 8 4 2 2 9 3 c p s ，为6 h 时N a + 含量的1 3 4 倍。扁藻细胞内N a + 的含量 在1 5 下很低，保持相对稳定( 2 1 9 一- 8 1 2 c p s ) ( 见图2 b ) 。在6 条件下，含量在2 4 4 8 h 迅速增 加，达3 6 2 7 c p s 。O C 的处理使扁藻N a + 含量在6 h 就增加至2 8 1 7 c p s ，4 8 h 含量达4 1 1 0 c p s ，高于 C h l o r o p h y c e a eL 一4 在- 6 ，4 8 h 的值。 3 9 9 柚 o t40一如 2 3 不同
10、时甸l h ) 图3 温度对C hl o r o p h y c e a eL - 4 ( a ) 和扁藻( b ) 细胞质中c 变化的影响 3 种温度对C h l o r o p h y c e a eL - 4 细胞质中的K + 含量的影响结果见图3 a 。3 种温度下，K + 含量维持较 高水平( 9 0 - 1 0 5 c p s ) ，温度对C h l o r o p h y c e a eL - 4 细胞中的K + 含量的影响不显著。一6 C 的条件下，K + 的含量在2 4 h 达1 1 2 1 3 c p s ，为3 种温度、4 8 h 内的最高值：4 8 h 后含量下降至最低
11、值( 8 6 0 5 c p s ) 。扁 藻细胞质中的K + 含量随温度变化敏感( 见图3 b ) 。1 5 。C 条件下，K + 含量维持在9 6 5 9 8 9 2 c p s 之间。 而6 C K + 含量剧烈波动，6 和2 4 h 时K + 含量在9 5 6 c p s 以上；在1 2 和4 8 h 下降至3 0 c p s 以下，O C 时细胞 质内的K 含量最低。6 C 和0 时C h l o r o p h y c e a eL - 4 中K + 含量同扁藻的在1 5 C 时基本一致。 2 4 不同温度对C h l o r o p h y c o a cL - 4 细胞质中C
12、l - 含量的影响 3 种温度对C h l o r o p h y c e a eL - 4 细胞质内的C 1 一含量影响结果见图4 a ，与N a + 含量变化相似。6 C 和 O C 时C l 一含量很低；- 6 时，2 4 h 时的含量比6 h 增加了1 5 倍；4 8 h 的含量高达6 4 9 c p s ，比6 h 增加 了1 2 6 倍，为3 种温度的最高值。C h l o r o p h y c e a eL - 4 在一6 同扁藻在6 时，细胞质内的C 1 一含量变 化一致。 4 0 0 8 0 一 兰5 0 3 一 缸 1 0 0 612 2 44 8 时间( h ) 6 0
13、 5 0 1 0 0 时阃( h ) 图4 温度对C h l o r o p h y c e a eL - 4 ( a ) 和扁藻( b ) 细胞质中C l 一变化的影响 3 讨论 3 1C a2 + 在C h l o r o p h y c e a eL - 4 低温生存中的作用 通常认为，低温能够诱导C a 2 + 向细胞质内流入，从而使抗冷基因得到表达并使植物具有抗冷的性质 ( M o n r o ye ta l ，1 9 9 5 ) 。因此，C a 2 + 行使信使功能是通过调控细胞内游离的C a 2 + 含量来实现的，维持C a 2 + 含量的稳态是C a 2 + 发挥其信使功能的前
14、提条件。但是，长时间的维持过高的C a 2 + 水平导致代谢功能的丧 失甚至细胞结构的破坏( W a n ge ta l ，1 9 9 4 ) 。因此，为了维持C a 2 + 的含量的稳态，需要活跃的C a = + 转运 系统，如细胞膜上的C a 2 + 泵( C a 2 + 一A T P a s e ) ，使C a 2 + 含量在其完成信息传递后能回到正常的水平。 在一6 条件下，C h l o r o p h y c e a eL - 4 中C a = + 的含量在短时间内( 6 1 2 h ) 迅速增加，诱导有关抗冷性 基因的表达，此后，C a 2 水平下降，这可能由细胞质膜中的C a
15、弘泵将细胞质中的过量的C a = + 转运出细胞质 或运入胞内的钙库储藏起来，从而维持了细胞生理代谢和信息传递的正常进行( H o r n e r ，1 9 8 5 ) 。这表明， C a 2 + 同样也作为第二信使在微藻的抗冷性中发挥重要的作用。C h l o r o p h y c e a eL - 4 的最适生长温度在一3 6 C ，细胞质内的C a 扣的含量保持较低的水平，而在一6 低温下，C a 2 + 含量迅速上升，发挥其第二信使的 功能。 3 2N a + ，K + 和C l 一吸收和平衡在C h l o r o p h y c e a eL - 4 低温生存的作用 本研究表明，
16、正常的生长温度下( 0 6 ) ，C h l o r o p h y c e a eL - 4 细胞质内的N a + 和C 1 一的含量较低， N a + C I 比值保持相对的稳定( 图5 a ) 。一6 的低温使C h l o r o p h y c e a eL - 4 细胞质内N a + 和C 1 含量迅速增加， 1 2 h 时N a + 的含量迅速增加，C l 含量则略有下降，N a c 1 。迅速增加。但随着时间的延长，N a + C l 比值迅 速下降，4 8 h 以后恢复到6 h 时的水平。 比较3 种温度下C h l o r o p h y c e a eL - 4 的+ K 比值( 图6 a ) ，可知6 和O 条件下的比值维持在0 0 2
