霜霉病菌诱导的黄瓜叶片cdna文库构建及其表达序列标签ests分析

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1、C l a s s i f i e dI n d e x : U D C : D i s s e r t a t i o nf o r t h eM a s t e r a lD e g r e ei nS c i e n c e C O N S T R U C T I O NO Fc D N AL I B R A R YF R O MT H E C U C U M B E RL E A V E SI N D U C E DB Y P S E U D O P E R O N O S P O R AC U B E N s I s 黼A N A L Y S I S O FE X P R E SS

2、E D S E Q U E N C ET A G S C a n d i d a t e : S u p e r v i s o r : A c a d e m i c D e g r e eA p p l i e df o r : S p e c i a l i t y : D a t eo fO r a lE x a m i n a t i o n : U n i v e r s i t y : N i uD e P r o f e s s o rW a n g L i j u a n M a s t e ro fS c i e n c e B o t a n y J u n e 2 0

3、1 0 N o r t h e a s tA g r i c u l t u r a lU n i v e r s i t y l - I IYlllll111llllll7llll8llllll7lllllzllllll7111111711111 目录 中文摘要I 英文摘要I I I 1 前言l 1 1 黄瓜霜霉病研究进展1 1 1 1 黄瓜霜霉病病原茵研究1 1 1 2 黄瓜霜霉病发病症状研究4 1 。1 3 黄瓜霜霉病流行规律研究5 1 1 4 黄瓜霜霉菌的抗药性及应对策略研究7 1 1 5 黄瓜霜霉菌的致病机理研究8 1 1 6 黄瓜对霜霉病抗性研究8 1 1 7 黄瓜霜霉瘸抗性遗传规

4、律及分子生物学研究1 2 1 1 8 黄瓜霜霉病防治策略研究14 1 1 9 问题与展望1 8 1 2 研究目的、意义和技术路线1 9 1 2 1 研究目的与意义1 9 1 2 2 研究内容2 0 1 2 3 总体技术路线2 0 2 材料与方法2 2 2 1 十种方法提取黄瓜根、茎、叶和幼果总R N A 的效果比较2 2 2 1 1 试验材料2 2 2 1 2 试验方法2 2 2 2 霜霉菌诱导的黄瓜叶片e D N A 文库的构建2 6 2 2 1 试验材料2 6 2 2 2 试验方法2 9 2 3 表达序列标签( E S T s ) 生物信息学分析3 6 2 3 1 试验材料3 6 2 3

5、2 试验方法3 6 3 结果与分析3 9 3 1 黄瓜不同组织总R N A 的提取3 9 3 1 1 不同方法提取黄瓜四种组织总R N A 效果比较3 9 3 1 2 不同处理对黄瓜叶片总R N A 提取的影响4 2 3 2 霜霉菌诱导的黄瓜叶片c D N A 文库构建4 2 3 2 1 高质量黄瓜叶片总R N A 的提取4 2 3 2 2e D N A 第一链合成和L D P C R 4 3 3 2 3c D N A 纯化与回收4 3 3 2 4c D N A 片段与载体的连接效果检测4 4 东北农业大学理学硕士学位论文 3 2 5c D N A 文库的质量评价4 5 3 3 表达序列标签(

6、 E S T s ) 分析。4 6 3 3 1 质粒提取及插入片段检测4 6 3 3 2E S T s 序列分析及聚类分析4 7 3 3 3 基因表达丰度分析4 9 3 3 4 核苷酸同源性比对分析5 0 3 3 5 基因功能分析5 1 4 讨论6 6 4 1 黄瓜R N A 提取。6 6 4 1 1 植物组织总R N A 提取的影响因素。6 6 4 1 2R N A 提取一般原理6 6 4 1 3 黄瓜各组织总R N A 提取方法的比较。6 7 4 2 黄瓜叶片e D N A 文库构建6 7 4 2 1 选择S M A R T 技术构建e D N A 文库6 7 4 2 2 选择改良S D

7、S 法提取黄瓜叶片总R N A 6 8 4 2 3 构建高质量e D N A 文库影响因素6 8 4 2 4 菌落P C R 及质粒提取检测的多条带现象6 9 4 3 表达序列标签( E S T s ) 分析中的若干问题。6 9 5 结论与展望7 2 致谢7 4 参考文献7 5 硕士期间发表的学术文章9 3 ,弋 I l I C O N C E N T S 量曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼皇曼皇曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼喜曼舅曼皇曼曼曼罡曼皇量曼曼曼曼量曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼w , m 皇曼曼置曼 C O N C E N T S C h i n e s eA b s t r a

8、 c t I E n g l i s hA b s t r a c t I l l 1 I n t r o d u c t i o n 1 1 1P r o g r e s so f s t u d yo nd o w n ym i l d e wi nc u c u m b e r 1 1 1 1R e s e a r c hi np a t h o g e no f 尸c u b e n s i s 1 1 1 2R e s e a r c hi ns y m p t o mo fd o w n ym i l d e w 4 1 1 3R e s e a r c hi ne p i d e

9、 m i c a lr e g u l a r i t yo f d o w n ym i l d e w 5 1 1 4R e s e a r c hi nd r u gr e s i s t a n c eo f 只c u b e n s i sa n dc o p i n gs t r a t e g i e s 7 1 1 5R e s e a r c hi np a t h o p o i e s i sm e c h a n i s mo f Pc u b e n s i s 。8 1 1 6 R e s e a r c h i n r e s i s t a n c e o f c u c u m b e r t o Pc u b e n s i s 8 1 1 7R e s e a r c hi ng e n e t i c sa n dm o l e c u l a rm a r k e r so f r e s i s t a n c et oPc u b e n s i s 1 2 1 1 8R e s e a r c hi np r e v e n t i o na n dc u r eo f d o w n ym i l d e w 1 4 1 1 9P r o b l e m sa n dp r o s p e c t 1 8 1

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