《人脐带间充质干细胞对人食管癌细胞的抑制作用研究(1)》由会员分享，可在线阅读，更多相关《人脐带间充质干细胞对人食管癌细胞的抑制作用研究(1)（158页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、博士学位论文 学校代码：1 0 0 2 3 学号：B 2 0 0 8 1 7 0 人脐带间充质干细胞对人食管癌细胞的抑制作用研究 S u p p r e s s i v eE f f e c to f H u m a nU m b i l i c a lM e s e n c h y m a l S t e mC e l l so n E s o p h a g e a lC a n c e rC e l l s 所院 ： 肿瘤医院肿瘤研究所 姓名 ：王勇 指导教师：陆士新教授 导师小组：林东昕教授、高燕宁教授 学科专业：肿瘤学 研究方向：干细胞在实体瘤治疗中的作用 完成日期： 2 0 11
2、5 北京协和医学院中国医学科学院博士学位论文 目录 目录 表索引 I 图索引 I I 中英文缩略词I V 中文摘要V 英文摘要 V I I 第一部分脐带间充质干细胞对食管癌细胞可能作用的体外研究 一、引言 l 二、材料与方法 3 三、实验结果 l1 四、讨论 2 8 五、小结 3 2 第二部分脐带间充质干细胞对食管癌细胞体外抑制作用的机制研究 一、引言 3 3 二、材料与方法 3 3 三、实验结果 6 1 四、讨论 9 8 五、J 、结 1 0 2 第三部分脐带间充质干细胞对食管癌细胞裸鼠移植瘤的可能作用研究 一、前言 1 0 4 、日U 舌 二、材料与方法 1 0 4 三、实验结果 1 l
3、l 四、讨论 1 1 6 五、小结 1 1 7 全文总结 1 1 8 参考文献 1 2 0 课题资助基金 1 3 2 论文综述胚胎干细胞与肿瘤干细胞研究进展 1 3 3 致谢 1 4 5 简历 1 4 6 声明 1 4 7 北京协和医学院【f l 困医学科学院博士学位论文表索弓 表索引 表1 1h M S C s 表面标志的流式检测 1 3 表1 2 荧光标记E C 和h M S C s 细胞共培养后多核双色荧光细胞比率2 1 表2 1 融合细胞表面标志6 5 表2 2 融合细胞免疫缺陷鼠致瘤能力比较7 l 表2 4 差异基因逻辑表达式7 4 表2 5 差异基因表达模式功能注释7 5 表2 6
4、 差异基因的功能分类7 6 表2 7 免疫过程相关基因富集列表7 8 表2 8 差异基因染色体定位和分布频率8 1 表2 9 差异基因染色体富集8 2 表2 1 0 差异基因染色体区带富集8 3 表2 1 1 差异基因定位于5 p 1 3 ，8 q 2 4 ，9 q 3 4 ，1 7 q 2 5 的基因列表 8 4 表2 1 2 差异基因定位于5 p 1 3 ，8 q 2 4 ，9 q 3 4 ，1 7 q 2 5 的基因功能注释 8 6 表2 1 3 食管癌常见突变基因的染色体定位 8 8 表2 1 4D U S P 6 稳定转染E C s 成瘤能力9 3 表2 1 5E M T 相关基因列
5、表9 5 表3 1 感染细胞筛选1 1 3 表3 2h M S C s 对E C s 免疫缺陷鼠致瘤能力的影响1 1 5 北京协和医学院l | 1 国医学科学院博士学位论文图索引 图索引 图1 1W h a r t o n s j e l l yM a t r i x 来源的h M S C s 形态学观察1 1 图1 2 细胞表而标记检测1 2 图1 3E C s 与h M S C s 不同比率共培养后细胞活性检测 1 4 图1 4E C s 与h M S C sl ：4 共培养后细胞活性检测1 5 图1 5 无血清干细胞培养基M S C M 共培养后细胞状态1 7 图1 6E C 和h M
6、S C s 共培养，或无血清M S C M 单独培养后克隆形成1 8 图1 7 共培养处理后E C s 凋亡检测1 9 图1 8t 】M S C s 对E C s 趋化性实验2 0 图1 9 绿色标记E C 9 7 0 6 和红色标记h M S C s 共培养2 天后显微镜观察 2 2 图1 1 0 绿色标记K Y S E l 5 0 和红色标记h M S C s 共培养2 天后显微镜观察2 3 图1 1 1 绿色标记E C 9 7 0 6 和红色标记h M S C s 共培养4 天显微镜观2 4 图1 1 2 绿色标记K Y S E l 5 0 和红色标记h M S C s 共培养4 天后显
7、微镜观察 2 5 图1 1 3 绿色标记E C 9 7 0 6 和红色标记h M S C s 共培养8 天显微镜观 2 6 图1 1 4 绿色标记K Y S E l 5 0 和红色标记h M S C s 共培养8 天后显微镜观察 2 7 图1 1 5 脐带横断面解剖结构2 8 图2 1 细胞融合实验流程6 l 图2 2 共聚焦显微镜验证细胞融合 6 2 图2 3 细胞融合效率 6 3 图2 4 融合细胞F A C S “ 图2 5 融合细胞C K l 8 标志检测6 6 图2 6 融合细胞形态学改变 图2 7 融合细胞培增时间 图2 8 融合细胞自发凋亡 图2 9 融合细胞的软琼脂克隆形成 图
8、2 1 0 全基因整体聚类图 l I 6 9 6 9 7 0 7 2 北京协和医学院l I 国医学科学院博士学位论文图索弓 图2 1 1 差异基因的聚类和表达模式的分布 图2 1 2 差异基因的表达模式和主要G O 图2 1 3 差异基因核心信号通路网络图 图2 1 4 差异基因染色体定位和分布 图2 1 5E M F 细胞D U S P 6 表达的验证 图2 1 6D U S P 6 转染E C 细胞后表达水平检测 图2 1 7D U S P 6 瞬时转染对E C 细胞的影响 图2 1 8 外源性表达D U S P 6 对E C 细胞克隆形成的影响 图2 1 9D U S P 6 稳定转染E
9、 C 9 7 0 6 细胞成瘤能力 图2 2 0 细胞诱导分化潜能 图2 2 l 重编程基因表达模式 图2 2 2 不同细胞干性基因比较 图3 1D i D 标记h M S C s 对于肿瘤组织的迁移 图3 2D i D 标记h M S C s 细胞3 D 检测 图3 3 移植瘤冰冻切片荧光显微镜观察 图3 4D I R 标记l 】M S C s 细胞活体成像检测 图3 5 活体成像观察l u c h M S C s 细胞 l l l 3 4 8 0 9 0 O 1 2 6 7 8 l 1 2 3 4 7 7 7 8 8 9 9 9 9 9 9 9 n n n n n 北京协和医学院【 I 国
10、医学科学院博士学位论文中英文缩略词 A m p B S A D T T 髓 E C E C s E D T A H R P n 她 P I R N a s e S D S 1 1 3 S T B S T T r j s D M S o F B S P B S n - P C R 忸 M E T E M T M S C h M S C s S C I Di l o l x s e 中英文缩略词 A m p i c i l l i n B o v i n eS e r u mA I b u m i n D i t h i o t h r e i t o l E t h i d i u mB r o
11、 m i d e E s o p h a g e a lC a r r e l “ E s o p h a g e a lC a n c e rc e l l s E t h y l e n e d i a m i n eT e t r a - a c e t i cA c i d H o r s e r a d i s hP e r o x i d a s e P o l y a c r y l a m i d eG e lE l e c t r o p h o r e s i s P r o p i d i u mI o d i d e R b o n u c l e a s e S o
12、d i u mD o d e c y lS u l p h a t e T r i s b u f f e r e dS a l i n e T r i s - b u f f e r e dS a l i n ec o n t a i n i n gT w e e n - 2 0 T r j s 一( h y d r o x y m e t h y l ) 一a m i n o m e t h a n e D i m e t h y l s u l f a x i d e F e t a lB o v i n eS e r u m P h o s p h o t a t eB u f f e
13、 rS a l i n e r e a l - t i m eP o l y m e r a s eC h a i nR e a c t i o n W e s t e r nB l o t M e s e n c h y m a l - e p i t h e l i a lt r a n s i t i o n E p i t h e l i a l - r m s e n c h y m a lt r a n s i t i o n M e s e n c h y r m ls t e mc e l l s H u m a nu m b i l i c a lc o r dW h a r t o f f sJ e l l yd e r i v e d m e s e m h y m a ls t e mc e l l s s e
