《高氧暴露新生鼠肺组织血管内皮生长因子的动态变化研究》由会员分享，可在线阅读，更多相关《高氧暴露新生鼠肺组织血管内皮生长因子的动态变化研究（41页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、中国医科大学 硕士学位论文 高氧暴露新生鼠肺组织血管内皮生长因子的动态变化研究 姓名：刘博 申请学位级别：硕士 专业：儿科学 指导教师：李娟 20040301 中文摘要 前言 支气管肺发育不良( B P D ) 是慢性肺部疾病( C L D ) 最为常见形式。其发 病机理尚未完全阐明，但与高氧损伤，气压伤，早产密切相关。近年来生长 因子在高氧肺损伤的作用愈来愈引起重视，其中血管内皮生长因子 ( V E G F ) 在高氧肺损伤的作用已成为目前研究的热点。V E G F 作为内皮细 胞生存因子，在高氧情况下起着关键作用。以往的研究多集中在血管和肺 泡异常的描述上，对血管发生因子研究较少，且缺乏动
2、态观察。本实验利用 免疫组化和原位杂交的方法动态观察高氧暴露新生鼠肺组织V E G F 在蛋白 和分子水平中的表达变化，为深人探讨B P D 发生机制提供有力实验依据。 材料与方法 1 动物模型的制备：薪生大鼠在出生1 2 小时内随机分为空气组和高 氧组，每组4 0 只( 4 5 窝) ，将高氧组置于有机玻璃氧箱中，持续输入氧气， 氧浓度维持在粥以上。 2 分别于1 、2 、3 、7 、1 4 、2 1 天每组各取5 只留取肺组织标本，置于4 的福尔马林中圊定。 3 H E 染色光镜下观察肺组织病理改变。 4 用免疫组化的方法检测肺组织V E G F 蛋白的表达。 5 用原位杂交的方法检测肺组
3、织V E G F m R N A 的表达。 6 。统计学分析：所有数据 2 工均值标准差( i e ) 表示，统计学分析采 用D t m n e 虹t 检验。 结果 1 肺组织病理学检查：肺泡间隔减少，肺微血管发育异常，间质纤维化。 这些改变7 天后明显，1 4 、2 l 天更显著。 2 V E G F m R N A 和蛋白主要在正常肺泡问隔表达，血管平滑肌、支气管 l 上皮细胞可有V E G F 蛋白表达。 3 新生鼠高氧暴露过程中V E G F 蛋白和m R N A 的表达显著减少( P 0 0 1 ) 。 讨论 V E G F 是内皮细胞特异丝裂原，具有促进内皮细胞增殖、分化、增加微
4、血管通透性、诱导血管发生的作用。在肺中V E G F 主要在末梢空蕴上皮细 胞表达，并以旁分泌的方式指导临近毛细血管的发育。我们的结果发现持 续高氧暴露终至肺泡间隔减少，肺微血管发育异常，间质纤维化。这些改变 7 天后明显，1 4 、2 l 天更显著。V E G F 蛋白和m R N A 在正常肺泡间隔表达， 高氧暴露3 天起，V E G F 蛋白和m R N A 的表达显著减少( P ：5 0 7 - 5 1 4 9 莰璃一l V l o r t w 融，S t a t h l 羡G r o w t ha n e s ti nA 5 4 9e d l d u r i n gh y p 喇x
5、l c s t r e s si sa a s o e i a t e dw i t hd e e l 拍s e de y e l i nB l a n di n e r e a s 列露l w A - I f e i p s d i l ) l e v 臻 1 。B i o e h i m B i o p h y s A e t a ，2 0 0 1 ，1 5 3 8 ( 1 ) ：9 0 9 7 3 1 0 T e eM K 。J a f f eR B A p r e c u r s o r f o r mo fv a s c u l a re n d o t h e l i a lg r
6、 o w t hf a c t o ra - r i s 鹄b yi n i t i a t i o nf r o ma nu p s t r e a m i n f l “ a m eC U G d 【J B i o c h e mJ 2 0 0 1 ，3 5 9 ( P t1 ) ：2 1 9 2 6 i l E u c k d b e r g0 ，K o h h rE ，R e i e h e n b e r g e rF ，e t a 1 E x t r a d h h rm a t r i xd e p o s i t i o nb yp r i m a r yh u m a nl
7、u n gf i b r o b l a s t si nr e s p o n s et oT G F b e t a la n dT G F b e t a 3 J A mJP h y s i o ! ，1 9 9 9 ，2 7 6 ( 5 P t1 ) ：L 9 4 0 一岱9 0 1 2 P a r d oA ，B a r r i o sR ，M a l d o n a d oV ，e ta 1 G d a t i n a s e sAa n dB a r eu p r e , g - u l a t e di nr a tl u n g sb ys u b a c u t eh y
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9、4 M a n i s c a l c oW M ，W a t l d n gR H ，聊h | 【I b 虹G S ，e ta 1 A n g J o g e n l cf a c t o r sa n d a l v e o l a rv a s c u l a t u r e ：d e v e l o p m e n ta n da l t e r a t i o n sb ym j u r yi nv e r yp r o m - t u r eb a b o o n s J A mJP h y s i o lL u n gC e l lM d P h y s i 0 1 2 0 0
10、2 ，2 8 2 ( 4 ) ： 璩1 1 2 3 1 5 B h s t tA J ，珏灿G S ，H u y e kH ，e ta 1 D i s r u p t e dp u l m o n a r yv a s c u h t u r o a n dd e c r e a s e dv a s c u l a re n d o t h e l i a lg r o w t hf a c t o r ，F i t I ，a n dT I E 一2i l l h u m a ni n f a n t sd y i n gw i t h b r o n c h o p u l m o n a
11、 r yd y s p l a s i a J 徊JR e s p i r C r i t C a r eM e d 2 0 0 1 ，1 5 ；1 6 4 ( 1 0P t1 ) ：1 9 7 1 8 0 1 6 M a i t r eB ，B o u s s a tS ，J e a nD ，e ta 1 V a s c u l a re n d o t h e l i a lg r o w t hf a c t o rs y n - t h e s i si nt h ea c u t ep h a s eo fe x p e r i m e n t a la n dc l i n i c
12、 a ll u n gi n j u r y J E u r R e s p i rJ 2 0 0 1 ，1 8 ( 1 ) ：1 0 0 一6 3 8 个人简介 姓名：刘博 性别：女 出生年月：1 9 6 9 年1 2 月 籍贯：辽宁省锦州市人 工作及学习经历： 1 9 8 7 年9 月一1 9 9 2 年7 月锦州医学院医疗系学士 1 9 9 2 年7 月2 0 0 1 年4 月锦州市妇要医院儿科工作 2 0 0 1 年6 月至今 中国医科大学第二临床医院儿科攻读硕士学位。 3 9 在学期间发表的论文 刘博，新生儿A B O 溶血3 0 例治疗体会中国现代医药2 0 0 3 ；3 ( 2 ) ：1 7 4 刘博，纳洛酮治疗新生儿缺血缺氧性脑病中国现代医药2 0 0 3 ；3 ( 4 ) ： 4 0 7 4 0 8 刘博，7 8 例新生儿缺血缺氧性脑病血钠分析中国现代医药2 0 0 3 ；3 ( 5 ) ：5 0 4 刘博，李娟，内皮细胞生长因子( G F ) 与高氧肺损伤国外医学。待 发。 4 0
