《葡萄糖6磷酸脱氢酶在芦苇愈伤组织盐适应性中调节作用的机理研究》由会员分享，可在线阅读，更多相关《葡萄糖6磷酸脱氢酶在芦苇愈伤组织盐适应性中调节作用的机理研究（102页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、兰州大学 博士学位论文 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶在芦苇愈伤组织盐适应性中调节作用的机 理研究 姓名：王晓敏 申请学位级别：博士 专业：植物学 指导教师：毕玉蓉 20080601 兰州大学博士学位论文缩写词 英文缩写 A B A A P X A S A B S A B S O c 鼹 c G M P D M D P I D R D T T E D l r A G A G 6 P D H G P X G R G S H G S S G G 汀 H e p e s H 2 0 2 M A P K M D A M D H A R N A C 缩写词A b b r e v i a t i o n s 英文
2、全称 A b s c i s i cA c i d A s c o r b a t ep e r o x i d a s e A s c o r b i ca c i d B o v i n es e r u ma l b u m i n B u t h i o n i n es u l f o x i m i n e C a t a l a s e C y c l i cg u a n o s i n em o n o p h o s p h a t e D r y m a s s D i p h e n y l e n ei o d o n i u m D u n er e e d D i
3、 t h i o t h r e i t o l E t h y l e n e d i a m i n e t e t r a a c e t i ca c i d G i b b e r e l l i n s G l u c o s e 岳p h o s p h a t ed e h y d r o g e n a s e G l u t a t h i o n ep e r o x i d a s e G l u t a t h i o n er e d u c a s e R e d u c e dg l u t a t h i o n e O x i d a t i v eg l
4、u t a t h i o n e G l u t a t h i o n eS t r a n s f e r a s e N 一2 - h y d r o x y e t h y l p i p e r a z i n e - N - 2 - e t h a n e s u l f o n i ca c i d H y d r o g e np e r o x i d e M i t o g e n - a c t i v a t e dp r o t e i nk i n a s e M a l o n d i a l d e y d e M o n o d e h y d r o a
5、s c o r b a t er e d u c t a s e N - a c e t y l - L - c y s t e i n e 3 中文全称 脱落酸 抗坏血酸过氧化物酶 抗坏血酸 牛血清白蛋白 丁基硫堇砜亚胺 过氧化氢酶 环鸟苷酸 干重 二苯基碘 沙芦 二硫苏糖醇 乙二胺四乙酸 赤霉素 葡萄糖舌磷酸脱氢酶 谷胱甘肽过氧化物酶 谷胱甘肽还原酶 还原性谷胱甘肽 氧化型谷胱甘肽 谷胱甘肽S 转移酶 N 2 - 羟乙基哌嗪N 2 乙磺 酸 过氧化氢 促分裂原活化蛋白激酶 丙二醛 单脱氢抗坏血酸还原酶 乙酰L 半胱氨酸 兰州大学博士学位论文 缩写词 N a C I N A D P H N
6、O 0 2 。 O H B 慨 6 P G D H P M P O D P n O P V P R O S S D S S O D S R 硎 “ I r i s T r i t o n X - 1 0 0 T T C T w e e n 2 0 s o d i u mc h l o r i d e N i c o t i n a m i d ea d e n i n ed i n u c l e o t i d ep h o s p h a t e N i t r i co x i d e S u p e r o x i d ea n i o n H y d r o x y lr a d i
7、 c a l s P o l y a c r y l a m i d eg e le l e c t r o p h o r e s i s 6 - p h o s p h o g l u c o n a t ed e h y d r o g e n a s e P l a s m am e m b r a n e P e m x i d a s e 2 - p h e n y l - 4 ，4 , 5 , 5 - t e t r a m e t h y l P o l y v i n y l p y r r o l i d o n e R e a c t i v eo x i d a n t
8、s p e c i e s S o d i u md o d e c y ls u l f a t e S u p e m x d ed i s m u t a s c S w a m p r e e d T h i o b a r b i t u r i ca c i d N - t r i s ( h y d r o x y m e t h y l ) - a m i n om e t h a n e T - o c t y l p h e n o x y p o l y - e t h x o ye t h a n o l T r i p h e n y lt e t r a z o l
9、 i u mc M o d d e P o l y o x y e t h y l e n es o r b i t a nm o n o l a u r a t 4 氯化钠 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷 酸，辅酶 一氧化氮 超氧阴离子 羟自由基 聚丙烯酰胺凝胶电泳 6 _ 磷酸葡萄糖酸脱氢酶 质膜 过氧化物酶 2 - 苯基- 4 ，4 ，5 ，5 一四甲基 聚乙烯吡咯烷酮 活性氧 十二烷基硫酸钠 超氧化物歧化酶 水芦 硫代巴比妥酸 三羟甲基氨基甲烷 聚乙二醇辛基苯基醚 氯化三苯基四氮唑 聚氧乙烯( 2 山梨聚糖酐单 月桂酸 原创性声明 本人郑重声明：本人所呈交的学位论文，是在毕玉蓉导师的 指导下独
10、立进行研究所取得的成果。学位论文中凡引用他人已经 发表或未发表的成果、数据、观点等，均已明确注明出处。除文 中已经注明引用的内容外，不包含任何其他个人或集体已经发表 或撰写过的科研成果。对本文的研究成果做出重要贡献的个人和 集体，均已在文中以明确方式标明。 本声明的法律责任由本人承担。 期：丝! ! 墨! 皇 关于学位论文使用授权的声明 本人在导师指导下所完成的论文及相关的职务作品，知识产 权归属兰州大学。本人完全了解兰州大学有关保存、使用学位论 文的规定，同意学校保存或向国家有关部门或机构送交论文的纸 质版和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权兰州大学可以 将本学位论文的全部或部分内容编入
11、有关数据库进行检索，可以 采用任何复制手段保存和汇编本学位论文。本人离校后发表、使 用学位论文或与该论文直接相关的学术论文或成果时，第一署名 单位仍然为兰州大学。 保密论文在解密后应遵守此规定。 论文作者签名：圭塑导师签名：兰至茎E l期：堕。 兰州大学博士学位论文摘要 中文摘要 本文以两种不同生态型芦苇( P h r a g m i t e sc o m m u n i sT r i n ，沙丘芦苇和沼泽 芦苇) 的愈伤组织为材料，研究了两种芦苇愈伤组织对盐胁迫的生理响应，并 进一步探讨了葡萄糖6 磷酸脱氢酶( G 6 P D H ) 在其盐适应性中的调节作用及信 号传导机制。 主要结果总结
12、如下： 1 低盐( 5 0m MN a C l ) 处理下，沙芦愈伤组织生长量增加，而水芦愈伤组 织显著降低。进一步研究发现：5 0m MN a C I 处理下，水芦愈伤组织的离子泄漏、 脂质过氧化、细胞活力和活性氧水平( R O SH 2 0 2 和0 2 。) 明显增加；而沙芦 愈伤组织的脂质过氧化、细胞活力和0 2 水平却略有降低，虽然离子泄漏和 H 2 0 2 水平有所增加，但远低于水芦愈伤组织。高浓度N a C I ( 3 0 0r a M ) 处理下， 两种芦苇愈伤组织的离子泄漏、膜质过氧化和活性氧水平都明显增加，但水芦 愈伤组织增加更明显。说明沙芦愈伤组织有更高的盐耐受性。 2
13、低盐( 5 0m MN a a ) 处理下，沙芦愈伤组织的脯氨酸、甘氨酸甜菜碱和 可溶性糖含量降低；水芦愈伤组织内脯氨酸和甘氨酸甜菜碱含量显著增加，可溶 性总糖含量略有降低，说明低盐胁迫下，脯氨酸和甘氨酸甜菜碱对缓解水芦愈伤 组织的渗透胁迫起主要作用。高盐( 3 0 0m MN a C I ) 胁迫下，两种芦苇愈伤组织 脯氨酸、甘氨酸甜菜碱和可溶性糖含量都显著增加，但水芦愈伤组织脯氨酸和可 溶性糖的累积程度远低于沙芦愈伤组织。 3 抗氧化酶活性测定结果显示：低盐( 5 0m MN a a ) 胁迫下，沙芦愈伤组 织的超氧化物歧化酶( S O D ) 、过氧化氢酶( C A T ) 活性增加，而
14、过氧化物酶( P O D ) 、 谷胱甘肽过氧化物酶( G P X ) 以及抗坏血酸谷胱甘肽循环的关键酶( 抗坏血酸 过氧化物酶【A P x 】和谷胱甘肽还原酶【G R 】) 活性略有降低；水芦愈伤组织的P O D 、 C A T 、G P X 、A P X 和G R 活性增加显著。说明此盐浓度下，S O D 和C A T 担负着沙 芦愈伤组织的R O S 清除任务；而水芦愈伤组织内，P O D 、C A T 和抗坏血酸谷胱 甘肽循环共同承担R O S 清除任务。高盐( 3 0 0m MN a C I ) 胁迫下，沙芦愈伤组织 的S O D 、P O D 、G P X 、A P X 和G R
15、活性增加显著；水芦愈伤组织的C A T 、G P X 、 A P X 、G R 活性较5 0m MN a C I 处理下明显降低。说明高盐胁迫下，S O D 和抗坏血 5 兰州大学博士学位论文摘要 酸谷胱甘肽循环在控制沙芦愈伤组织R O S 水平中起主要作用。 4 低盐浓度( 5 0 1 5 0m MN a C I ) 处理下，水芦愈伤组织的G 6 P D H 活性高 于沙芦愈伤组织；高盐浓度( 3 0 0 6 0 0m MN a C l ) 处理下，水芦愈伤组织的G 6 P D H 活性低于沙芦愈伤组织。盐胁迫下，两种芦苇愈伤组织内G S H 含量与G 6 P D H 活性变化的趋势相似。当
16、甘油处理抑制G 6 P D H 活性剂及其蛋白表达后，两种 芦苇愈伤组织的G S H 含量显著降低( 约为各自对照的5 0 ) ；甘油+ N a C I 共同 处理下，G S H 含量略有增加，但仍远低于对照水平。这些结果说明：不仅在盐 胁迫而且在正常的生长环境下，G 6 P D H 对维持细胞内的G S H 水平都起着非常 重要的作用。 5 甘油单独处理和甘油+ N a C I 共同处理下，G 6 P D H 活性及其蛋白表达的降 低导致了两种芦苇愈伤组织G R 和G P X 活性显著降低。甘油+ N a C I 共同处理阻 止了N a C I 诱导的H 2 0 2 累积，而离子泄漏的程度没有降低反而明显增加。外源 H 2 0 2 和甘油共处理可以逆转甘油单独处理引起的G 6 P D H 、G R 和G P X 的活性 降低。外源H 2 0 2 单独处理能以浓度依赖的方式增加两种芦苇愈伤组织的 G 6 P D H 、G R 、G P X 活性和G S H 含量。D P I ( 质膜N A D P H 氧化酶的抑
