《异氟烷预处理对离体大鼠低温心肌缺血再灌注损伤的影响》由会员分享，可在线阅读，更多相关《异氟烷预处理对离体大鼠低温心肌缺血再灌注损伤的影响（55页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、徐州医学院 硕士学位论文 异氟烷预处理对离体大鼠低温心肌缺血再灌注损伤的影响 姓名：曹汉忠 申请学位级别：硕士 专业：麻醉学 指导教师：曾因明;陈海涛 20040601 异氟烷预处理对离体大鼠低温心肌缺血再灌注损伤的影响 中文摘要 目的 ( 1 ) 研究异氟烷预处理( I S O P ) 对离体大鼠心肌1 7 低温缺血再灌注损伤的影 响。 ( 2 ) 探讨心肌膜K 肼( s K 册) 昶线粒体K 册( m K A T P ) 通道在I s o P q 3 的作用 方法 借助S K A T p 和m K A T P 两种通道共同阻滞剂格列本脲( g l i b e n c l a m i d e
2、 ，G L B ) 及m K A T P 特异性阻滞剂5 一h y d r o x y d e c a n o a t e ( 5 - H D ) ；应用离体心脏L a n g e n d o r f r 莲注模型系统， 建立离体大鼠1 7 低温全心心肌缺血1 5 0 r a i n 常温再灌注6 0 r a i n 损伤模型。在3 7 T C 0 I 条件下，各组心脏均用K H 液平衡灌注1 5 m i n ，接着3 5 m i n 内的处理方式各组不 同，以此将4 8 个心脏随机分为6 组( n = 8 ) ：( 1 ) 对照组( C O N ) ：用K - H 液继续灌注： ( 2 )
3、G L B 组：用含G L B2 0 u m o l L 的K H 液灌注：( 3 ) 5 - H D 组：含5 H D1 5 0 u m o L L 的K H 液灌注；( 4 ) 异氟烷预处理组( I S O P ) ：先继续用K - H 液灌注5 m i n 后，给予l 异氟烷预充饱和的K H 液灌注1 5 r a i n ，再用K H 液冲洗1 5 m i n ：( 5 ) I S o P + G L B 组：所 用K H 液中含G L B2 0 um o l L ，异氟烷预处理方式同I S O P 组；( 6 ) I S O P + 5 H D 组：所 用K H 液中含5 H D1 5
4、 0t im o l L ，异氟烷预处理方式同I S O P 组。再接着1 7 0 1 低 温缺血1 5 0 r a i n ，常温( 3 7 7 + C 0 1 ) 再灌注6 0 m i n ( 简称低温缺血再灌注) 各组相 同。 监测平衡灌注末( 基础值) 、预处理末、低温缺血前、再灌注l m i n 、3 r a i n 、5 r a i n 、 1 0 m i n 、1 5 r a i n 、3 0 r a i n 、4 5 m i n 、6 0 r a i n 心肌功能指标( I S P 、L V E D P 、L v D P 、H R 、 H R L V D P 、d P d t
5、。及d P d t 。i 。) 、低温缺血期间左室内压( H I L v P ) 和再灌注1 5 m i n 时的冠脉流量( C F ) ，检测再灌注2 0 m i n 时C K 释放量及再灌注末心肌梗死面积。 结果 ( 1 ) C O N 组、G L B 组和5 - H D 组之间比较： 各组平衡灌注末、再灌注4 5m i n 和6 0m i nL V S P 、L V E D P 、L V D P 、H R 、H R L V D P 、d P d t 。及d P d t 。i 。组间无统计学差异c P 0 0 5 ) 。再灌注4 5 m i n 和6 0 r a i nL V S P 、
6、L V D P 、H R 、H R L V D P 、d P d t 。及d P d t m i 。明显低于基础值( P 0 0 5 ) 。复灌2 0 m i n 时各组C K 释放量 C O N 组：( 5 5 0 7 ) u n i t s g - t m l n - I , G L B 组：( 5 3 0 8 ) u n i t s g ，m i n ，5 - H D 组：( 5 7 0 5 ) u n i t s g - 1 m i n “】没有统计学差异 0 0 5 ) 。再灌注末各组心肌梗死面积 C O N 组： ( 6 3 5 ) ，G L B 组：( 6 2 7 ) ，5 -
7、H D 组：( 6 5 8 ) 也没有统计学差异( p 0 0 5 ) 。 这些表明G L B 及5 - H D 本身对- t l , 肌没有明显影响a ( 2 ) C O N 组、I S O P 组、I S O P + G L B 组及I S O P + 5 一H D 组之间比较： 各组低温缺血期间左室内压( H I L V P ) 变化有一共同特征，即低温缺血开始由 L V P 轻微下降到缓慢上升，接着出现快速上升到达一拐点( 距离L V P 峰压l n m t H g ) 后，L v P 趋于平稳直至复灌开始为止。心脏低温缺血开始到L V P 快速上升起点的时 间( S T I M E
8、) 和达到拐点的时间( C T I M E ) 与梗死面积之间有负性相关关系( n = 3 2 ；r = 0 6 3 8 P 0 0 5 ) ，L V S P ，L V D P ，H R ，L V D P X H R ，d P d t 。“，d P d t m i n s i g n i f i c a n t l yd e c r e a s e db u tL V E D P s i g n i f i c a n t l yi n c r e a s e da f t e rr e p e r f u s i o ni ne a c hg r o u p ， a sc o m p a r
9、 e dw i t hb a s e l i n ev a l u e s 6 0 0 m m H g 、P C 0 2 为3 5 - - 4 5 m m H g 。可开始用于实验。 2 1 _ 2 3 异氟烷饱和液的各制f 1 2 l 用9 5 和5 C 0 2 混合气体通过异氟烷挥发器，将l 异氟烷持续通入K - H 液中 ( D a t e x 气体检测仪检测) ，3 7 7 时，取样气相色谱仪检测异氟烷浓度，发现异氟烷 预充K H 液达饱和平衡的时间需( 2 0 _ 2 ) m i n ( 见附录) 。 2 1 3 灌流技术 成年S D 大鼠，2 5 0 _ _ + 3 0 9 ，腹腔
10、注射氯胺酮1 0 0 m g k g 麻醉，肝素5 0 0 U k g 抗凝， 约5 m i n 进入麻醉状态，仰卧固定，沿肋缘下横向剪开腹前壁，再沿腹中线向头端剪至 剑突，剪开膈肌，沿两侧锁骨中线纵向剪开胸腔，分离纵隔前组织，将前胸壁翻向头端， 暴露心脏，以左手食指和中指轻压心脏，暴露心底部大血管，剪断大血管并使主动 脉保留3 5 m m ，提起心脏，分离心后组织，迅速取出心脏，放入预冷的K H 液中( O 4 ，含冰) ，在液面下找出主动脉断端，用眼科镊将主动脉提取插管，置于 L a n g e n d o r f f 灌注管口，用l 号丝线结扎固定后进行心脏逆行灌注。整个操作过程在 2
11、m i n 内完成，并防止空气及组织碎片进入冠状动脉造成栓塞。灌流开始数秒内心脏 即可开始跳动，待心律稳定后，在肺动脉起始部剪开- - $ 口，以利于冠脉流出液的排 出。 2 1 4 离体心脏全心低温缺血再灌注损伤模型 大鼠离体心脏置于L a n g e n d o r f f 系统后，用9 5 或5 C 0 2 混合气体饱和的灌流 液灌注5 0 r a i n 后，钳夹灌注管停止灌注并把预制的1 7 “ C O 1 恒温浴槽置于心脏下， 使心脏浸于K H 液中，确保缺血心脏保存于1 7 0 1 条件下维持2 5 h ，此为低温 缺血。再开放灌注管并把预制的3 7 7 “ C 0 1 恒温浴槽
12、移至心脏下，确保心脏再灌 注期间维持在3 7 7 0 1 达6 0 m i n ，此为再灌注。对照组心肌再灌注6 0 m i n 末， L V D P 恢复到基础值约3 0 为离体心脏模型1 7 低温缺血时间的依据【1 3 】。 2 1 4 选择心脏的标准 离体心脏经L a n g e n d o r f f 模型平衡灌注1 5 m i n 后，H R 0 0 5 ) 2 5 G r a p h1 T h e c o u r s e o f t h e H I L v P ( T h er a t e o f r e c o r d w a s l m r a m i n ) ：t h e r
13、 e w a s ac o m m o nc h a r a c t e r i n t h et i m ec o u r s eo fH i L V Pi ne a c hg r o u p T h ec o u r s ec a r lb ed i v i d e di n t ot h r e ep h a s e sf o rd e m o n s t r a t i n g c l e a r l yt h ec h a r a c t e r T h ef i r s tp h a s ew B 5i n i t i a li s c h e m i ad u r i n gw
14、h i c hh e a r t ss l o p e db e a t i n gq u i c k l y a n dm f i r s td e c r e a s e ds l i g h t l ya n dt h e ni n c r e a s e ds l o w l y A f t e rg r a d u a l l yi n c r e a s e da b o u t1m m H g f r o mt h el o w e s tp o i n t ，L 、，Pe n t e r e di n t ot h es e c o n dp h a s e ，d u n n
15、gw h i c hI 卿r o s eq u i c k l yt oac r u t c h e d p o i n tw h i c hw a s1m m H gl o w e rt h a nt h ep e a kv a l u e T h e n ，L V Pb e c a m et or i s es l o w l yu pt ot h ep e a k a n dt h e nd e c r e a s e ds e q u e n t i a l l yv e r ys l o w l yu n t i lt h eo n s e to fr e p e r f u s i
16、 o n ，w h i c hf o r m e dap l a t f o r m p h a s eo f t h et i m ec o u r s eo f L V P ( t h et h i r dp h a s e ) T h eb e g i n n i n gp o i n to f H I L V Pw h i c hw a sd e f i n e da s l m m H gh i g h e rt h e nt h el o w e s tp r e s s u r e T h ed u r a t i o nf r o mo n s e to fh y p o t h e r m i ci s c h e m i at ot h e b e g i n n i
