《内皮祖细胞epcs对移植性动脉硬化的作用及其机制研究》由会员分享，可在线阅读，更多相关《内皮祖细胞epcs对移植性动脉硬化的作用及其机制研究（98页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、0 指导小组成员名单 指导小组成员名单 洪涛主任医师 陈吴副教授 夏利民副主任医师 基金资助： 多器官移植的临床应用一心脏移植( 上海市科委重大项目 0 2 4 1 1 9 0 0 1 ) 结果 讨论 参考文献 3 7 4 1 第三部分 V a n d e t a n i b 对E P C s 数量和生物学功能的抑制作用及机制 前言4 3刖舌4 3 材料和方法 4 3 结果 5 0 讨论5 6 参考文献 6 0 第四部分 V a n d e t a n i b 抑制E P C s 对移植性动脉硬化的影响 前言 6 2日U 舌 6 2 1 1 1 111I I111 0 6 8 4 博士论文 材
2、料和方法 结果 讨论 参考文献 文献综述 致谢 附件 论文声明 9 l 9 3 封3 l I 英文缩写 A P C A R 斟 C A D C A G c 斟 C D C C R C s A D A P I e N O S E G F E P C s F C M F I T C 脏 H L A I C A M 1 I 砒 英汉缩略词表 英文全称 a n t i g e np r e s e n t i n gc e l l a c u t er e j e c t i o n a l l o g r a Rv a s c u l o p a t h y c o r o n a r ya r t
3、 e r yd i s e a s e c o r o n a r ya n g i o g r a p h y c a r d i a ca l l o g r a f tv a s c u l o p a t h y c l u s t e ro fd i f f e r e n t i a t i o n c y t o m e g a l o v i r u s c h r o m cr e j e c t i o n c y c l o s p o r i n eA 4 ，6 - d i a m i d i n o 一2 - p h e n y l i n d o l e e n d
4、 o t h e l i a ln i t r i co x i d es y n t h a s e e p i d e r m a lg r o w t hf a c t o r e n d o t h e l i a lp r o g e n i t o rc e l l s f l o wc y t o m e t e r f l u o r e s e e i ni s o t h i o c y a n a t e h e m a t o x y l i n - e o s i n h u m a nl e u c o c y t ea n t i g e n i n t e r
5、c e l l u l a ra d h e s i o nm o l e c u l e - 1 i s e h e m i a - r e p e r f u s i o ni n j u r y 中文全称 抗原递呈细胞 急性排斥反应 同种异体移植物血管病变 冠状动脉病变 冠状动脉造影 心脏移植物血管病变 分化抗体群 巨细胞病毒 慢性排斥反应 环孢素A 4 , 6 - - “ 脒基2 苯基吲哚 内皮一氧化氮合成酶 表皮生长因子 内皮祖细胞 流式细胞仪 异硫氰酸荧光素 苏木素一伊红 人类白细胞抗原 细胞间黏附分子 缺血再灌注损伤 I s H L T = l 慧 f o rH e a n雒d
6、瓯心肺移植协会 U S L D L M H C M N C s P B S i n t r a v a s c u l a ru l t r a s o n o g r a p h y l o wd e n s i t yl i p o p r o t e i n 血管内超声检查 低密度脂蛋白 m a j o rh i s t o c o m p a t a b i l i t yc o m p l e x 主要组织相容性复合物 m o n o n u c l e a rc e l l s单个核细胞 p h o s p h a t eb u f f e r e ds o l u t i o n
7、 磷酸盐缓冲液 囊 ， T 文C A D 粤c l l s p l a n t 。勰s 。c l a 钯d c 。r o n a 巧a n e 巧移植相关性冠状动脉病s e a s e ，。丑H 、- L ，L 卫y 、7 J 圳、，r I U E Au l e xe u r o p a e u sa g g l u t i n i n V C A M 1 v a s c u l a rc e l la d h e s i o nm o l e c u l e 1 V E - c a d h e r i nv a s c u l a re n d o t h e l i a lc a d h
8、e r i n V E G F v a s c u l a re n d o t h e l i a lg r o w t hf a c t o r 荆豆凝集素 血管细胞黏附分子 血管内皮钙黏附素 血管内皮生长因子 V E G F R - 2 r v a S e c e 竺烹r2 一e 1 1 d o m e l 湖g r 0 、他t o r 血管内皮生长因子受体2 p t 0 9 “”“J 凡r r o V S M C V P F v a s c u l a rs m o o t h m u s c l ec e l l s v a s c u l a rp e r m e a b i l
9、i t yf a c t o r 2 血管平滑肌细胞 血管通透因子 博士论文 中文摘要 内皮祖细胞( E P C s ) 对移植性动脉硬化的 作用及其机制研究 中文摘要 在过去的4 0 年中，虽然器官移植术后急性排斥反应( a c u t er e j e c t i o n ，A R ) 得到了有效的控制，但移植性动脉硬化( t r a n s p l a n ta r t e r i o s c l e r o s i s ，T A ) 却严重制 约着移植受者的长期生存。移植性动脉硬化的病理改变特点为移植物内各级动脉 内膜发生弥漫性、向心性增厚，引起管腔狭窄。早期病变主要表现为血管壁炎症
10、细胞的浸润，晚期则主要以内膜增厚，管腔狭窄为主。目前认为，移植性动脉硬 化是免疫因素和多种非免疫因素共同造成的血管内膜反复损伤、修复的结果。但 是，迄今为止，其确切的发病机制仍不清楚，因此，缺乏有效的预防和治疗措施。 内皮祖细胞( e n d o t h e l i a lp r o g e n i t o rc e l l s ，E P C s ) 作为一类具有多种分化潜能、 自我增殖等干细胞性质的特殊细胞，在参与组织损伤、修复及血管形成中发挥重 要作用，并与多种心血管疾病的发病密切相关。最近研究表明：E P C s 参与移植 性动脉硬化发病过程。虽然，移植性动脉硬化的确切发病机制尚未阐明，
11、但是， 近几年在E P C s 研究领域所取得的诸多成果为探究移植性动脉硬化的发病机制提 供了新的思路和依据。大量研究显示，移植性动脉硬化患者外周血E P C s 数量明 显减少，而且受体源性E P C s 可以归巢至移植物血管内膜损伤部位，分化为内皮 细胞和或血管平滑肌细胞并参与移植性动脉硬化内膜增生。但是，受体源性E P C s 在移植性动脉硬化发病中的具体作用，尚有争议；E P C s 归巢至移植物血管内膜 增殖、分化为内皮细胞具体机制，仍有待于做进一步研究。因此，探讨E P C s 在 移植性动脉硬化的具体作用及相关机制，不仅可望为揭示移植性动脉硬化的发病 机理提供重要线索，进而为治疗
12、提供了新的方法。 本研究首先通过同种异品系小鼠腹主动脉移植建立移植性动脉硬化模型，并 用流式细胞仪检测其外周血E P C s 数量变化，探讨E P C s 数量动态变化与移植性 动脉硬化病变之间的关系。继之，将体外培养扩增的骨髓源性E P C s 输入移植性 动脉硬化模型体内，观察增加E P C s 数量对移植性动脉硬化的影响，探讨受体源 性E P C s 在移植性动脉硬化中的作用。由于V E G F R - 2 可在E P C s 表面表达并发挥 重要作用，因此，在第三部分通过酪氨酸激酶抑制剂V a n d e t a n i b 特异性阻断 V E G F R 2 ，观察在体外条件下对骨髓
13、单个核细胞向E P C s 分化及对后者的生物学 功能影响。最后，在小鼠腹主动脉移植术后用V a n d e t a n i b 进行干预，观察 V a n d e t a n i b 影响E P C s 数量及生物学功能情况，从而判断其对移植动脉硬化可能 具有的抑制作用。 博士论文 中文摘要 第一部分小鼠移植性动脉硬化模型的建立及外周血 E P C s 数量动态变化 目的：建立小鼠移植性动脉硬化模型，观察移植性动脉硬化病变过程中外周血 E P C s 数量的动态变化及意义。 方法：以C 5 7 B L 6 小鼠为供体，B A L B c 小鼠为受体，建立同种异品系腹主动脉 移植模型。光镜和电
14、镜观察移植动脉的病理改变，并采用计算机图像分析系统分 析术后2 周、4 周及6 周移植血管内膜增生情况。流式细胞仪检测术前及术后1 、 3 、7 、1 4 及2 8 天外周血E P C s 数量变化。 结果：术后3 天，移植动脉内膜损伤并伴有明显的炎症细胞浸润。术后2 周， 观察到移植动脉内膜增厚，术后4 周、6 周内膜增生逐渐加重，移植动脉管腔明 显狭窄。外周血E P C s 数量术后早期增多，3 天达到高峰，此后迅速减少，术后 2 周、4 周显著低于术前水平。 结论：同种异品系小鼠( C 5 7 B L 6 一B A L B C ) 腹主动脉移植成功复制出移植性 动脉硬化的病变特点，可用于
15、移植性动脉硬化发病机理和防治措施的研究。外周 血E P C s 数量的动态变化与移植性动脉硬化病变密切相关，可成为预测移植物动 脉硬化发病的新指标。 第二部分输入受体骨髓源性E P C s 对移植性动脉 硬化的促进作用 目的：探讨输入体外培养扩增的受体骨髓源性E P C s 对移植性动脉硬化的影响。 方法：密度梯度离心法分离小鼠骨髓源性单个核细胞，并以贴壁培养法诱导培 养E P C s 。采用C 5 7 B L 6 小鼠为供体，B A L B c 小鼠为受体，通过同种异品系腹主 动脉移植建立小鼠移植性动脉硬化模型。E P C s 移植组移植术后通过尾静脉输入 E P C s ，对照组则注入相应体积的生理盐水。同时将C M - D i I 标记的E P C s 移植给 受体小鼠，进行E P C s 移植后体内示踪。术后2 、4 周处死受体小鼠，观察各组 移植动脉的病理改变，用扫描电镜和E v a n sb l u e 染色方法评价术后1 4 天内皮损 伤修复情况；并用计算机图像分析系统测量术后4 周移植动脉内膜增生情况。 结果
