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1、第五届全国环境化学大会(2009) 384 基于有机渗透剂介导的动力学毛细管电泳方法研究 蛋白-DNA 相互作用 李 涛 宋茂勇 尹俊发 汪海林* （中国科学院生态环境研究中心，环境化学与生态毒理学国家重点实验室，北京，100085 ； *联系人，E-mail：hailinwang） 蛋白与 DNA 之间的相互作用调节着许多细胞功能和活性，对于它们之间相 互作用的研究一直都是分子生物学和分子毒理学的研究热点。毛细管电泳激光诱 导荧光偏振方法由于其分析速度快、检测灵敏度高、数据信息量大等多方面的优 点，在蛋白质与 DNA 相互作用研究中受到学者们越来越多的重视。 本文介绍了一种基于保护性有机渗透
2、剂的增强型毛细管电泳方法用于蛋白 与 DNA 亲和分析和相互作用的动力学研究。在此，我们选择了两种重要的 DNA 结合蛋白RecA 蛋白和单链 DNA 结合蛋白作为研究模型。 考察了三种有 机渗透剂丙三醇、蔗糖和聚乙二醇（400）对于蛋白-DNA 复合物的形成 及稳定性的增强作用；以及一种变性有机渗透剂尿素对于复合 物的破 坏作用。将该方法结合搭载激光诱导荧光偏振检测器的动力学毛细管电泳技术， 本文进一步研究了此类保护性有机渗透剂对于蛋白与 DNA 结合的影响。 研究结果表明：保护剂的加入显著地提高了复合物的检测灵敏度，但并不改 变蛋白本身的结合特异性；改进后的方法显著适用于具有弱亲和力的蛋白质 -DNA 相互作用体系。 从而拓展了应用毛细管电泳方法进行相互作用研究的范围。 关键词：关键词：毛细管电泳激光诱导荧光 动力学 蛋白-DNA 相互作用 作者简历作者简历 李涛，男，1980 年 8 月生，博士，中国科学院生态环境研究中心，环境化学 与生态毒理学国家重点实验室，研究方向为蛋白质与 DNA 的相互作用。
