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1、第三节沙门菌属(Salmonella) l一、生物学性状 l形态染色：革兰阴性杆菌、周鞭毛 l培养特性： l普通琼脂圆形、光滑、湿润、半透明、边缘 整齐 l肠道选择培养基乳糖不发酵、硫化氢+ l生化反应 ：IMViC - + - +/-,不发酵乳糖，赖 氨酸阳性、鸟氨酸脱羧酶阴性，产H2S。见表 18-5 伤寒沙门菌不产气，其余沙门菌产酸产气 第三节沙门菌属(Salmonella) l抗原构造及分组 lO抗原多糖类脂蛋白质复合物，其刺 激机体产生的抗体为IgM。具有相同抗原分为 一组，A-Z，O51O63，O65O67共42组 lH抗原（不稳定的蛋白质）有两相：第一相 特异相，第二相非特异相，
2、其刺激机体产 生的抗体为IgG。 第三节沙门菌属(Salmonella) l表面抗原 lVI抗原（不耐热的酸性多糖聚合物）有抗 吞噬及保护细菌受相应抗体和补体的溶菌作用 。 lM抗原粘液抗原，可阻止0抗原与相应抗 体发生凝集 l5抗原不稳定 第三节沙门菌属(Salmonella) l变异性 lS-R变异光滑（S）粗糙（R） lH-O变异有鞭毛的失去鞭毛。 l位相变异具有双相的变为单相。 lV-W变异V型菌（O不凝集）、VW型菌（ Vi部分缺失，O凝集）、W型菌（Vi缺失，O凝 集） l抵抗力对热抵抗力不强。水23W，粪便1 2个月 第三节沙门菌属(Salmonella) l二、致病性与免疫性
3、l致病物质 l侵袭力菌毛黏附M细胞细胞肌动蛋白 重排吞噬泡（沙门菌存留缓慢繁殖）信号 调节、基因调控，合成多种因子拮抗宿主细胞 的抗菌反应。M细胞未降解细菌肠粘膜细 胞固有层巨噬细胞吞噬胞内寄生菌。 lVi抗原抗吞噬作用 l内毒素 l肠毒素。 第三节沙门菌属(Salmonella) l所致疾病 l肠热症伤寒沙门菌和副伤寒沙门菌 l肠炎型鼠伤寒沙门菌、猪霍乱沙门 菌、肠炎沙门菌多见。 l菌血症或败血症多见猪霍乱沙门菌 感染 l无症状携带者 l致病机理 第三节沙门菌属(Salmonella) l三、微生物检验 l标本采集食物、血液及骨髓、粪便（肛拭）、尿液 、胆汁 第三节沙门菌属(Salmonel
4、la) l分离培养与鉴定 l分离培养 l血液和骨髓液增菌液（胰酶消化大豆肉汤） l粪便和肛拭肠道选择培养基（GN、MAC、SS ） l尿液和体液离心取沉淀物接种GN、MAC、SS 、血平板 l食物等固体物质磨碎加10倍无菌生理盐水接 种GN、MAC、SS、 l观察培养情况挑选可疑菌落鉴定 第三节沙门菌属(Salmonella) l3.鉴定 l生化鉴定：初步：透明或半透明或黑色菌落，KIA： K/A，K/AG；H2S+/-，动力。全面生化 l血清学分型A-FO多价，Vi，分群分型血清 lVI噬菌体分型一般医院不做。 第三节沙门菌属(Salmonella) 抗体检测(肥达反应Widal test)
5、 方法 结果解释： 正常值：O1:80，H1:160，A、B、C1:80 O抗原抗体IgM，H抗原抗体IgG。 O高H不高疾病早期；沙门菌属其他菌种感染致交叉反 应；H-O变异的沙门菌引起的感染；一周后复查H升高肠热 症。 H高O不高疾病晚期；继往患病或预防接种；回忆反应 、沙门菌属检验程序 粪、尿、残余食物 血液、骨髓 增菌培养 35 1824小时 分离培养 增菌培养 SS、MAC、GN 35 1824小时 可疑菌落 基因探针、PCR、Vi噬菌体法 报告 生化初步鉴定（KIA、MIU、IMVIC、氧化酶、触酶、硝酸盐还原 血清学最终鉴定 全套生化反应（必要时） 沙门菌属多价血清 单价定型血清
6、 报告 第四节志贺菌属(Shigella) l三、微生物特性 l形态与染色 l培养特性：肠道选择培养基：MAC、SS不发酵 乳糖 l生化反应：D群较活跃。各群均分解葡 萄糖产酸不产气，发酵甘露醇（A群除外 ） 第四节志贺菌属(Shigella) 抗原构造： lO抗原（群、型）多糖复合物；K抗原 阻断O抗原与相应抗血清凝集。 第四节志贺菌属(Shigella) l抵抗力：不强。 l变异性 lS-R变异 l耐药性变异对磺胺、四环素、氨苄西林、百 炎净耐药。 第四节志贺菌属(Shigella) l二、致病性与免疫性 l致病物质 l侵袭力菌毛的作用。 l内毒素肠粘膜上皮细胞死亡，毛细管血栓，坏死 脱落
7、溃疡，致脓血便；内毒素血症。 第四节志贺菌属(Shigella) l外毒素： l志贺菌侵袭宿主细胞IL-1、IL-6、TNF-a、 INF-r IL-1 、TNF-a、 ST受体在内皮细 胞表面的表达，使内皮细胞成为ST攻击的靶 细胞，内皮细胞损伤。 lA群型志贺毒素ST(VT-对Vero细胞有毒性) ST属VT1型， 有下列3种活性。 l细胞毒：VT对人肝细胞、Hela细胞、Vero细胞血管内 皮细胞、肾小管内皮细胞有毒性。 l肠毒素：引起水样腹泻 l神经毒：引起麻痹、昏迷、脑膜炎死亡。 l4、ST和内毒素的协同作用：HUG 第四节志贺菌属(Shigella) l所致疾病 l急性细菌性痢疾又
8、分为典型、非典型、中 毒型 l慢性细菌性痢疾反复发作，病程超过2个月 。隐匿型痢疾有病史无症状，培养及结肠镜检阳性 。 l携带者恢复期、慢性、健康（主要传染源）。 l致病机理 l免疫性：局部粘膜表面产生SIgA 第四节志贺菌属(Shigella) 三、微生物检验 标本采集采集脓血便或肛拭。 检验程序见后 第四节志贺菌属(Shigella) l检验方法及鉴定 l分离培养：GN、SS、MAC l鉴定 l初步鉴定TSIA(双糖铁)K/A、H2S-动力 阴性。 l最终鉴定：全面生化试验及血清学鉴定 ：四种多价血清，A群B群C群D 群 第四节志贺菌属(Shigella) l非典型菌株： l传代法：营养琼
9、脂和肉汤交替传代5 10次典型。 l4.毒力试验豚鼠眼结膜试验 l5.快速诊断：直接凝集、免疫荧光菌球、 协同凝集试验。 志贺菌属检验程序 粪便或肛拭 增菌培养分离培养 SS、MAC 35 46小时 35 1824小时 观察、挑选可疑菌落 接种 KIA、MIU 35 1824小时 分析KIA、MIU反应结果，涂片、氧化酶试验 最后鉴定 全面生化反应 血清学鉴定 毒力试验（必要时） 报告 第五节耶尔森菌属(Yersinia) l一、分类： l11个菌种: l引起人类致病的有3种： l鼠疫耶尔森菌(Y.pestis)、 l小肠结肠炎耶尔森菌(Y.enterocolitica)、 l假结核耶尔森菌(
10、Y.pseutuberculosis)。 第五节耶尔森菌属(Yersinia) l二、鼠疫耶尔森菌 l临床意义 l致病因素 l内毒素 l鼠毒素抑制心肌细胞线粒体的呼吸作用，引起 不可逆休克及死亡。 l毒力决定因子:FI封套抗原、VW毒力抗原、 Pgm色素形成能力、PI鼠疫耶尔森菌素、C凝固酶、F 纤维蛋白因子、PU嘌呤依赖性、T鼠毒素。 第五节耶尔森菌属(Yersinia) l临床类型（带菌鼠蚤的叮咬、人与染疫动物或人 接触所致）甲类传染病 l腺鼠疫局部淋巴结肿胀、坏死和脓肿 l败血性鼠疫最严重。 l肺鼠疫继发、原发。 l少见的皮肤鼠疫、肠鼠疫、脑膜炎鼠疫、眼鼠疫 。 第五节耶尔森菌属(Yer
11、sinia) l微生物特性 l形态结构：G-b、G-cb，两极浓染，陈旧物：多形性 l抗原构造至少18种抗原，重要的有 lFI抗原封套抗原 lV/W抗原菌体表面抗原，V蛋白质， W类脂蛋白。具有抗吞噬作用。 lT抗原可溶性蛋白抗原（鼠毒素）剧毒， 可制成类毒素、抗毒素。 第五节耶尔森菌属(Yersinia) l培养特性： l普通培养基：可生长，但缓慢。 l血平板：培养48小时后为柔软、粘稠、粗糙菌落。 l肉汤培养基：24小时沉淀生长，48小时菌膜 ，轻摇钟乳石状下垂。 l生化特性动力阴性，IMVC为，赖氨酸 、鸟氨酸、苯丙氨酸脱胺酶、脲酶、硫化氢均阴性。 第五节耶尔森菌属(Yersinia)
12、l微生物检验 l检验程序见P125 l标本采集采集血、痰、淋巴结穿刺液、尸检 脏器等样本。 l标本直接检查 l分离培养与鉴定 l分离培养无污染：血平板，有污染：龙胆紫 溶血亚硫酸钠琼脂。 第五节耶尔森菌属(Yersinia) l鉴定：典型形态、菌落特点、生化特征见鉴别表 、噬菌体裂解试验。 l毒力试验动物试验（用皮下注射）37天死 亡，取肝、脾培养。 l检验结果分析与报告 第五节耶尔森菌属(Yersinia) l三、小肠结肠炎耶尔森菌(Y.enterocolitica) l临床意义 l致病因素 l侵袭性及毒素 l某些菌株与人体组织有相同抗原自身免疫性 疾病 l所致疾病 l小肠、结肠炎 l败血症
13、 l结节性红斑、反应性关节炎。 第五节耶尔森菌属(Yersinia) l微生物特性 l形态结构 l抗原成分O抗原50种以上但只有几种 血清型与致病性有关，我国主要为O:9、 O:8、O:5、O:3。 l培养特性：MAC乳糖不发酵菌落 l生化特性：脲酶阳性、V-P22-25 阳性、鸟氨酸脱羧酶阳性 第五节耶尔森菌属(Yersinia) l微生物检验 l检验程序见P126 l标本采集采集粪便、食物、尿液、血液。 l标本直接检查 l冷增菌粪便标本可用57mlM/15PBS4 冷增菌。 第五节耶尔森菌属(Yersinia) l分离培养与鉴定 l分离培养：接种MAC、NYE或CIN平板。 l初步鉴定MOT动力、V-P、ONPG-半乳糖 苷酶22-25阳性。 l最终鉴定：全面生化见表 l检验结果分析。 粘质、液化沙雷菌的鉴别 试验粘质沙雷菌液化沙雷菌红色沙雷菌 阿拉伯糖 棉子糖/ 木糖 鸟氨酸 肠杆菌科与其他科菌的鉴别 试验肠杆菌科弧菌科非发酵菌 葡萄糖FFO/ 氧化酶 形态杆状弧形杆状 鞭毛周毛或无单毛单、丛毛、 周毛、无 肠杆菌科的初步分群 菌属名苯丙氨酸葡萄糖酸盐 变形杆菌属 普罗威登菌属 摩根菌属 克雷伯菌属 肠杆菌属 沙雷菌属 哈夫尼亚菌属 埃希菌属 志贺菌属 沙门菌属 枸橼酸杆菌属 爱德华菌属 耶尔森菌属 肠杆菌科的初步分群
