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1、 学校代码： 研究生学号： lO 2 6 4 M 0 8 0 1 0 3 1 6 5 上海海洋大学 题 硕士学位论文 英文题目： 专业： 研究方向： 姓名： 指导教师： 植物添加剂对镜鲤生长性能、消化酶活性、肌肉品质、 血清生化和非特异性免疫力的影响 E f f e c t so fp l a n ta d d i t i v e so ng r o w t hp e r f o r m a n c e ， d i g e s t i v ee n z y m ea c t i v i t y , m e a tq u a l i t y , s e r u m b i o c h e m i
2、 c a li n d e x e sa n dn o n s p e c i f i ci m m u n i t yo ft h e m i r r o rc a r p ( C y p r i n u sc a r p i oL ) 动物营养与饲料科学 水产动物营养 唐玲 徐奇友研究员 上海海洋大学学位论文原创性声明 本人郑重声明：我恪守学术道德，崇尚严谨学风。所呈交的学位 论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除 文中已经明确注明和引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集 体已经发表或撰写过的作品及成果的内容。论文为本人亲自撰写，我 对所写的内容负责，并完全意识到
3、本声明的法律结果由本人承担。 学位论文作者等名：雳以 日期：如- 7 年参月钿日 上海海洋大学学位论文版权使用授权书 学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定， 同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子 版，允许论文被查阅或借阅。本人授权上海海洋大学可以将本学位 论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、 缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。 保密口 ，在年解密后适用本版权书。 学位论文作者躲磊必 指导教师躲翰季 日期：加7 年, n o B 日期：) f 年月菇劳 上海海洋大学硕士学位论文 答辩委员会成员名单 姓名工作单位职称备注 严云勤东北
4、农业大学教授主席 刘洪柏黑龙江水产研究所副研究员委员 卢彤彦黑龙江水产研究所研究员委员 石连玉黑龙江水产研究所研究员委员 徐伟黑龙江水产研究所研究员委员 李福来黑龙江水产研究所秘书 答辩地点黑龙江水产研究所答辩日期 2 0 11 6 10 ( 植物添加剂对镜鲤生长性能、消化酶活性、肌肉品质、血清生 化和非特异性免疫力的影响 摘要 本试验采用德国镜鲤( C y p r i n u sc a r p i oL ) 为试验对象，分别研究了 植物添加剂大蒜茎、牛至草、女贞子对镜鲤生长性能、消化酶活性、 肌肉品质、血清生化以及免疫器官指数、溶菌酶、超氧化物歧化酶、 丙二醛等非特异性免疫性能的影响，为新型
5、绿色植物添加剂在水产动 物中的开发和应用提供理论依据。 试验一设7 个处理组：G l 空白对照组，G 2 添加1 0 m g k g 黄霉素， G 3 、G 4 分别添加O 5 和2 5 大蒜茎粉，G 5 、G 6 组分别添加O 1 和 O 5 牛至草粉，G 7 添加O 5 大蒜茎粉和0 5 牛至草粉。每个处理设 3 个重复，每个重复1 0 尾鱼，初始体重为( 2 0 1 4 5 + 1 6 2 5 培，试验共进 行8 周，水温2 4 。C ，溶氧为5 5 6 5 m g L 。结果表明：1 ) 与G 1 和G 2 相比，G 3 显著提高了特定生长率和增重率，显著降低了饵料系数( P L e
6、u P r o V a l A l a S e t G l y ，P h e A r g T 1e T h r T y r L y ：s H i s M e t C y s ；其中有7 种人体必需氨基酸【5 2 1 。顾刚妹等研究表明，女贞子 含有1 7 种微量元素和5 种常量元素，其中有9 种人体必需的微量元素N i 、 F e 、Z e 、C r 、M o 、C a 、M n 、C o 、V 【5 3 1 。因此女贞子不仅含有多种生 1 2 对免疫器官的影响：贺新怀等用女贞子水煎剂1 2 5 m g k g 给小鼠灌 服7 d ，使小鼠脾、胸腺指数增加；给成年小鼠灌H 艮2 5 m g k
7、 g 使小鼠脾指 数显著增加，胸腺指数也有增加倾向。生女贞子则只对正常小鼠脾和 胸腺有增重作用，其他方面作用不明显。对免疫细胞的影响：1 ) 对 单核吞噬细胞的影响。范秦鹤用女贞子给小鼠灌服5 d 能显著增强血中 碳粒的清除率。酒蒸、加压、酒炖炮制的女贞子均能增强小鼠血碳粒 清除率及肝脾吞噬系数5 4 1 。2 ) 对T 细胞的影响。阴健等研究表明，女 贞子的7 0 乙醇提取液可促进淋巴细胞对植物血凝素的应答，对T 淋巴 细胞具有促进作用，这种促进作用是通过增强细胞表面受体的活性来 促进T 细胞的活性，并部分通过消除或消弱T 细胞作用来实现5 5 1 。女贞 子多糖对小鼠的免疫作用与机体的免疫
8、状态有关，对非特异性细胞免 疫有增强作用，对正常小鼠的特异性细胞免疫无显著影响，对免疫抑 制状态小鼠的细胞免疫有增强作用。 4 3 抗氧化、延缓衰老作用 衰老的自由基理论认为，随年龄的增长，体内氧自由基量增多， 身体对自由基的防禁和清除能力下降，自由基在体内通过过氧化脂质 作用造成组织细胞损伤和器官的通行性变，从而加速衰老的过程，过 氧化物歧化酶( 是自由基清除体系中重要的过氧化酶。女贞子多糖能抑 上海海洋大学硕一 ：学位论文 制衰老小鼠胸腺指数和脾脏指数下降，抑制抗心、肝、肾组织中M D A 升高以及心、肝、肾组织中超氧化合物歧化酶及谷胱甘肽过氧化酶活 力下降州。周岳奇吲等以改良的连苯三酚自
9、氧化法和极谱氧电极法测 量了漏芦和女贞子提取液中含有的超氧化合物歧化酶的活性，检测结 果表明其活性成分为2 9 5 5 I U m I 。 4 4 调控肠道菌群作用 研究表明，女贞子水提物对鸡白痢沙门杆菌、金黄色葡萄球菌均 有抑菌作用。郭晓秋5 8 1 采用琼脂平板扩散法( 打孔法) 进行体外抑菌试 验，观察不同浓度女贞子水提物对鸡常见病原菌生长的影响。结果表 明在0 1 2 5 0 5g r n C 浓度范围内，随着药液浓度的升高抑菌程度加强， 并在0 5g m e 时达到最高，而对鸡大肠杆菌无抑菌作用。许多资料显示 补益类中草药对肉鸡肠道菌群具有调节作用。徐国钧采用平板挖沟法 发现女贞子5
10、 0 煎剂对金黄色葡萄球菌、福氏痢疾杆菌、伤寒杆菌、绿 脓杆菌和大肠杆菌均有抑制作用，这与吴葆杰中草药药理学一书 中的相关内容相符。刘志春也证实1 5 种补益中药对金黄色葡萄球菌等 有抑制作用。另外，用不同的溶剂对女贞子有效成份进行提取，其抑 菌效果可能不同。 4 5 女贞子在动物中应用 女贞子作为一味中草药，其机理及应用的研究主要集中在医学上， 而作为饲料添加剂的研究报道很少，目前相关研究的主要以畜禽为实 上海海洋大学硕。【：学位论文 验对象。马得莹【5 9 1 研究表明，I I Y J 女贞子能显著提高热应激产蛋鸡的 产蛋率，显著提高蛋鸡的抗氧化机能；显著提高血清或心脏S O D 活性；
11、显著降低组织、血清、心脏和蛋黄中的M D A 含量；对热应激引起的蛋 鸡脂质过氧化状态有明显改善作用。郭晓利5 8 1 研究发现，在日粮中添 加O 2 或0 4 女贞子水提物均可提高1 4 周和5 7 周肉仔鸡的日增重，降 低料重比，可显著提高肉仔鸡的抗氧化机能。李群道【6 0 1 研究发现，与 对照组相比，6 周龄女贞子组肉仔鸡的胸腺、法氏囊、脾脏指数均有所 提高，但差异不显著。王超英1 6 2 1 的试验结果表明，日粮中分别添加 2 3 女贞子、黄芪、淫羊藿、白术、党参和猪苓均可显著提高鸡外 周t i n T 淋巴细胞转化率。黄一帆6 1 1 选用淫羊霍、女贞子、黄芪等中药组 方，以1 比
12、例加入日粮中饲喂雏鸡，并在用药后分3 次检测雏鸡血清 N D H I 抗体效价、血清丙球蛋白含量、T 淋巴细胞阳性率( A N A E 法) ， 结果显示，该中草药添加剂能显著提高雏鸡3 项免疫学指标。王环宇6 2 】 的研究表明，添加O 2 女贞子萃取物可显著增加鸡肉中鲜味物质肌苷 酸的含量，改善肉风味及口感，添加效果好于黄霉素。 5 本研究的实用价值和理论意义 我国中草药资源十分丰富，而且多生长于深山荒野，无农药污染， 利用方便。在发展中草药饲料添加剂方面有得天独厚的优势，应分利 用这些优势加速对中草药饲料添加剂的研究和开发。近年来中草药添 加剂的研究开发已取得了定进展，但仍存在许多问题有
13、待解决，如 成分复杂，作用机理不清，作用效果不稳定，剂型单一，缺乏检验标 1 气 上海海洋大学硕f ：学位论文 准等。因此要应用现代科学技术手段，对其作用机理进行深入探讨， 提高单味中草药和配伍性能的研究，既要考虑动物防病治病的作用， 又要考虑其营养保健作用。完善加工工艺，既保证有效成分不破坏又 能节约生产成本。 目前大蒜素、牛至油和女贞子在养殖业中的研究报道己经很多， 表明它们对动物生长、免疫产生一定的效果，但它们主要通过天然提 取或化工合成获得的其有效成分，加工工艺复杂、成本高昂。大蒜茎 叶、牛至草及女贞子来源广成本低廉，无需深加工，植株体内有效成 分不会被破坏；另外可减少大蒜茎叶废弃所造
14、成的资源浪费和对环境 的污染。这三味中草药对镜鲤的研究尚未报道过。因此本研究用大蒜 茎粉、牛至草粉和女贞子粉末饲养镜鲤，观察它们对镜鲤生长性能和 非特异性免疫性能的影响，为充分开发利用既有营养功能又有药用价 值的绿色添加剂提供理论参考。 高密度和集约化的水产养殖方式导致目前渔业水域环境恶化，引发养殖动物 的应激反映，使水产动物机体的免疫系统受到抑制，导致各类细菌病和病毒病频 繁发生。水产养殖常用的饲料添加剂除了营养性添加剂外，大多还含有抗生素、 抗球虫药及其他化学合成类抗菌药物，它们配合饲料使用对提高水产品产量及推 动水产养殖业发展起着至关重要的作用。然而长期配合饲料使用易使病原菌株产 生抗药
15、性，易导致水产品药物残留量增加，危害人体健康1 6 l 。免疫系统是鱼类执行 防御功能的机构，鱼类依靠免疫系统来抵御病害生物的入侵和感染疾病后的康复 【6 3 1 ，鱼类的免疫系统主要包括免疫组织器官、免疫细胞和体液免疫因子三大类。 鱼类作为低等脊椎动物，主要依靠非特异性免疫系统来抵抗病原入侵。除皮肤、 粘膜、血脑屏障等，还包括主要反映非特异性免疫能力的溶菌酶、补体、超氧化 物歧化酶、丙二醛等【矧。目前，开发利用新型绿色添加剂既能促进水产动物生长 又能提高免疫能力增强抗抵防御疾病，另外具有不产生抗药性，无药物残留等特 点，是一种极为有效的、具有广阔发展前景的方法。 德国镜鲤( C y p r
16、i n u sc a r p i o ) 原西德引进的品种，经过黑龙江水产研究所2 0 多 年的系统选育，已选育出适于我国大部分地区养殖的德国镜鲤选育系。选育系最 显著的特点是比原种在抗寒、抗病等方面有很大的提高。北方地区也叫“三花鲤鱼”、 “三道鳞”。德国镜鲤体形较粗壮，侧扁，头后背部隆起，头较小，眼较大，体表鳞 片较大，沿边缘排列，背鳍前端至头部有行完整的鳞片，背鳍两侧各有一行相 对称的连续完整鳞片，各鳍基部均有鳞。德国镜鲤鳞片少、生长速度快、含肉率 高、肉质好，已被全国水产良种审定委员会审定为适合在我国推广的水产优良养 殖品种。在合理的放养密度和较优的饲养条件下，饲养成活率达9 8 左右，越冬 成熟率达9 6 ，其生长速度超过其它鲤鱼的生长速度【6 5 1 。德国镜鲤作为北方主要 的养殖品种，因此对其营养和免疫的研究也成为热点。本试验旨在镜鲤基础饲料 中添加不
