微生物染色法

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1、三 、细菌染色法:,负染色,涂片,干燥,固定,染色1min,水洗、吸干,镜检,简单染色,制备涂片标本染色,步骤: 涂片固定 酸性复红初染 3%醋酸酒精脱色 美蓝复染 镜检,抗酸染色法,结果: 抗酸菌红色; 非抗酸菌蓝色。,步骤:,结果: 阳性菌紫色 阴性菌红色,由丹麦医生Hans Christian Gram于1884年创立。,革兰氏染色法(Gram Stain),Figure 1 - A Gram stain of Gram + Staphylococcus cells.,Figure 2 - Gram stain of Gram - E. coli cells,Figure,染料,碱性染料

2、(basic dye)带正电染料。其阳离子部分为发色基团,可与细胞中带负电的组分结合。如Crystal violet, Safranin, Methylene blue等。 酸性染料(Acid dye)带负电染料。其阴离子部分为发色基团,可与细胞中带正电的组分结合。如Eosin, Congo red , Acid fuchsin 等。 脂溶性染料如Sudan black。,多数染料都是中性有机盐。据着色基的不同可分为以下类型:,四、细菌的繁殖,一般为无性繁殖,二分裂法。 同形裂殖:裂殖后形成的子细胞大小相等。 异形裂殖:分裂产生两个大小不等的子细胞。 细菌分裂过程: 菌体伸长,核质体分裂 形成

3、横隔壁 子细胞分离,无性繁殖 有性繁殖,少数有菌毛的菌可进行有性繁殖,方式,五、细菌的群体形态,固体培养时的群体形态: 菌落(colony) 单菌落(clone) 菌苔(lawn),culture plate,液体培养时的群体形态:,(一)种类:,不同的微生物种类,其菌落特征不同。同一种菌在不同培养条件下菌落特征也不尽相同。菌落的特征包括:,(二)菌落形态,1、大小 2、颜色 3、透明度 4、表面状态 5、质地 6、边缘形态 7、隆起形状(正面观),Samples were taken from the numbered colonies and examined microscopically,(三)影响菌落形态的因素,各种微生物在一定条件下形成的菌落,其形态特征有一定的稳定性和专一性,因而可以作为识别、鉴定菌种的一个依据,但也受某些因素的影响,观察时应加以注意。,1、邻近菌落 2、培养时间 3、培养基成分 4、培养温度,细菌菌落的特征,一般都较小,菌落与培养基结合不紧密,用接种针容易挑起,多数表面较光滑、湿润、较粘稠,易挑取,质地均匀,色泽多样。,

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