《依那普利和安体舒通对肥厚心室肌电重构的影响及其机理研究》由会员分享，可在线阅读，更多相关《依那普利和安体舒通对肥厚心室肌电重构的影响及其机理研究（77页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、四川大学 博士学位论文 依那普利和安体舒通对肥厚心室肌电重构的影响及其机理研究 姓名：于厚志 申请学位级别：博士 专业：内科学 指导教师：黄德嘉 20030428 A E R A E R P A F A P D B C L C I C R C l m D A D s E A D 3 E R P L V A L v H L V O T M A p M A p D M A P K N C X P K c P L B P p m P V C R A 露昭 R V O T S C D S E R C A 2 V A V E R P V F V T 缩略词表 A 扛i a le l e c t r i
2、c a lr e m o d e l i n g A t r i a le f f e c t i v er e f r a c t o r y p e r i o d A t r i a tf i b r i | l a t o n A c t i o n p o t e n t i a ld u r a t i o n B a s i c c y c l el e n g t h C a 2 + i n d u c e dC a 2 + r e l e a s e C o n g e s t i v e h e a r tf a i l u r e D e l a y e da f t e
3、 r d e p o l a r i z a t i o n s E a r l ya f t e r d e p o l a r i z a t i o n s E f f e c t i v e r e f i a c t o r yp e r i o d L e f t v e n t r i c u l a ra p e x L e f tv e n t n c u l a rh y p e r t r o p h y L e f tv e n t r i c u l a ro u t f l o wt r a c t - M o n o p h a s i ca c t i o np
4、 o t e n t i a l M o n o p h a s i ea c t i o np o t e n t i a ld u r a t i o n M i t o g e n a c t i v a t e dp r o t e i n k i I l l i s e s o d i u m c a l c i n m e x c h a n g e r P r o t e i nk i s eC P h o s p h o l a m b a n p u l s e sp e r m i n u t e P r e m a t u r ev e n t r i c u l a r
5、c o n t r a c t i o n R i g h ta t r i u m R i g h t v e n t r i c u l a r a p e x R i g h t v e n t r i c u l a ro u m o wt r a c t S u d d e nc a r d i a cd q o a t l a s S a r e o p l a s m i c r e t i c u l u mC a 2 + - A T P a s e V e n t r i c u a ra r r h y t h m i a s V e n t r i c u l a re
6、f f e c t i v er e f r a c t o r yp e r i o d V e n 硒c u l a rf l b r i l l a t i o 1 V e h i c u l a r t a c h y c a r d i a 心房电重构 心房有效不应期 心A F 动 动作电位时限 基础周长 钙诱导性钙释放 充血性心力衰竭 延迟后除极 早期后除极 有效不应期 左室心尖部 左心室肥厚 左室流出道 单相动作电位 单相动作惠位时限 有丝分裂原激活蛋白激酶 钠钙交换体 蛋白激酶c 受磷酸蛋白 每分钟脉冲发放数 宣性早搏 右心房 右室心尖部 右室流出道 心脏性猝死 肌浆网C a
7、2 + A T P 酶 室性心律失常 心室有效不应期 心室颤动 童性心动过速 四川大学博士学位论文 依那普利和安体舒通对心室肌电重构 的影响及其机理研究 摘要 研究背景和目的：左心室肥厚( L V H ) 是心脏性猝死的独立危 险因素，猝死可能和恶性室性心律失常( V A ) 的发生有关。左心室 肥厚可伴有肾素一血管紧张素醛固酮系统激活，以往的研究表明血管 紧张素和醛固酮可诱发室性心律失常，但是其苏2 D 律失常的机制还 不清楚。我们在对肥厚心肌兔模型的研究中发现，在短时的快速刺 激后肥厚心室肌电生理特性发生明显的重构，并且这种电重构可能 在室性心律失常中发挥作用。我们的前期研究发现电重构与细
8、胞内 钙离子调节障碍有关。因此，本研究将通过建立L V H 实验动物模型， 研究血管紧张素I I 转换酶抑制剂和醛固酮受体拮抗剂对肥厚心肌电 重构的影响，同时研究作为细胞重要的钙离子调节蛋白一钠钙交换 体( S O d i U l T I c a l c i u me x c h a n g e r ，N C X ) 在心室电重构的作用。方法： 实验动物分为4 组，分别为对照组、环缩组、环缩+ 依那普利组、环 缩+ 安体舒通组。日本大耳白兔部分环缩隔下腹主动脉，对照组除不 环缩腹主动脉外，其它手术过程同环缩组。对照组和环缩组在术后 第二天给予安慰剂，环缩+ 依那普利组和环缩+ 安体舒通组分别在
9、行 腹主动脉环缩术后第二日给予依那普利5 m g k g 和安体舒通 1 0 m g k g 。所有动物饲养在相同的环境。术后8 周后进行电生理实验。 各组以阿托品及美多心安阻滞自主神经后，在心外膜左室流出道 ( L V O T ) 、左室心尖部( L V A ) 、右室流出道( R V O T ) 3 个部位以 四川大学博士学位论文 2 7 3 、2 5 0 、2 3 l m s 为基础周长( B C L ) 测定各部位的复极到9 0 的 单相动作电位时限( M A P D 9 0 ) 及V E R P 。然后在保持1 ：1 房室传导 下，行右心房快速电刺激，快速刺激组的刺激频率为2 6 0
10、 次分，持 续3 0 分钟，刺激结束后，重复上述测定过程。最后以S l s 2 s 3 刺激方 法诱发室颤( V F ) ，记录诱发率和室颤持续时间。记录各组在测定 M A P D 9 0 及V E R P 过程中心室后除极的发生次数。左心室心肌组织钠钙 交换体的蛋白量用免疫印迹方法定量。结果：环缩组在快速刺激后，3 个部位的V E R P 与快速刺激前相比显著延长( 三种基础周长下V E R P 的平均延长值分别为：R V O T1 3 、1 8 、1 9 ；L V O T2 0 、1 7 、1 8 ；L V A 1 7 、2 0 、2 0 ) ，其延长程度显著大于同样对照组( 三种基础周长
11、下 V E R P 的平均延长值分别为：R v O T8 、7 、6 ：L v O T8 、7 、8 ；L V A 8 、9 、8 ) 。环缩+ 安体舒通组也明显延长( 三种基础周长下V E R P 的 平均延长值分别为：R v 0 T1 4 、1 7 、1 7 ；L V O T2 0 、18 、1 6 ；L V A1 4 、 1 6 、1 7 ) 。依那普利明显减弱了肥厚心室肌V E R P 延长量，与对照组 相比差异没有显著性( 三种基础周长下V E R P 的平均延长值分别为： R V O T1 0 、1 4 、9 ；L V O T1 0 、1 0 、9 ：L V A1 0 、1 2 、
12、1 1 ) 。各组在刺 激前后的M A P D 9 0 无显著性变化。4 组中，环缩组和环缩+ 安体舒通 组的室颤诱发率及后除极发生率均比其它两组显著增高。我们进一 步研究发现心室肌V E R P 延长的程度与心肌钠钙交换体的表达水平 明显相关( r = O 7 8 ) 。环缩组和对照组相比较，N C X 蛋白表达水平明 显上调，分别为1 6 1 0 4 7 v s1 0 6 O 2 5 ( P 4m m o l L ) 刺激N C X l 的活性，但是未能提供 P K C 参与的证据( 3 7 ，3 8 ) 。这些失败的原因可能由于切膜片的时候 导致的可扩散因素的丧失。 在很长的时间里，一直
13、认为N C X l 的活性上调是由于转录水平的 基因表达上调，在压力负荷的心脏、梗塞的心脏( 梗塞局心肌) 和 慢性心衰的心脏( 3 9 ，4 0 ，4 1 ) 。在新生鼠心肌细胞，T G F 和白介 素1 分别可刺激和抑制N C X l 基因的表达，P K C 抑制剂明显降低T G F 一 的刺激效应( 4 2 ) 但是，N C X I 被上述信号上调或下调的机制不明a 2 A T P 依赖性调节 四川大学博士学位论文 心肌N C X l 的活性也被A T P 依赖性机制和生理性重要阳离子调 节。当成鼠心肌细胞的A T P 被代谢抑制剂耗掉9 0 时，用细胞内N a + 依赖性C a ”的再
14、摄取为测定的N C X l 的活性的指标，发现N C X I 的活 性被抑制了8 0 ( 4 3 ) A T P 耗竭影响细胞代谢的许多方面，影响了 蛋白和活性代谢物的磷酸化如三磷酸肌醇，使细胞骨架结构发生变 化，诱导了各种应激反应。( 4 4 ) 在表达N C X l 的C H O 细胞系， c y t o c h a l a s i nD 可部分模拟A T P 耗竭产生的效应，它是一种增强 a c t i nm i c r o f i l a m e n t s 解聚作用的药物( 4 5 ) 。而且，过去的研究 发现N C X I 蛋白和细胞骨架蛋白a n k y r i n 结合( 4
15、6 ) 因此A T P 耗竭 的抑制效应可能是通过破坏膜下细胞骨架改变N C X 和膜的嵌合而影 响的。但是在成鼠心肌细胞，c y t o c h a l a s i nD 没有明显的改变N C X l 的活性( 4 7 ) 。 H e ( 4 8 ) 等在表达N C X I 豚鼠心室肌细胞进行膜片钳研究，发 现A T P 明显激活N C X 离子流。这个效应可被胞浆侧的外源性的P I P z 模拟，并且抗P I P ：的抗体减弱。A T P 依赖性的N C X I 激活可能是由于 以膜片的前体物生成了P I P 。这种情形类似于A T P 依赖性钾通道 ( K 。) ，在瓜舟1m m o l
16、 L 时A T P 在完整的细胞通常抑制通道的活性 ( 4 8 ) 。在表达K 。通道的膜片，历1 0m o l L ，当P I P ：加到膜 片的胞浆侧，属升高到正常水平。因此，在切下的膜片，P I P 。的水 平是很低的，保持一定水平的内源性的P I P 2 是维持K 。的生理A T P 敏感性所需要的( 4 9 ) 。内源性P I P ：可能在心肌细胞发挥相似的基 本作用，以维持N C X 的活性在较高水平。 3 离子的调节作用 四川大学博士学位论文 细胞内的c a ”和N a + 对N C X 的活性有重要的调节作用( 5 0 ，5 I ， 5 2 ，5 3 ) 。只有当细胞内的调节性C a 2 + 和N C X l 的中心亲水袢的高亲 合位点结合，N C X l 才被激活转运C a “( 5 0 ) 。对这个细胞内c a ”依 赖性激活，通过测定膜片的外向交换电流的密度发现丘：在0 1 - 0 。4 m o l L ，在M i u r a 等( 5 4 ) 对豚鼠心肌全细胞外向交换电
