《代用花粉对蜂群群势和生产性能的影响及蜜蜂抗氧化酶基因表达的研究》由会员分享,可在线阅读,更多相关《代用花粉对蜂群群势和生产性能的影响及蜜蜂抗氧化酶基因表达的研究(60页珍藏版)》请在金锄头文库上搜索。
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2、k 基 英文缩略词表 H P L C 1 0 H D A C P S O D H i 曲P e r f o r m a n c eL i q u i d C h r o m a t o g r a p h y 10 - h y d r o x y - ,2 d e c e n o i ea c i d C r u d ef i b e r S u p e r o x i d ed i s m u t a s e 高效液相色谱 1O 一羟基2 癸烯酸 粗蛋白 超氧化物歧化酶 C u Z n S O D C u Z n s u p e r o x i d ed i s m u t a s e铜锌超
3、氧化物歧化酶 M n S O D M n s u p e r o x i d ed i s m u t a s e锰超氧化物歧化酶 F e S O D C A T 1 - 1 2 0 2 R O S N A D H G P X P O D E B D E P C C a t a l a s e H y d r o g e np e r o x i d e R e a c t i v eo x y g e ns p e c i e s 铁超氧化物歧化酶 过氧化氢酶 过氧化氢 活性氧 N i c o t i n a m i d ea d e n i n ed i n u c l e o t i d
4、 e 还原型辅酶I G l u t a t h i o n eP e r o x i d a s e 谷光甘肽过氧化物酶 P e r o x i d a s e 过氧化物酶 E t h i d i u mb r o m i d e 溴化乙锭 D i e t h y p y r o c a r b o n a t e焦碳酸二乙酯 O H H y d r o x y l r a d i c a l 羟自由基 一 - _ f 虫 弘 AI 妒 一 毛 杈 目录 中文摘要。1 英文摘要3 1 引言6 1 1 花粉的营养及其对蜜蜂的影响6 1 1 1 蛋白质和氨基酸7 1 1 2 碳水化合物8 1 1
5、3 脂类8 1 1 4 维生素9 1 1 5 矿物元素:l O 1 1 6 黄酮类1 0 1 1 7 其它营养成分1 l 1 2 大豆的营养成分及其在饲料中的应用1 1 1 2 1 大豆的营养1 I 1 2 2 大豆在饲料中的应用1 2 1 3 昆虫饲料的研究现状1 3 1 4 蜜蜂人工饲料的研究现状1 3 1 5 自由基和抗氧化系统的研究j 1 5 1 5 1 自由基理论15 1 5 2 抗氧化系统1 6 1 6 立题依据及研究内容1 9 2 材料与方法2 0 2 1 代用花粉对意大利蜜蜂群势及生产性能的影响2 0 2 1 1 实验动物及材料2 0 2 1 2 试验仪器和试剂j 2 0 2
6、1 3 试验设计2 0 2 1 4 饲喂方法2 1 2 1 5 测定指标2 1 2 1 6 数据处理2 3 2 2 意大利蜜蜂不同发育时期抗氧化基因表达量的研究2 3 2 2 1 试验动物及设计2 3 2 2 2 仪器与设备2 3 2 2 3 测定指标及测定方法2 4 2 3 4 数据处理2 8 3 结果与分析_ 2 8 3 1 代用花粉对意大利蜜蜂群势及生产性能的影响2 8 3 1 1 花粉及其代用品对蜂群子量的影响2 8 3 1 2 花粉及其代用品对蜂群群势的影响2 8 3 1 3 花粉及其代用品对蜜蜂产蜜量的影响2 9 3 1 4 花粉及其代用品对蜂群产浆量和王台接受率的影响2 9 3
7、1 5 花粉及其代用品对蜂王浆成分的影响3 0 3 2 意大利蜜蜂不同发育时期抗氧化基因表达的研究3 3 3 2 1 抗氧酶基因实时荧光定量P C R 扩增结果3 3 3 2 2 各基因标准曲线的制作3 4 3 2 3C l l 2 嫩S O D 、S O D 和C A r 基因丰度变化:3 7 4 讨论3 8 4 1 代用花粉对意大利蜜蜂群势及生产性能的影响3 8 4 1 1 人工代用花粉对蜜蜂蜂群群势和子量的影响3 8 4 1 2 人工代用花粉对蜜蜂产蜜、产浆量及王台接受率的影响3 9 4 1 3 人工代用花粉对蜂王浆质量的影响4 1 4 2 意大利蜜蜂不同发育时期抗氧化基因表达的研究4
8、l 5 结论4 3 5 1 总体结论一4 3 5 2 研究展望4 3 参考文献。4 5 致谢5 2 攻读学位期间发表论文情况5 3 一 ,I 摘要 蜂花粉为蜜蜂提供生长发育所需要的蛋白质、脂肪、维生素、矿物质 等营养素。蜂巢内花粉贮存不足,会影响蜜蜂幼虫的发育,成年蜂的生长 以及蜂王产卵。生产实际中蜂场花粉不足,需人工饲喂代用花粉满足蜂群 的生长繁殖。目前人工所配制的代用花粉并不科学,导致饲喂效果不佳, 因此,研究科学的代用花粉营养配比就显得极为迫切。另外,蜜蜂的寿命、 抗病力对蜜蜂的生产性能有重要影响,而蜜蜂的抗氧化能力与蜜蜂的寿 命、抗病力有直接的联系,研究蜜蜂不同时期抗氧化酶的基因表达是
9、探索 蜜蜂生命周期内抗氧化机制的基础工作。本试验通过研究不同营养配比的 代用花粉对蜂群生产性能的影响,筛选出科学的人工代用花粉营养配比; 并通过分子生物学手段探讨意大利蜜蜂不同发育时期的抗氧化酶基因表 达。 : 试验一根据蜜蜂的营养需要,参考蜂花粉中各类营养成分的含量,以 豆粕做代饲料的基础上,加入一定的添加剂配成新的代用花粉,通过观测 不同营养配比的代用花粉对蜂群群势和生产性能的影响,为研制科学的花 粉代用品营养配比提供理论依据。试验选取蜂种和群势基本一致的意大利 蜜蜂2 5 群,随机分为5 个处理,分别饲喂蜂花粉、6 0 花粉+ 4 0 豆粕 + 添加剂I 、3 0 花粉+ 7 0 豆粕+
10、 添加剂I I 、豆粕+ 添加剂I 、豆粕。 各试验蜂群每隔1 2 d 测一次封盖子数;刺槐花期时测定各蜂群群势、产蜜 量、产浆量;每次取浆时统计移虫台数和接受台数,计算王台接受率;测 定每群蜂所产蜂王浆的1 0 H D A 、水分、蛋白质的含量及酸度。试验结果 表N 0 ) 含有添加剂的各代用花粉组与蜂花粉组的蜂群子量差异不显著 ( P 0 0 5 ) ,标不同字母表示差异显 看( P 0 0 5 ) 。 王浆酸测定结果 ( 1 ) 标准曲线图 3 0 , 0 0 o :婚 j 群j o o 霎 。嬲 o o o 昭 口舯 F 培4S t a n d a r dc u r v eo f1 0
11、 一H D A 图5A 组蜂王浆样品1 0 - H D A 色谱图 F i g 51 0 - H A DH P L Cg r a p hi nr o y a lj e l l yo f Ag r o u p 3 l 垡星垄塑墅坚登竺兰丝墼箜墅堕垄窒坚垫氢垡堕薹垦耋垄箜婴窒。 薹 萋 图6B 组蜂王浆样品1 0 - H D A 色谱图 F i g 61 0 - H A DH P L Cg r a p hi nr o y a lj e l l yo f Bg r o u p , m 7C 组蜂王浆样品1 0 - H D A 色谱图 F i g 71 0 一H A Dm L Cg r a p hi
12、nr o y a l j e l l yo f Cg r o u p 3 2 , , 鲞 图8D 组蜂王浆样品1 0 - H D A 色谱图 F i g 81 0 - H A DH P L Cg r a p hi nr o y a lj e l l yo f Dg r o u p 3 2 意大利蜜蜂不同发育时期抗氧化基因表达的研究 3 2 1 抗氧酶基因实时荧光定量P C R 扩增结果 以蜜蜂A 、B 、C 、D 、E 五个时期的总R N A 为模板,根据表7 设计 的引物分别进行实时定量P C R 扩增。P C R 产物经过0 8 聚丙烯酰胺凝胶 电泳,分别获得9 4 b p 、1 3 1 b p 、1 2 5 b p 、1 4 2 b p 的目的片段( 如下图) 。 ”l b p 一 图9 :M n S O D 基因扩片段 F i g 9 :F r a g m e n t sa m p l i f i e do f M n S O D 1 2 5 如一 3 3 2 0 G O b p 1 0 G O b p 7 S 0 1 3 0 5