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1、生物试剂方范文 生物试剂篇一：生物试剂配方 生物试剂配方 一健那绿：1,）1%健那绿：0.5g+50ml生理盐水 2）1/5000健那绿染液：取1%的健那绿1ml加入49ml生理盐水=20ml健那绿+980mll生理盐水 二吡罗红甲基绿：A液：1）甲基绿2g+98ml水 2）吡罗红G5g+95ml水 3）取60ml甲基绿与20ml吡罗红加入到160ml水放入棕色瓶备用 B液：1）乙酸钠16.4g,加水至1000ml 2）乙酸12ml加水至1000ml 3)乙酸钠溶液300ml+稀乙酸200ml+500ml水 吡罗红甲基绿试剂：A液200ml+B液800ml 三牙签消毒：KMno4溶液取0.1g
2、0.5g高猛酸钾溶于100蒸馏水中 四生理盐水：0.9%：取9g盐溶于1000ml水中 五30%蔗糖溶液：300g蔗糖加水至1000ml 六1g龙胆紫溶于100ml水稀释到500ml存于棕色瓶中 七斐林试剂：甲液：100g氢氧化钠(NaOH)加水至1000ml 乙液：50gCuSO4加水至1000ml 苏丹：1g干粉加95%酒精至1000ml 双缩脲：A液：同甲液B液：10gCuSO4加水至1000ml 八淀粉酶：2%：20g酶+980ml水 淀粉3%：30g淀粉+970ml水 蔗糖3%：30g糖+970ml水 过氧化氢（H2O2）3%：100ml（30%H2O2）+900ml水 3.5%Fe
3、Cl3：35g(Fecl3)+965ml水 15%HCL：202ml(37%HCL)加水至500ml 九层析液：石油醚+丙酮+苯20:2:1=1000:100:50 生物试剂篇二：生物试剂配制标准操作流程 生物试剂配制标准化操作流程 1.目的 确保试剂配制准确、有效 2.范围 试剂研发部芯片组所用的生物试剂 3.器材与试剂 3.1.器材 电子天平称量匙称量纸移液枪涡旋混合器掌上离心机磁力搅拌器转子玻璃棒1L容量瓶50ml容量瓶100ml容量瓶10ml容量瓶1L烧杯100ml烧杯10ml烧杯100ml量筒10ml量筒0.2m孔径滤膜1ml注射器1.5ml离心管3.2.试剂 EDC：1ethyl3
4、(3dimethylaminopropyl)carbodiimideHydrochloride1乙基3(3甲基氨基丙基)碳化二亚胺(191.7)密封、干燥、20避光密闭保存MES：2(NMorpholino)ethanesulfonicacid2(N啉代)乙磺酸(213.2)室温干燥密闭保存 Formamide：甲酰胺(45.041)4密闭保存 10g/mlSalmonDNA：鲑鱼精DNA室温干燥密闭保存 SDS：dodecylsulfate十二烷基硫酸钠(288)室温干燥密闭保存1mol/LNaOH：氢氧化钠(40.01)室温密闭干燥保存 柠檬酸三钠2H2O：Trisodiumcitrate
5、dihydrate(294.1)室温干燥密闭保存NaCl：氯化钠(58.44)室温干燥密闭保存1mol/LHCl：盐酸(36.5)室温密闭保存 4.程序 4.1.MES(20mM2)配制： 4.1.1.配制0.1MMES母液 4.1.1.1.在干燥环境中用电子天平称取1.21524gMES于干净的100ml烧杯中4.1.1.2.量取30ml蒸馏水溶解MES固体加入数滴1mol/LNaOH调节pH至5.14.1.1.3.把溶液转移到已经检查过的50ml容量瓶中用少量蒸馏水洗涤烧杯和玻璃棒23次洗涤液也转移到容量瓶中轻轻摇动用玻璃棒引流加蒸馏水定容至50ml 4.1.2.配制20mMMES 4.1
6、.2.1.于无菌操作台内稀释0.1MMES母液至20mM(2ml0.1M母液+8ml无菌水即2)分装至1.5ml离心管全程无菌过滤20保存 4.2.SSC洗液配制： 4.2.1.20SSC(1L)洗液配制： 4.2.1.1.在干燥环境中用电子天平称取175.3g(3M)NaCl和88.2g(0.3M)柠檬酸三钠2H2O于1L的烧杯中 4.2.1.2.量取800ml去离子水溶解NaCl与柠檬酸三钠2H2O加入数滴1mol/LNaOH溶液调pH值至7.0 4.2.1.3.把溶液转移到已经检查过的1L容量瓶中用少量蒸馏水洗涤烧杯和玻璃棒23次洗涤液也转移到容量瓶中轻轻摇动用玻璃棒引流加水定容至1L分
7、装后高压灭菌室温密闭存放4.2.2.10%SDS(100ml)配制： 4.2.2.1.在干燥环境中用电子天平称取10gSDS4.2.2.2.量取80ml去离子水加热溶解10gSDS 4.2.2.3.待溶液冷却至室温加入数滴1mol/LHCl调pH至7.2 4.2.2.4.把溶液转移到已经检查过的100ml容量瓶中用少量蒸馏水洗涤烧杯和玻璃棒23次洗涤液也转移到容量瓶中轻轻摇动用玻璃棒引流加水定容至100ml室温密闭存放4.2.3.2SSC(1L)洗液配制： 4.2.3.2.加入800ml去离子水加热溶解 4.2.3.3.待溶液冷却至室温加入数滴1mol/LHCl调pH至7.07.2 4.2.3
8、.4.把溶液转移到经检查过的1L容量瓶中用少量蒸馏水洗涤烧杯和玻璃棒23次洗涤液也转移到容量瓶中轻轻摇动用玻璃棒引流加水定容至1L室温密闭存放 4.2.4.0.2SSC(1L)洗液配制： 4.2.4.1.量取10ml20SSC与10ml10%SDS于1L的烧杯中4.2.4.2.加入800ml去离子水加热溶解 4.2.4.3.待溶液冷却至室温加入数滴1mol/LHCl调pH至7.07.2 4.2.3.4.把溶液转移到经检查过的1L容量瓶中用少量蒸馏水洗涤烧杯和玻璃棒23次洗涤液也转移到容量瓶中轻轻摇动用玻璃棒引流加水定容至1L室温密闭存放 4.3.EDC(10)配制： 4.3.1.在干燥环境中用
9、电子天平精密称取适量的EDC粉末于离心管中4.3.2.按EDC(mg)：灭菌水(ml)=1：5的比例向装有EDC粉末的离心管中精确加入灭菌水 4.3.3.将装有EDC粉末和灭菌水的离心管竖直放置在涡旋混合器上混合均匀然后于离心机上离心室温放置(现用现配) 4.4.HB(2)配制： 4.4.1.方法一： 4.4.1.1.用适当规格的移液枪按以下体系依次准确移取试剂于离心管中 20SSC10%SDSFormamide 10mg/mlSalmonDNA灭菌水 2.5ml200l5ml100ul2.2ml 4.4.1.2.将装有样品的离心管竖直放置在涡旋混合器上混合均匀然后于离心机上离心 4.4.1.
10、3.于无菌操作台分装HB至1.5ml离心管中20保存备用4.4.2.方法二： 4.4.2.1.在干燥环境下用电子天平精确称取0.8765gNaCl和0.441g柠檬酸三钠2H2O于10ml烧杯中加入不超过5ml(约3ml)灭菌水用玻璃棒搅拌待溶解后调节PH至7.0 4.4.2.2.在干燥环境下用电子天平精确称取0.02gSDS和0.001g鲑鱼精DNA于烧杯中 4.4.2.3.用1000ul移液枪准确移取5mlFormimade于烧杯中玻璃棒搅拌均匀4.4.2.4.将烧杯中的液体转移至10ml容量瓶用少量灭菌水洗涤烧杯和玻璃棒23次洗涤液也转移至容量瓶中轻轻摇动用玻璃棒引流加灭菌水定容至10m
11、l 4.4.2.5.于无菌操作台分装HB至1.5ml离心管中20保存备用 4.5.模板点样液配制 4.5.1.按以下体系移取试剂于离心管中 EDCMESDNA(100M)H2OTotal 1l5l1l3l10l DNA终浓度10M 4.5.2.将装有样品的离心管竖直放置在涡旋混合器上混合均匀然后于离心机上离心室温放置待用 生物试剂篇三：常用生物试剂配制方法 常用生物试剂配制方法（buffer） 实验室各种缓冲液的配方 电泳缓冲液 50Tris乙酸（TAE）缓冲液终浓度配制1L溶液 成分各成分的用量 2mol/LTris碱242g 1mol/L冰乙酸57.1ml EDTA（pH8.0）18.62
12、2g（200ml的0.5mol/LEDTA（pH8.0）水补足1L 5Tris硼酸（TBE）缓冲液 成分及终浓度配制1L溶液各成分的用量 445mmol/LTris碱54g 445mmol/L硼酸盐27.5g硼酸 10mmol/LEDTA20ml的0.5mol/LEDTA（pH8.0）水补足1L 染料 1溴酚蓝（bromophenolblue） 加1g水溶性钠型溴酚蓝于100ml水中搅拌或涡旋混合直到完全溶解 1二甲苯青FF（xylenecyanoleFF） 溶解1g二甲苯青FF于足量水中定容到100ml 10mg/ml的溴化乙锭（ethidiumbromide） 小心称取1g溴化乙锭转移到广
13、口瓶中加100ml水用磁力搅拌器搅拌直到完全溶解用铝箔包裹装液管于4贮存 凝胶上样液（gelloadingsolutions） 6碱性凝胶上样液（室温贮存） 成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量 0.3N氢氧化钠300ul10N氢氧化钠6mmol/LEDTA120ul0.5mol/LEDTA（pH8.0） 18聚蔗糖（400型）1.8g 0.15溴甲酚绿15mg 0.25二甲苯青FF25mg 水补足到10ml 6聚蔗糖凝胶上样液（室温贮存） 成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量 0.15溴酚蓝1.5ml1溴酚蓝 0.15二甲苯青FF1.5ml1二甲苯青FF 5mmol/LEDTA100ul0.5mol/LEDTA（pH8.0） 15聚蔗糖（400型）1.5g 水补足到10ml 6溴酚蓝/二甲苯青/聚蔗糖凝胶上样液（室温贮存） 成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量 0.25溴酚蓝2.5ml1溴酚蓝 0.25二甲苯青FF2.5ml1二甲苯青FF 15聚蔗糖（400型）1.5g 水补足到10ml 6甘油凝胶上样液（4
