农杆菌介导的p2300pa8e基因转化马铃薯抗虫研究(1)

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1、U D C : D i s s e r t a t i o nf o rt h eM a s t e rD e g r e ei nA g r i c u l t u r e A G R O BA C T E R I U M M E D I A T E D T RA N S F O R M A T I O NO FP 0 1 l A T O T H 玳S E C TR E S I S T A N C EG E N E P 2 3 0 0 - p a - 8 e C a n d i d a t e : S u p e r v i s o r : A c a d e m i c D e g r e

2、 eA p p l i e d f o r : S p e c i a l i t y : D a t eo fO r a lE x a m i n a t i o n : U n i v e r s i t y : Y a n gZ h i c h a o P r o f L uC u i h u a M a s t e ro f A g r i c u l t u r e C r o pG e n e t i c sa n dB r e e d i n g J u n e 2 0 1 0 N o r t h e a s t A g r i c u l t u r a lU n i v e

3、r s i t y 目录 中文摘要I 英文摘要I I lj ;I 言1 1 1 研究目的和意义l 1 2 文献综述2 1 2 1 马铃薯遗传转化研究进展。2 1 2 2 马铃薯遗传转化的方法。3 1 2 - 3 地下害虫蛴螬的危害和防治9 1 2 4 苏云金芽胞杆菌c r y 8 类基因的研究。1 0 1 2 5 转基因抗虫育种中存在的问题及发展策略1 4 1 2 6 马铃薯抗虫基因工程研究进展2 0 1 2 7 转基因植物的商业化生产2 0 2 材料与方法2 2 2 1 材料与试剂2 2 2 1 1 植物材料2 2 2 1 2 菌株与质粒2 2 2 1 3 酶和试剂2 3 2 1 4 仪器设

4、备2 3 2 1 5 抗生素和激素2 4 2 2 试验方法2 4 2 2 1 农杆菌的活化与保存2 4 2 2 2 农杆菌介导转化马铃薯的方法2 4 2 2 3 马铃薯遗传转化影响因素探讨2 5 2 2 4 再生植株的分子检测2 6 2 2 5 转基因植株的移栽3l 2 2 6 转基因植株的抗虫试验3 1 3 结果与分析。3 3 3 1 遗传转化体系影响因素探讨3 3 3 1 1 薯块再生培养基的确定3 3 3 1 2 农杆菌工程菌液的浓度及侵染时间对遗传转化的影响3 4 3 1 3 共培养时间对遗传转化的影响3 5 3 1 4 脱菌抗生素种类及浓度对遗传转化的影响:3 6 3 1 5 芽诱导

5、阶段选择压的确定3 6 3 1 6 生根阶段选择压力的确定3 6 东北农业大学农学硕士学位论文 3 2 转基因植株的获得3 7 3 3 转基因植株的分子检测3 9 3 3 1 转基因植株的P C R 分析。3 9 3 3 2 转基因植株的P C R 。S o u t h e m 杂交3 9 3 3 3 转基因植株的S o u t h e r n 杂交4 0 3 4 网室移栽与转基因马铃薯的获得4 l 3 5 转P 2 3 0 0 - p a 8 e 基因早大白和克新1 8 号的抗虫鉴定4 2 4 讨论4 3 4 1 马铃薯转化再生系统的选择。4 3 4 2 薯块再生培养基的确定o 。4 3 4

6、 3 农杆菌浓度及侵染时间对遗传转化的影响4 3 4 4 共培养时间对遗传转化的影响4 4 4 5 脱菌剂的选择4 4 4 6K a n 浓度的确定4 4 5 结论4 6 致谢4 7 参考文献。4 7 附录。5 8 图版。5 9 图版说明6 3 攻读硕士学位期间发表的学术论文。“ 一 - C o N T E N T S C h i n e s eA b s t r a c t I E n g l i s hA b s t r a c t 】 I 1I n t r o d u c t i o n 1 1 1T h ep u r p o s ea n di m p l i c a t i o n

7、1 1 2L i t e r a t u r er e v i e w 2 1 2 1R e s e a r C ho fp o t a t og e n e t i ct r a n s f o r m a t i 2 1 2 2M e t h o do fp o t a t og e n e t i ct r a n s f o r m a t i o n 3 I 2 3G r u bD a m a g ea n dC o n t r o l 9 1 2 4S t u d yo ng e n e sc r y 8o fB a c i l l u st h u r i n g i e n s

8、 i s 1 0 1 2 5T r a n s g e n i cb r e e d i n gp r o b l e m sa n dd e v e l o p m e n ts t r a t e g y 14 1 2 6A d v a n c e si ng e n e t i ce n g i n e e r i n go fi n s e c t - r e s i s t a n tp o t a t o 2 0 1 2 7T r a n s g e n i cp l a n t sf o rc o m m e r c i a lp r o d u c t i o n ”2 0 2

9、M a t e r i a l sa n dM e t h o d s 2 2 2 1M a t e r i a l sa n dr e a g e n t s 2 2 2 1 1P l a n tm a t e r i a l s 。2 2 2 1 2S t r a i na n dp l a s m i d 2 2 2 1 3T h ee n z y m e sa n db i o c h e m i c a lr e a g e n t s 2 3 2 1 4E q u i p m e n t s 2 3 2 1 5A n t i b i o t i C Sa n dp l a n th o r m o n e s

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