《菜花DNA的粗提取与鉴定》由会员分享，可在线阅读，更多相关《菜花DNA的粗提取与鉴定（1页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、菜花DNA的粗提取与鉴定一、 实验目的1. 了解并掌握实验原理；2. 学会动物材料和植物材料的DNA提取和鉴定的方法；3. 通过本实验培养实验操作能力和观察能力；4. 学会使用微量可调移液器。二、 实验原理1. 菜花表皮部分细胞分裂旺盛，DNA含量丰富，并且材料无色，便于鉴定；2. 研磨液中的变性剂SDS可促使细胞破裂，释放出DNA；3. DNA不溶于酒精，而细胞中某些物质溶于酒精，可以用酒精提取含杂质较少的DNA；4. DNA中的嘌呤核苷酸中的脱氧核糖遇酸形成-羟基-酮基戊醛，她和二苯胺试剂沸水浴条件下作用呈现蓝色，因此二苯胺可作为鉴定DNA 的试剂。三、 材料器具 菜花（顶部部分） 研磨过
2、滤器 移液器 试管 玻璃棒 水浴锅 研磨液 无水乙醇（冰） 二苯胺试剂 注：试剂要求1. 无水乙醇提前放冰箱冷藏，可容易并且快速溶解DNA。2. 二苯胺试剂A与二苯胺试剂B现用现混，A为强酸溶液，用时需小心，B液加A液中。A：B=100:1四、 实验步骤1. 研磨液释放DNA切取菜花表层约5g，放入研磨过滤器外套筒中，加入2ml研磨液，插入研磨杆，朝一个方向按压旋转研磨3min。2. 冰无水乙醇提取DNA打开研磨杆上盖，用移液器取研磨液2ml，转至试管中，缓慢沿试管闭加入4ml冰无水乙醇，轻轻旋转试管，可看到白色絮状物出现，即提取出的缠绕在一起的DNA。3. 二苯胺鉴定DNAa) 溶解DNA：用玻璃棒挑出白色絮状DNA转移到另一试管中，加1ml 2 mol/L的Nacl溶液使DNA溶解以液体形式呈现，便于鉴定。b) 设置对照组：另外一试管中加1ml 2 mol/L的Nacl溶液作为对照。并对两只试管进行标记。c) 二苯胺水浴鉴定：两只试管中各加1ml二苯胺试剂，在沸水浴中加热10min，观察颜色变化。五、 实验结果 加入白色絮状物的试管中颜色变为蓝色，另一对照试管中没有颜色变化，说明提取出了菜花中的DNA。
