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1、第五届全国环境化学大会(2009) 446 高灵敏免疫毛细管电泳分析检测细胞内痕量 苯并(a)芘-DNA 加合物 王智鑫 王晓利 尹瑞川 冯 峰 汪海林* (中国科学院生态环境研究中心 环境化学与生态毒理学国家重点实验室，北京 100085 *联系人，Email: hlwang ) 多环芳烃（PAHs）是一类典型的环境污染物，其主要来源于化石燃料和生物 质的不完全燃烧，具有致癌、致畸、致突变“三致”毒性。苯并()芘（BaP）是多 环芳烃中污染最广且致癌性最强的。经体内细胞色素 P450 酶的作用，BaP 生成 最终代谢产物邻二醇环氧苯并()芘（BPDE） 。BPDE 与 DNA 共价结合，形成
2、稳 定的 DNA 加合物。若形成的 DNA 加合物不能及时的修复，可引起基因突变，最 终导致癌症的发生。环境中化学苯并()芘的含量较低，在人体内所引起的 DNA 加合物的含量相应的更低（每 106109个正常碱基中含有 1 个加合物） 。因此， 发展简单、快速、高灵敏的苯并()芘-DNA 加合物检测方法是开展相关研究的一 个重要基础。 近年来，毛细管电泳-激光诱导荧光检测系统，因其高效快速的分离、低样品 量、高灵敏的特点，越来越多的被应用于 DNA 诊断等多个领域。我们采用本实 验室研制的毛细管电泳激光诱导荧光检测系统，发展了高灵敏的免疫毛细管电 泳分析方法，并将其用于检测细胞内痕量 BPDE
3、-DNA 加合物。该方法在 0.28 pM 20 pM 范围内具有良好的线性相关性 （R = 0.996） 。 与现有的 32P-后标记法相比， 灵敏度提高了 23 个数量级。该方法一次进样仅需要约 5 ng 的 DNA 样品，远远 低于现有的 DNA 加合物的检测方法。 这将有利 DNA 量稀少的临床诊断和分子流 行病学研究。 综上所述， 我们发展的基于免疫毛细管电泳-激光诱导荧光方法的高灵敏苯并 (a)芘-DNA 加合物分析方法，具有灵敏度高、DNA 样品用量少、分析速度快、特 异性强等优点。 关键词：关键词：苯并(a)芘 DNA 加合物 毛细管电泳-激光诱导荧光检测 作者简历作者简历 王智鑫，男，1981 年 11 月生，博士生，中国科学院生态环境研究中心，研 究方向为高灵敏度 DNA 损伤检测方法。
