动物、矿物药分析.

《动物、矿物药分析.》由会员分享，可在线阅读，更多相关《动物、矿物药分析.（122页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。

1、动物药分析动物药分析 概述概述 u动物药是中药的重要组成部分。 u我国应用动物药历史悠久。在4000年前甲骨 文就记载有40余种药用动物，如麝、犀牛、 蛇等。 u最早的本草神农本草经也收有僵蚕、犀 角、地龙等67种动物药。 u中国药用动物志收载1500种。全世界已 用的动物药超过了2000种。 n目前我国供药用的动物千余种。 n 80年代进行的全国药物资源调查表明：我 国现有中药资源12,809种。 其中药用植物11,146种，占87.03%； 药用动物 1,581种，占12.34%； 药用矿物 80种，占 0.63%。 n 动物药中其中有不少为疗效显著的名贵 中药，如牛黄、熊胆、麝香、羚羊角

2、、海 马、海龙、蛤蚧、阿胶、鹿茸等， n 常用动物药还有全蝎、蜈蚣、僵蚕、斑 蝥、蟾酥、蛤蟆油、龟板、鳖甲、穿山甲 、蕲蛇、乌骨鸡等。 1. 动物活性成分的特点 （1）疗效确实 熊胆中的熊去氧胆酸和鹅去氧胆酸具有溶解胆 石作用。 蟾毒配基就具有升压、强心、兴奋呼吸等作用 。 从人尿中提取的尿激酶（现已能从组织培 养人类肾细胞获得），可直接激活纤溶酶 原使其变为纤溶酶。后者具有很强的溶解 纤维蛋白的作用。临床上用于脑血栓形成 、脑栓塞及心肌梗塞等。 水蛭素是最强的凝血酶抑制剂等。 （2 2）生理活性强）生理活性强 箭毒蛙碱是最强的心脏毒之一。能使各种起箭毒蛙碱是最强的心脏毒之一。能使各种起 电膜

3、有选择性地增加对钠离子的通透性。电膜有选择性地增加对钠离子的通透性。 沙海葵毒素是已知最强的冠脉收缩剂，作用沙海葵毒素是已知最强的冠脉收缩剂，作用 与强心苷相似，但活性强与强心苷相似，但活性强100100倍以上，具有倍以上，具有 抗癌、抗白血病的作用，其毒性比氰化钠高抗癌、抗白血病的作用，其毒性比氰化钠高 12501250倍。倍。 （3 3）应用面广）应用面广 n动物活性成分在医药方面具有独特的疗 效外，近年来还发现他们是研究分子级 产品的有力工具，也是有希望的检验试 剂。有的活性成分如昆虫信息素还可无 害地用于诱杀害虫，这对于农业生产具 有重要的意义。 （4 4）潜力大）潜力大 动物药源丰富

4、。现存动物已命名的有150万种， 而植物仅50万种，但对动物药的研究较植物药则 相形见绌。海洋药物资源也很可观。地球上的生 物80%在海洋。 海洋生物与陆地环境不同，它又具有独特的化 学性质，活性成分的筛选命中率更高。如美国国 家肿瘤研究所年筛选的3万个抗肿瘤样品中1500个 来自海洋。其中具抗癌活性的占1%。其中发现某 些软体动物、棘皮动物和海绵动物命中率高。 2. 动物药的化学成分分类 （1）蛋白质及其水解产物 （2）生物碱类 （3）甾类化合物 （4）酮类、酸类成分 第二节 常用动物类中药分析 一、含胆汁酸类中药（牛黄、熊胆、猪胆粉）分析 （一）胆汁酸的结构特征及其在动物界的分布 n 天然

5、胆汁酸是胆烷酸的衍生物，在动物胆汁中 它们通常与甘氨酸或牛磺酸以肽键结合成甘氨胆 汁酸或牛磺胆汁酸并以钠盐形式存在。 n 胆汁酸的异构现象主要是由分子中碳环和环上 取代基在空间排列不同而引起的，AB环有顺反 两种稠合方式，BC环以反式稠合，CD环也几 乎都是以反式稠合（强心苷和蟾毒配基例外）。 胆烷酸 胆酸 粪甾烷酸 在高等动物胆汁中，通常发现的胆汁酸是含 有24个碳原子的胆烷酸的衍生物，常见的有 胆酸、去氧胆酸、鹅去氧胆酸、-猪去氧胆 酸及石胆酸等。 而在鱼类、两栖类和爬行类动物中发现的胆 汁酸则含有27个碳原子或28个碳原子，这类 胆汁酸是粪甾烷酸的羟基衍生物，而且通常 是和牛磺酸相结合存

6、在于动物胆汁中。 主要胆汁酸见表16-1。 （二）胆汁酸化学性质及鉴定方法 1胆汁酸的化学性质 一般是指胆汁酸中各功能基的反应，主 要有以下几方面。 （1 1）末端羧基反应）末端羧基反应 成盐：游离的胆汁酸类在水中溶解度很 小，形成盐后则易溶于水，如胆酸在 20水中的溶解度为0.028，而其钠盐 为56。 还原反应：胆汁酸在乙醚中和氢化锂铝 作用，或者在乙醇中与金属钠作用。羧 基被还原，C24酸被还原成相应的C24醇。 （2）环上羟基的乙酰化反应 甾环上的羟基可按常法乙酰化，乙酰化物容 易结晶，有一定的熔点，有利于胆汁酸的 纯化和精制。 （3）甾环上酮基的还原反应 除胆酸易于得到外，其它胆汁酸

7、由于资源 限度，大量制备用于临床有困难，目前一 般是采用胆酸作原料来加工制备，如除去C7 位上的羟基，则变为去氧胆酸；除去C12位 羧基，则变为鹅去氧胆酸；除去C7，C12位 上的羟基，则变为石胆酸。 （1）化学法 PenkoferPenkofer反应：反应：原理是蔗糖经浓硫酸作用生成羟甲 基糖醛，后者可与胆汁酸结合成紫色物质。 Gregory Gregory PascoePascoe反应：反应：加45硫酸、0.3糠醛；胆 汁存在的溶液显蓝色。此方法也可用于胆酸的定 量分析 2胆汁酸的鉴别方法 n硅胶薄层色谱广泛用于动物胆汁中胆汁酸 分离和鉴定。 分离游离胆汁酸的展开剂 分离结合胆汁酸的展开剂

8、 显色剂：30硫酸试剂、10磷钼酸乙醇 试剂、苯甲酸试剂、茴香醛试剂、三氯化 铁试剂、三氯化锑试剂、重铬酸钾饱和的80 硫酸试剂等。 （2 2）薄层色谱法）薄层色谱法 18 （三）牛黄、熊胆、猪胆粉的来源及主要化 学成分 1牛黄 牛黄为牛科动物牛Bos taurus domesticus Gmelin 的胆囊结石、少数为胆管、肝管结石。具清心 、开窍、镇惊、豁痰、息风、解毒的功效。 n 京牛黄：北京、天津、内蒙古 n 东牛黄：东北 n 西牛黄：西北、河南 n 印度牛黄：印度 n 金山牛黄：加拿大、阿根廷、乌拉圭 n 澳洲牛黄：澳大利亚 19 许多著名的中成药，如安宫牛黄丸、牛黄 解毒丸、牛黄消

9、炎丸、牛黄清心丸、珠黄 散、再造丸等中均含有牛黄。 牛黄中含有较多的胆汁酸，其中主要为胆 酸（5%11%）、去氧胆酸（约2）、鹅 去氧胆酸（0.6%1.7%）及其盐类，并含7% 的SMC（Smooth muscle contractor，水溶性 肽类化合物，具收缩平滑肌及降低血压作 用）、胆红素（bilirubin）及其钙盐、胆甾 醇、多种氨基酸及多种无机元素。 20 21 22 23 n 天然牛黄应用范围广，药源短缺，价格昂贵， 故伪品甚多，多用动、植物组织伪造。如用黄连 、黄柏、石松子、海金砂、大黄、姜黄等粉末为 主要原料，加蛋清、蛋黄、牛胆汁等制造。 n 由于牛胆结石发病率低，约为0.2

10、%，所以天然 牛黄药源紧张，寻找代用品成为必然趋势。 n 有关人工牛黄 我国卫生部颁布人工牛黄标准：胆酸含量限度 应为标示量的90%110%，总胆酸的含量应不得少 于25%；胆红素含量应为标示量的90%以上。人工 牛黄应为黄色疏松的粉末，味苦，微甘。 24 天然牛黄、人工牛黄成分对比天然牛黄、人工牛黄成分对比 n1）天然牛黄 ： 2）人工牛黄： n胆红素 胆红素 n去氧胆酸 猪去氧胆酸 n胆酸 胆酸 n去氧胆酸 胆固醇 n结合型胆甾酸盐 磷酸三钙 n牛黄酸 硫酸镁 n胆固醇 硫酸亚铁 n粘蛋白 淀粉 n氨基酸 n肽类、脂肪酸 n卵磷脂 n钙盐、无机盐 25 2熊胆 n 熊胆为熊科动物黑熊Sel

11、enarctos thibetanus Cuvier 或棕熊Ursus arctos L. 的干燥胆。有清热、解痉、 平肝、明目的功效。 n 熊胆的化学成分主要为胆汁酸，其中熊去氧胆 酸（ursodeoxycholic acid）占大部分，并含有鹅去 氧胆酸（chenodeoxycholic acid）、胆酸及去氧胆 酸等。这些胆酸通常与牛磺酸、甘氨酸结合，并 形成钠或钙盐而存在。 n 熊胆的解痉作用的主要有效成分就是熊去氧胆 酸，它也是熊胆特有的成分. 26 27 28 29 30 3猪胆粉 猪胆粉为猪科动物猪Sus scrofa dommestica Brisson. 胆汁的干燥品。有清热

12、、润燥、解毒、 止咳平喘的功效。 猪胆中亦含有多种胆汁酸类成分，主要成分为 猪去氧胆酸，亦含有鹅去氧胆酸、胆酸等成分 。 32 （四）牛黄的定性分析（四）牛黄的定性分析 1、化学法 （1）取牛黄粉末少量，加氯仿1ml，摇匀，再加硫 酸与30过氧化氢溶液各2滴，振摇，即显绿色。 （2）取牛黄粉末约0.2g，加盐酸1ml，再加乙醚20ml 振摇提取，放置，分取乙醚液，滤过后置分液漏 斗中，加氢氧化钡饱和溶液20ml，振摇，即发生 黄色沉淀。分离除去水层及沉淀，醚层用氢氧化 钡饱和溶液洗涤。分取醚层，滤过，蒸干，残渣 加氯仿1m1溶解，加醋酐1m1与硫酸2滴，振摇， 放置10min，即显绿色。 （3

13、）取牛黄粉末0.1g，加60醋酸4m1，研 磨，滤过，取滤液1m1，加新制的糠醛溶液（ 1100）1m1与硫酸（取硫酸50m1，加水 65m1，混合）10ml，置70水浴中加热10min ，即显蓝紫色。 34 2薄层色谱法 n取本品粉末10mg，加氯仿20ml，超声处理30min， 滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供 试品液。另取胆酸、去氧胆酸对照品，加乙醇制 成每1ml各含2mg的混合溶液，作为对照品液。 n 吸取上述溶液各2l，分别点于同一硅胶G薄层板 上，以异辛烷- 乙酸乙酯- 冰醋酸（15：7：5）为 展开剂，展开，取出，晾干，喷以10% 硫酸乙醇 液，在105加热至斑点显

14、色清晰，置紫外光灯（ 365nm）下检视，供试品色谱中，在与对照品色 谱相应的位置上，显相同颜色的两个荧光斑点。 35 游离胆汁酸的鉴别 36 结合胆汁酸的鉴别 37 38 人工牛黄的定性鉴别：人工牛黄的定性鉴别： （1）取人工牛黄粉末适量，分为2份，1份加硫酸呈污绿 色，另1份加硝酸显红色。 （2）人工牛黄在可见光下CHCl3max453nm处有最大吸收。 （3）人工牛黄与天然牛黄的IR吸收光谱有明显差异。 （4）胆红素化学反应： n Van den Bergh反应（重氮化反应）：胆红素与重氮化 试剂中的对氨基苯磺酸合成偶氮染料。此偶氮染料在强 酸中呈蓝紫色；pH2.0 5.0呈红色；5.0

15、以上则呈绿色（ 500 560nm）。 39 （五）牛黄的定量分析（五）牛黄的定量分析 1薄层扫描法测定胆酸含量 2薄层扫描法测定六应丸中牛黄的有效成分 3薄层扫描法测定牛黄中胆汁酸的含量 4气相色谱法测定牛黄中胆汁酸的含量 5导数光谱法测定人工牛黄中胆酸的含量 40 6胆红素的含量测定 n 对照品溶液的制备：取胆红素对照品约10mg，精密称定，置 100ml棕色量瓶中，加氯仿溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量 取5ml,置50ml棕色量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀，即得（每1ml 中含胆红素0.01mg）。 n 标准曲线的制备：精密量取对照品溶液1.0ml、2.0ml、3.0ml 、4.0ml、5.0ml，置具塞试管中，分别加乙醇至9ml，各精密加 重氮化溶液（甲液：取对氨基苯磺酸0.1g，加盐酸1.5ml与水适 量使成100ml；乙液：取亚硝酸钠0.5g，加水使溶解成100ml， 置冰箱内保存。用时取甲液10ml与乙液0.3ml，混匀）1ml，摇 匀，于1520暗处放置1h，以相应的试剂为空白，照分光光 度法，在533nm的波长处测定吸收度，以吸收度为纵坐标，浓 度为横坐标，绘制标准曲线。 41 n 测定法：取牛黄细粉约10mg，精密称定，置锥 形瓶中，加氯仿和乙醇（7：3）的混