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1、1(2016浙江考试院抽测改编) 下面是烟草叶片原生质体分离和培养的流程图： 叶 片消 毒 酶 解 获 得原 生质 体 原 生质 体检 测 原 生质 体培 养 获 得愈 伤组 织请回答：(1)酶解时，在_酶和_酶的作用下去除细胞壁，以获得完整的原生质体。(2)获得原生质体后，可用_方法检测原生质体是否存活。然后将原生质体制成悬浮液，滴加在_上，用显微镜观察并计数。要判定原生质体是否已形成细胞壁，可用_方法鉴别。(3)欲通过原生质体培养得到愈伤组织，从培养基的成分考虑，配制培养基时需要注意的主要方面有哪些？_。解析：(1)在获得植物原生质体时，需用纤维素酶和果胶酶混合液处理实验材料，将细胞壁消化
2、除去，获得球形的原生 质体。 (2)获得原生质体后可用红墨水染色法检测，因为生活状态的原生质体细胞膜具有选择透过性，原生 质体不会被染上 颜色，但如果原生 质体死亡，由于膜的选择透过性丧失，原生 质体会被染成红色；对原生质 体进行显微计数，必 须将原生质体制成的悬浮液滴加在血细胞计数板上；可用质壁分离实验来检测原生质体是否已形成细胞壁。( 3)要将原生 质体培养成愈 伤组织，配制培养基时需要注意营养物质的适当配比和植物生长调节剂的适当配比。答案：(1)纤维素果胶(2)红墨水染色血细胞计数板质壁分离(3)营养物质的适当配比和植物生长调节剂的适当配比2植物组织培养是克隆植物的一种方法，过程如图所示
3、，回答相应的问题：(1)为了获得脱毒植株，外植体往往取自植物的花芽、叶芽等处的分生组织，其原因是_。(2)培养皿中的培养基除添加营养物质外，还需要添加植物激素，其目的是诱导外植体_。(3)在生产实践中为获得大量的细胞产物，如紫杉醇，可将_放入液体培养基中，经机械作用分散成单个细胞，制备成细胞悬浮液，再经过_即可获得大量细胞。(4)组织培养过程需要提供植物生长和繁殖的最适条件，否则在光学显微镜下可能观察到发生_异常，进而使植物出现遗传不稳定甚至不育。(5)植物组织培养技术不仅应用于花卉和果树的快速大量繁殖以及脱毒植株的获取，还广泛用于_、_、_等育种过程中。解析：(1)刚长出的芽尖还没有受到病毒
4、的侵染，因此用这些部位的细胞做植物组织培养的材料，可以获得脱毒植株。(2)在植物组织培养时，常用生长素和细胞分裂素来诱导外植体形成愈伤组织、生根、发芽，从而形成新的植物体。(3)一般利用外植体脱分化形成的愈伤组织获得细胞产物，愈伤组织 有很强的分裂能力，通 过培养愈 伤组织细胞可获得大量细胞产物。(4)愈伤组织细 胞分裂时易受环境条件影响而发生染色体结构或数目的变异，故需要在适宜的条件下进行组织培养。(5)植物体细胞杂交、植物基因工程、单倍体育种等育种过程均需要用到植物组织培养技术。答案：(1)这些部位还未受到病毒等病原体的侵害(2)脱分化和再分化(3)愈伤组织细胞分裂(4)染色体结构与数目(
5、5)植物体细胞杂交育种基因工程育种单倍体育种3(2016宜昌调研)阅读以下资料，并回答相关问题：资料甲：20 世纪六十年代，一些科学家 尝试将番茄和马铃 薯杂交， 试图培育出一种地上长番茄，地下结马铃薯的“ 番茄马铃薯”植株，始 终未能成功。资料乙：经过长期的实验，科学家 们采用体细胞杂交的方法，终于得到了“番茄马铃薯”植株，可惜它并没有如科学家所想象的那样，地上 长番茄，地下结马铃薯。资料丙：英国一家公司耗时十年，在 2013 年完成了马铃薯和西 红柿的完美嫁接，开 发出一种新的植物，可同时结出西 红柿和马铃薯。收 获时只需将植物 连根拔起，就可在枝头收获西红柿，在根部摘取马铃薯。(1)资料
6、甲中，科学家们始终未成功的原因是番茄和马铃薯之间存在着_。(2)资料乙中，在进行体细胞杂交之前，必须先利用_ 和_去除细胞壁，获得具有活力的_，再诱导其融合。(3)对资料丙中的植株进行植物组织培养，能否获得大量“ 番茄马铃薯”植株？_；对三倍体西瓜进行植物组织培养，能否获得大量三倍体西瓜苗？_。(4)动物细胞也能进行融合，常用的诱导融合因素有 PEG、电激和 _(生物法)。动物细胞融合最重要的应用是利用融合得到的_制备单克隆抗体。长期以来人们获得抗体的方法是向动物体内反复注射某种抗原，从动物_中分离出抗体。这种方法不仅产量低、纯度低，而且制备的抗体_。单克隆抗体可用来制成“生物导弹”杀灭癌细胞
7、， “生物导弹”中单克隆抗体的作用是_。解析：(1)番茄和马铃薯为两个物种，存在生殖隔离，因此无法杂交获得“番茄马铃薯”植株。(2)进行植物体细胞杂交，需用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，获得有活力的原生质体，才能诱导融合。(3) 嫁接获得植株属于无性繁殖，若选择植物组织为地上部分，则获得的为番茄植株，若为地下部分，获得的则为马铃薯植株；三倍体西瓜 进行组织培养，各个细胞的染色体组相同，能获得大量的三倍体西瓜幼苗。(4)诱导动物细胞融合的方法有：物理法(电激)、化学法( 聚乙二醇)和生物法( 灭活的病毒) 。单克隆抗体由杂交瘤细胞合成和分泌；抗体主要分布在动物血清中。利用传统方法不 仅产量低、 纯
8、度低，而且制备的抗体特异性差。单克隆抗体可用来制成“生物导弹”杀灭癌细胞， “生物导弹”中单克隆抗体的作用是将 药物定向带到癌细胞所在位置。答案：(1)生殖隔离(2)纤维素酶果胶酶原生质体(3)不能能(4)灭活的病毒杂交瘤细胞血清特异性差将药物定向带到癌细胞所在位置4(2016湖北襄阳市高三调研) 下图是利用人成纤维细胞(具有分裂能力，能在 HAT 培养基上存活)和小鼠骨髓瘤细胞 (具有分裂能力，不能在 HAT 培养基上存活)进行人类基因定位的操作示意图。请回答：(1)该技术的基础是_技术。(2)操作所用的成纤维细胞应在传代_代以内；诱导融合所运用的生物学原理是_。该过程中，区别于植物原生质体
9、融合的方法是运用_处理。(3)HAT 培养基属于_培养基；该培养基内需要加入_等天然物质。(4)培养时，pH 一般为_ ；操作过程中，加入乌本苷的目的是_。答案：(1)动物细胞培养(2)10细胞膜具有一定的流动性灭活病毒(3)选择血浆(血清)(4)7.27.4除去成纤维细胞5(2016浙江外国语期中)下图是某实验室做的通过动物纤维母细胞等获得单抗的实验研究。据图回答相关问题：(1)X、Y、Z 细胞的名称分别是_、_、_。(2)过程类似于植物组织培养技术中的_过程。与纤维母细胞相比，诱导干细胞的全能性较_。过程的实质是_。(3)过程中需用到的生物诱导剂是_。(4)处需要筛选，其目的是_。(5)用
10、 32P 标记的核苷酸的培养基培养 Z 细胞，细胞质中能测到 32P 的细胞器有_和_。解析：(1)X、Y、Z 细胞的名称分别是骨髓瘤细胞、抗原刺激过的 B 细胞、杂交瘤细胞。(2)过程是将甲小鼠的纤维母细胞诱导成诱导干细胞，相当于植物组织培养技术中的脱分化过程，与纤维母细胞相比诱导 干细胞的全能性较高。 过程是诱导干细胞分化成各种体细胞，细胞分化的实质是基因的 选择性表达。 (3)诱导动物细胞融合，需用到的生物诱导剂是灭活的病毒。(5)核苷酸是核酸的基本组成单位，动物细胞中线粒体含有少量 DNA，核糖体是由蛋白质和 rRNA 构成的。因此用 32P 标记的核苷酸的培养基培养 Z 细胞，则在线
11、粒体和核糖体中能检测到 32P。答案：(1)骨髓瘤细胞抗原刺激过的 B 细胞杂交瘤细胞(2)脱分化高基因的选择性表达(3)灭活的病毒(4)筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞(5)核糖体线粒体5(2016浙江外国语期中)下图是某实验室做的通过动物纤维母细胞等获得单抗的实验研究。据图回答相关问题：(1)X、Y、Z 细胞的名称分别是_、_、_。(2)过程类似于植物组织培养技术中的_过程。与纤维母细胞相比，诱导干细胞的全能性较_。过程的实质是_。(3)过程中需用到的生物诱导剂是_。(4)处需要筛选，其目的是_。(5)用 32P 标记的核苷酸的培养基培养 Z 细胞，细胞质中能测到 32P 的细胞器有_和_。解析：(1)X、Y、Z 细胞的名称分别是骨髓瘤细胞、抗原刺激过的 B 细胞、杂交瘤细胞。(2)过程是将甲小鼠的纤维母细胞诱导成诱导干细胞，相当于植物组织培养技术中的脱分化过程，与纤维母细胞相比诱导 干细胞的全能性较高。 过 程是诱导干细胞分化成各种体细胞，细胞分化的实质是基因的 选择性表达。 (
