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1、上海交通大学 硕士学位论文 氧化锆/磷酸镧复相陶瓷遗传毒性初步研究 姓名：朱慧芳 申请学位级别：硕士 专业：口腔临床医学（口腔修复学） 指导教师：张保卫 20090401 上海交通大学医学院 2006 级硕士学位论文 氧化锆/磷酸镧复相陶瓷遗传毒性初步研究 摘 要 目的：目的：检测齿科可切削氧化锆/磷酸镧复相陶瓷对于 DNA 及染 色体的损伤，从而对其遗传毒性作出初步评价。 方法：方法：分别采用体外单细胞凝胶电泳法（彗星试验）和体内骨 髓微核试验来检测磷酸镧及三氧化二钇含量分别为 30wt%和 3wt%、 30wt%和 5wt%、 40wt%和 5wt%的三组氧化锆/磷酸镧复相陶瓷 （三氧 化
2、二钇稳定）对于人外周静脉血淋巴细胞 DNA 的损伤情况及小鼠骨 髓嗜多染红细胞染色体的突变情况。 结果：结果：1. 分离培养的人外周血淋巴细胞经三组氧化锆/磷酸镧复 相瓷块连续 6 天染毒，均无明显生长抑制表现，且与 IPS Empress 阴性对照组瓷块，空白组生长趋势基本一致。 2. 经三组氧化锆/磷酸镧复相瓷块连续 6 天染毒的分离培养的人 外周血淋巴细胞 DNA 均未出现明显的拖尾现象，各组尾矩值相互之 间及与 IPS Empress阴性对照组瓷块，空白组之间的差异不具有统 计学意义（P0.05） ，实验组各组间无明显量效关系，与经紫外线照 射 1 小时的阳性对照组之间的差异具有高度统
3、计学意义（P0.05） ，实验组各组间无明显量效 关系，雌雄之间差别不显著，而与环磷酰胺阳性对照组之间的差异具 有高度统计学意义（P0.05), so that no dose-effect relationship was observed, and extremely significant difference between the positive control group treated with ultraviolet radiation for an hour and the other groups (P0.05), and extremely significant di
4、fference between the positive control group treated with cyclophosphamidum and the other groups (P0.05） 。从软件检测出的微弱拖尾现象推测，多数是碱性裂解和碱 性电泳时形成的碱易变性断片涌出造成，不具有特异性，当然各种操作因素也可 能造成微量的损伤，引起少量 DNA 断裂。 根据文献报道21,22,23，La3+在一定的浓度下确实可对 DNA 产生影响，而三 组复相陶瓷的 DNA 断裂效应无明显量效关系，且与对照组没有明显差别，初步 推断复相陶瓷不易释放 La3+， 而磷酸镧的质量百分比的增加
5、并不会加强 La3+的释 放。 2.4 结论 1. 分离培养的人外周血淋巴细胞经磷酸镧及三氧化二钇的含量分别为 30wt%和 3wt%、30wt%和 5wt%、40wt%和 5wt%的三组氧化锆/磷酸镧复相瓷块 连续 6 天染毒，均无明显生长抑制表现，且与 IPS Empress阴性对照组瓷块， 空白组生长趋势基本一致。 2. 以磷酸镧及三氧化二钇的含量分别为 30wt%和 3wt%、30wt%和 5wt%、 40wt%和 5wt%的三组氧化锆/磷酸镧复相瓷块连续 6 天染毒的分离培养的人外周 上海交通大学医学院 2006 级硕士学位论文 30 血淋巴细胞 DNA 均未出现明显的拖尾现象，实验
6、组各组间无明显量效关系，各 组尾矩值相互之间及与 IPS Empress阴性对照组瓷块，空白组之间的差异不具 有统计学意义（P0.05） ，与经紫外线照射 1 小时的阳性对照组之间的差异具有 高度统计学意义 （P0.05， 差别不具有统计学意义，提示各组体重增长近似。 表 2. 各组小鼠生存状态观察 表 2. 各组小鼠生存状态观察 Table2. The survival condition of each group of the mouse 观察时间 A 组 B 组 C 组 阴性对照组 空白组 阳性对照组 24h 未见毒性反应 未见毒性反应 未见毒性反应 未见毒性反应 未见毒性反应 未见毒
7、性反应 48h 未见毒性反应 未见毒性反应 未见毒性反应 未见毒性反应 未见毒性反应 未见毒性反应 72h 未见毒性反应 未见毒性反应 未见毒性反应 未见毒性反应 未见毒性反应 未见毒性反应 96h 未见毒性反应 未见毒性反应 未见毒性反应 未见毒性反应 未见毒性反应 未见毒性反应 表 3. 各组小鼠体重变化率( 表 3. 各组小鼠体重变化率(xs s ) ) Table3. The weight variance ratio of each group of the mouse (x s ) 组别 实验前体重 (g) 实验后体重 (g)体重增长 (g) 体重变化率 (%) A 组 19.80
8、0.49 23.940.99 4.240.49 21.372.09 B 组 19.490.64 23.841.08 4.350.49 22.282.00 C 组 19.800.79 24.211.20 4.410.51 22.231.96 阴性对照组 20.120.62 24.671.11 4.170.41 22.571.99 空白组 19.690.71 23.861.09 4.550.52 22.402.53 阳性对照组 19.960.88 24.451.56 4.490.69 21.972.00 F=1.064 P=0.391* 注： * P0.05 3.2.2 微核细胞形态观察（见图（见
9、图 14） 镜下（640）可以观察到，正染红细胞，即成熟红细胞染成浅紫红色，略 小于嗜多染红细胞，嗜多染红细胞为蓝灰色，含有微核的嗜多染红细胞微核数从 一个至数个不等。 上海交通大学医学院 2006 级硕士学位论文 37 图 14. 含有不同微核数的嗜多染红细胞（黄色箭头）及正染红细胞（红色箭头） （640） （小图 1、2、3、4、5、6 中嗜多染红细胞所含微核数为 0、1、2、2、3、多个） 图 14. 含有不同微核数的嗜多染红细胞（黄色箭头）及正染红细胞（红色箭头） （640） （小图 1、2、3、4、5、6 中嗜多染红细胞所含微核数为 0、1、2、2、3、多个） Figure 14.
10、Polychromatic erythrocytes containing different number of micronucleus (signed by yellow arrow) and normochromatic erythrocytes (signed by red arrow) (640) (PCE in pic.1, 2, 3, 4, 5, 6 containing 0, 1, 2, 2, 3 and several number of micronucleus) 3.2.3 各组小鼠 PCE/NCE 及 MNPCE/PCE 计数结果的比较 采用单因素方差分析及最小显著性
11、差异法比较各组小鼠 PCE/NCE 比值及细 胞微核率（雌雄分别统计） 。结果显示 A、B、C 组、空白组、阴性对照组小鼠 PCE/NCE 比值相互之间差异不具有统计学意义（P0.05） ，与阳性对照组小鼠 PCE/NCE 的比值差异明显（P0.05） ，接近小鼠的自发微核率，与阳性对照组小鼠微核率差异有统计学意 义（P0.01） ，而阳性对照组小鼠雌雄两组间的差别同样具有高度统计学意义 （P0.05 阳性对照组与其余各组间差异具有高度统计学意义，P0.05 阳性对照组与其余各组间，阳性对照组雌雄两组间的差异具有高度统计学意义，P0.05） ，实验组各组间无明显量效关系，雌雄之间差别不显 著，
12、而与环磷酰胺阳性对照组之间的差异具有高度统计学意义（P0.05） ，与经紫外线照射 1 小时的阳性对照组之间的差异具有 高度统计学意义 （P0.05） ，实验组各组间无明显量效关系，雌雄之间差别不显 著，而与环磷酰胺阳性对照组之间的差异具有高度统计学意义（P0.01） 。 上海交通大学医学院 2006 级硕士学位论文 48 参考文献 1. 张长瑞, 郝阮恺. 陶瓷基复合材料原理工艺. 性能与设计M. 长沙:国防大学出版 社, 2001, 613 2. Piconi C, Maccauro G. Zirconia as a ceramic biomaterialJ. Biomaterials,
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