微包埋培养技术的建立及其在粘细菌分离纯化中的应用

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1、专 导 业 发酵工程 师李越中教授 2 0 1 0 年5 月1 5 日 、 关于学位论文使用授权的声明 r 本人完全了解山东大学有关保留、使用学位论文的规定,同 意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子 版,允许论文被查阅和借阅;本人授权山东大学可以将本学位论 文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、 缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。 ( 保密论文在 论文作者签名: 一1 冬 高莉乞导师签名汤t ,溅 lII|l 一 一 J I 1 3 3 固定化培养技术在粘细菌研究中的应用10 第二章微包埋培养技术的建立1 1 2 1 实验材料与仪器试剂1 l 2

2、1 1 菌株11 2 1 2 主要培养基12 2 1 3 主要实验试剂1 2 2 1 4 主要仪器设备与耗材1 4 2 1 5 分析软件15 2 2 实验方法15 2 2 1 纤维堆囊菌的培养1 5 2 2 2 微包埋培养技术的优化及应用1 5 2 2 3 纤维堆囊菌基因组D N A 的提取1 8 2 2 4 纤维堆囊菌1 6 Sr R N A 序列的测定1 9 2 3 实验结果及讨论2 l 2 3 1 微包埋培养基本条件的建立及优化2 l 2 3 2S 0 0 1 5 7 2 和S 0 1 5 7 2 4 单细胞混合液的分离纯化2 8 2 4 本章小结2 9 第三章微包埋培养技术在纤维堆囊菌

3、突变株分离纯化中的应用3 1 3 1 实验材料31 “ 3 1 1 菌株3 1 3 1 2 主要培养基3 2 3 1 3 主要实验试剂3 2 3 1 4 主要仪器设备及耗材3 2 J V 1 l 1 l 2 3 5 6 6 7 8 8 8 9 , , 山东:学硕 j 学位论文 3 2 实验方法 3 2 1 纤维堆囊菌的培养 3 2 2 微包埋培养w 5 3 2 3 2 3 纤维堆囊菌的发酵 3 2 4 发酵产物H P L C 检测 3 3 实验结果及讨论 3 4 本章小结 第四章微包埋培养技术在粘细菌资源开发中的应用初 4 1 实验材料与实验仪器 4 1 1 土样一3 8 4 1 2 菌株3

4、8 4 1 3 主要培养基3 8 4 1 4 主要实验试剂3 9 4 1 5 主要仪器设备及耗材4 0 4 1 6 软件工具4 0 4 2 实验方法4 1 4 2 1 粘细菌的培养4 1 4 2 2 孢囊杆菌亚目不同属的粘细菌对D K l 6 2 2 的助长4 1 4 2 3 包埋土样进行土壤中粘细菌的分离4 1 4 2 4 凝胶球粒内菌株的分类鉴定4 4 4 2 5 凝胶球粒内菌株的再培养4 8 4 2 6 菌落P C R 4 9 4 3 结果及讨论4 9 4 - 3 1 孢囊杆菌亚目不同属粘细菌对D K l 6 2 2 菌株的助长情况4 9 4 3 2 对土壤悬液进行包埋培养条件的确定5

5、I 4 3 3 孢囊杆菌亚目不同属的粘细菌作为助长菌株时包埋培养的结果5 6 4 3 4 凝胶球粒内粘细菌的再培养5 8 4 4 本章小结6 1 全文总结6 3 参考文献6 5 致谢6 9 攻读学位期间发表的论文7 0 学位论文评阅及答辩情况表7 1 I I I I V 1 1 1 1 。2 3 5 6 6 7 8 9 1O 13 13 C h a p t e r2 E s t a b l i s h m e n to f m i c r o e n t a p m e n tp r o t o c o li nm y x o b a c t e r i a 1 3 2 1M a t e r

6、i a l sa n de q u i p m e n t s 1 4 2 1 1S t r a i n s 1 4 2 1 :! M e d i a 1z :! 1 3R e a g e n t s 1 4 :! 1 4E q u i p m e n t s 16 2 1 5S o 讯v a r e s 17 2 :! M e t h o d s 17 2 2 1C u l t u r eo f S o r a n g i u mc e l l u l o s u m 17 2 2 2O p t i m i z a t i o no f m i c r o e n t r a p m e n tc u l t i v a t i o n 17 2 2 3E x t r a c t i o nt h eg e n o m eD No f S o r a n g i u mc e l l u l o s u m 2 0 2 2 41 6 Sr R N As e q u c i n go f S o r a n g i u mc e l l u l o s u m 2 1 2 3R e s u l t sa n d

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