《乳杆菌表面粘附蛋白的提取、鉴定及粘附特异性的初步研究》由会员分享，可在线阅读，更多相关《乳杆菌表面粘附蛋白的提取、鉴定及粘附特异性的初步研究（4页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、!“ 卷# 期 $%“ 年 “ 月 ! 日 微生物学报 !“#$ %。F-GG!#1“ 中分子量分 别为 !#D%IJ4 和 “#D#IJ4 的两个表面蛋白参与对牙鲆粘液的粘附， 而分子量为 !#D%IJ4 的蛋白参与对鲤鱼粘液的粘 附。同时， 蛋白质印迹法显示， E21 和 F-GG!#1“ 在牙鲆和鲤鱼肠粘液中均具有相同的粘附受体， 在牙鲆肠粘液中是分 子量为 $C=） ， 该菌在体外对牙鲆消化道粘液 有很强的粘附作用， 并对多种致病菌有竞争抑制作 用。在鱼类的苗种培育和养成中应用乳杆菌 E21， 起到了提高成活率， 防病、 促生长的作用。本文以乳 杆菌 E21 为材料， 提取和鉴定参与细
2、菌粘附的表面 蛋白成份， 对阐述乳酸菌在体内粘附和定植的机理 和益生菌的应用具有重要的指导意义。 !材料和方法 !“!材料 !“!“!菌株： 乳杆菌 （!“#$%C=）E21， 分离自 健 康 牙 鲆 肠 道；嗜 酸 乳 杆 菌（ !“#$%? 浓缩 后冻存备用。 !“#$!% 和 J7E K2L2$， 室温下振摇 *-12$； 789 洗涤 * 次， 每次 +12$， 加入 D8 显色， 显色完毕后三蒸水冲洗， 干燥保存。 +结果 +“!$!% 和 -*(/“+“-*/,5 “0 *5+1 .) !“#“$% 全蛋白与鲤鱼肠粘液作用后， 均只有一种蛋白质成 分特异显示， 分子量为 %;%HK
3、*， 此种蛋白质成分虽 然在鲤鱼肠粘液中的含量也较高， 也属于主要蛋白 质成分， 粘液中其它的主要蛋白质在 L,1/,(0 C=./ 后 均没有特异性的显示 （图 9） 。 图 ( 鲤鱼肠粘液中参与粘附的蛋白质 !“#$9B(./,“01 “0 “0/,1/“0*= +1 .) /+00+1 中参与 牙鲆和鲤鱼肠粘液粘附的表面蛋白质进行了研究。 本文运用了蛋白印迹的方法来鉴定菌体中参与 粘附的蛋白质种类。该方法基于酯化生物素和亲和 素的生物学性质。酯化生物素 （也称 FE羟基琥珀酰 亚胺生物素酯， ?EFG3QHK* 和 49;HK* 的两种蛋白分别可在牙鲆 肠粘液和鲤鱼肠粘液粘附中起作用，
4、分别将其命名 为 J6BB-.3 和 J6BB+。67889:4; 是从人类咽喉中 分离纯化的乳杆菌， ?/ 等在 3RR: 年就发现了该菌 表面存在着能够在体外实验中介导粘附的表层蛋白 （:HK*， 这在国内外属首次 报导， 将此 ;:HK* 的蛋白质命名为 J6BB-.%。 RR:陈营等： 乳杆菌表面粘附蛋白的提取、 鉴定及粘附特异性的初步研究$S微生物学报 （%MM;） 9; （:） 由于在鉴定粘液中参与粘附的蛋白质中， !“# 表面蛋白的需要量较大， 而且 !“# 表面蛋白在提取 后容易形成不溶性的沉淀， 所以实验过程中采用 !“# 菌体全蛋白来进行粘液中特异蛋白质的鉴定。 实验结果显
5、示， 在牙鲆和鲤鱼肠粘液中， 参与菌体粘 附的蛋白质的种类并不会随着乳杆菌种类的变化而 改变， 这个结果与 $%70)%)/( $/-? 8/= 4- ,2:/D2:7/E44-? D- -I2:-; DA #=/7, 7- （, #5+1JK2 H- &;- / =-;4-? !/=/ :2E -7A DA 4- =-4/; /8 )-?-7 E/- 2? L*FFE/“ 2; L*FF:B 0 ,2:/D2:7/E41-+-JK2 H- &;- / =-;4-?- / =-;4-? 4- 2;4-?- DA 4- ?2=- =-4/; 2; 42 ,“# 2; *G!5-#1 42; 4- ?2=- -:-E/?BG4- H- )*+,JK2 2; -.+-JK2 E/- /7A 4- )1+)JK2 E/- -=/?2-; 42 4- 2;4-?-E-;- / 4- ?24-?：) *.(-? )#*:-E-;：). O:/D-：) M-D.2A )1 549L? _%)&0()$4)&# )1)&# （)1） 51 （-）
