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1、大连湾牡蝠消化系统的组织学 和组织化学研究 崔龙波 王延波 马圣媛 陆 瑶华 烟台大学生物化学系， 烟台2 6 4 0 0 5 ; 摘英对大连湾牡场消化系统进行了 组织学和组织化学研究。 其消化系统由消化道和消化腺组 成。 消化道枯膜上皮为单层柱状上皮， 有柱状纤毛细胞、 帖液细胞和顺牧状膝细胞三种细胞类型。 消化腺为复管状膝， 由消化细胞和嗜碱性细胞组成. 组化研究表明: 消化膝嗜孩性细胞富含蛋白质 和R N A , 消化细胞呈现蛋白醉、 非 特异 性醋酶、 脂醉及孩性磷酸酶活性。 消化道枯膜上皮中醉的活 性低于消化腺。 关键词大连湾牡蜘消化系统组织学组织化学 大连湾牡蝠( O s t r
2、e a t a l i e n w h a n e n s i s C r o s s e ) 隶属瓣鳃纲、 异柱目， 仅产于我国 北方沿海， 其个体较大， 肉量多， 生长快， 是养殖的优良贝 类。 迄今， 国外学者对牡蝠消化系统的大体解 剖已 作过描述 ( B u l l o u g h , 1 9 5 8 ; D a l e s , 1 9 8 1 ) ， 但未见组织学特别是系统的组织化学研究的 报道。 自 1 9 8 9 年2 月至1 9 8 9 年1 0 月采用组织学和多种组织化学方法对大连湾牡妨的消化系统进 行了细致的研究.以期为大连湾牡妨的消化生理研究提供理论基础，并为其人工养殖提
3、供必 要的参考资料。 1 材料和方法 1 . 1 材料 大连湾牡蜘取自 烟台海滨， 壳高5 . 4 - 6 . 2 c m ， 壳长3 . 2 -4 . O c m。 解剖取出消化腺和消化 道 各段进行研究。 1 . 2 方法 1 . 2 . 1 组织学研究 组织块置于B o u i n 氏 液或Z e n k e r 氏 液固定， 石蜡包理， 作连续切片， 切 片厚8 g m ， 苏木素一伊红 ( H . E )染色。 1 . 2 . 2 组织化学研究根据需要， 组织块分别置于1 0 %福尔马林、 B o u i n 氏液、 Z e n k e r 氏液 或C a r n o y 氏 液 固
4、 定， 石 蜡 包 埋， 切 片 厚 5 一 8 p m , to 片 分 别 进 行 以 下 染 色: P A S 法 显 示 多 糖， 唾液消化后P A S 法显示糖原， A l c i a n 蓝- P A S 法区分中性和酸性粘多糖， 醛品红- A l c i a n 蓝法 区分硫酸化和矮基化粘多糖， 汞澳酚蓝法染蛋白质， 甲基绿派洛宁法显示D N A和R N A , T u r n b u l l 氏蓝法显示铁，以及茜素红S 法显示钙。 新鲜组织块直接于恒冷冰冻切片机上切片， 切片厚6 -1 0 p m。 进行以下染色: C u n - n i g h a m氏明 胶薄膜法显示蛋白
5、酶， G o m o r i 氏吐温 ( 4 。 和8 0 ) 法显示脂酶， 酸性乙 酸- a - 蔡醋- 六偶氮对品红法显示非特异性酷酶, G o m o r i 氏硝酸铅法显示酸性磷酸酶, G o m o r i 氏钙钻法显 7 3 0 示碱性磷酸酶，以 及苏丹黑B法显示脂类。 以上组织化学方法见P e a r s e ( 1 9 8 3 ) . 2 结果 大连湾牡蝠的消化系统包括消化道和消化腺，前者又由口、食道、胃、晶杆囊、肠及直 肠组成。 2 . 1 组织学观察 消 化道管壁由 粘膜层、 粘膜下层和外膜层构成， 无肌层。 枯膜上皮为单层柱状上皮， 由 三 种类型的细胞组成，主要为柱状纤
6、毛细胞，另有由数量不等的粘液细胞和颖粒状腺细胞，后 者以胞浆内含嗜酸性颗粒为特征。 食道粘液细胞数量较多， 未见颗粒状腺细胞。 胃内壁形成大小不等的褶皱， 柱状纤毛细胞 高低不一， 纤毛较长且密集 ( 图版X X V I 1 ) ， 有较多的粘液细胞。 胃中后段的背侧有一胃 循，胃 循下的上皮细胞排列整齐， 游离端有微绒毛。 晶杆囊的 组织结构与胃 相似， 腔内 含均质红染的 晶杆。 肠内壁纵行褶皱形成明显的肠沟， 在肠沟散在分布较多的粘液细胞和顺粒状腺细胞 ( 图 版X X V 12 ) 。 直肠的 粘液细 胞和 顺粒状腺细胞数 量较多。 消化腺为复管状腺，由众多具分枝的小管组成。 腺管上皮
7、由消化细胞和嗜碱性细胞组成 ( 图版X X V 1 3 ) , 消化细胞呈柱状， 高低不等， 胞质内有许多大小不一的囊泡， 位于基部的囊泡其 内容物较顶端和中部囊泡的致密，胞核多位于墓部。 嗜碱性细胞呈锥形，高度较消化细胞低， 胞质深蓝染， 核较大、 近画形， 核仁明显。 数个嗜碱性细胞集中一起在腺管中 分布。 许多 腺管 汇集于小的导管， 再经较大的导管开口于胃， 导管上皮由单层柱状纤毛细胞和粘液细胞组成。 2 . 2 组织化学观鑫 P A S 反应:消化管粘液细胞和颗粒状腺细胞的细胞质、 消化腺消化细胞的囊泡内容物呈 紫红色，表明含多糖类物质。 唾液消化后P A S 反应:消化系统各部位均
8、呈阴 性， 表明不含糖 原, A l c i a n 蓝 - P A S 法: 消化道粘液细胞细胞质呈紫红色， 表明其分泌中 性和酸性混合枯液物 质。 醛品红一 A l c i a n 蓝法: 消化道枯液细胞细胞质呈蓝色， 表明其分泌梭基化酸性粘液物质。 汞 澳酚蓝法: 消化腺嗜碱性细胞细胞质呈深蓝色， 着色明显深于消化细胞和消化道的上皮细胞， 表明含有大量的蛋白质。 甲基绿派洛宁法: 消化腺嗜碱性细胞质及核仁呈红紫色， 表明含丰富 的R N A, 茜素红S 法和T u r n b u l l 氏蓝法:消化系统各部位均呈阴性， 表明不含钙和铁。 C u n n i g h a m氏明胶薄膜法:
9、消化腺消 化细胞和嗜 碱性细胞的游离端及管腔、 除直肠外的 消化道柱状纤毛细胞游离端呈透明空斑( 图版X X V I 4 ) , 表明 具有蛋白酶活性。 酸性乙酸一 ， 禁酣- 六偶氮对品红法: 消化腺的两种细胞及消化 道的柱状纤毛 细胞细胞质呈红徐色， 表明 具有非 特异性酷酶活性( 图版X X V 1 5 ) , G o m o r i 氏吐温法: 消化腺的消化细胞及除直肠外的消化道柱状 纤毛细胞细胞质含有徐黄色颗粒( 图版X X V 1 6 ) 。 表明 具有脂酶活性。 G o m o r i 氏硝铅法: 各部位 均呈阴 性反应。 G o m o r i 氏钙钻法: 消化腺消化细胞和嗜
10、碱性细胞的基部质膜、 胃 和肠柱状纤毛 细胞的顶端质膜呈棕黑色，表明具有碱性磷酸酶活性。 上述各种水解酶的活性均以消化腺最 高。 苏丹黑B法: 消化腺的两种细胞及消化道的柱状纤毛细胞细胞质中具黑色小滴， 表明含脂 类。 3 讨论 大连湾牡蝠消化道粘膜上皮由三种细胞: 柱状纤毛细胞、 粘液细胞和颗位状腺细胞组成。 7 3 1 柱状纤毛细胞是消化道枯膜上皮的主体细胞， 其功能也最为重要 在消化道的不同部位， 该细 胞的高低、 细胞排列的疏密以及纤毛的疏密与长短等方面都有差异， 表明不同 部位的柱状纤 毛细胞的功能也有所差异 ( T h o m a s , 1 9 9 3 ) 。 纤毛或疏或密广泛存
11、在于从食道到直肠的腔面， 这对于缺乏肌肉 层不能进行蠕动的大连湾牡蝠消化道来讲是极其重要的。 食物自口 摄人后在 消化道内 的运送、 胃内 食物颗粒的分选 ( 至消化腺和肠) 、 晶杆囊内晶杆的旋转以及教便的排 泄， 主 要是靠纤毛摆动的结果。 除直肠外， 消 化道其余部位的柱状纤毛细胞呈现不同程度的蛋 白酶、脂酶、非特异性醋酶等水解酶活性，表明柱状纤毛细胞具有一定的分泌功能，从而在 消化道内进行细胞外消化。 组化研究表明， 消化道各段数量不等的枯液细胞分泌中性及梭基化 酸性混合粘液物质， 起到粘合食物颖粒、 润滑腔面、 便于食物运送的作用。 颗粒状腺细胞以胞 质内含嗜酸性顺粒为特征，皱纹盘鲍
12、的消化道粘膜上皮亦存在此类细胞 ( 崔龙波等，1 9 9 5 ) , 但其作用目 前还不十分清楚。 消 化腺在软体动物的消化过程中发挥着重要的作用 ( O w e n , 1 9 7 2 ; J o h n s o n e t a l . , 1 9 9 6 ) , 如同其它瓣鳃纲动物一样， 大连湾牡砺消化腺有两种类型细胞:消化细胞和嗜碱性细 胞， 本研究 表明消化细胞表现很强的蛋白 质酶、非特异性酷酶、 脂酶等水解酶的活 性， 并以 细胞内含有大量的囊泡为特征。 细胞内不同部位的囊泡组成了与细胞异噬功能有关的细胞内 消化系统 ( O w e n , 1 9 7 2 ) , 当胃内 食物经导
13、管进入消化腺后， 消化细胞可通过内 吞作用将食物 摄人细胞内， 在细胞内多种水解酶的作用下进行细胞内消化。 经过细胞内 消化所获取的营养物 质或转变成脂类贮存起来， 或通过基部质 膜转运至腺管间的血腔。 消化细胞基部质膜表现很强 的碱性磷酸酶活性， 而碱性磷酸酶与物质的跨膜转运有关 ( B a b u l a a n d S k o w e o n - W o n d l a n d , 1 9 8 8 ) 。 因此， 消化细胞的主要功能是进行细胞内消化。 嗜碱性细胞曾被认为是消化细胞的前体 ( O w e n , 1 9 7 2 ) 。 本研究观察到嗜碱性细胞细胞质中含丰富的R N A ，
14、并表现蛋白酶和非特异性 醋酶活性， 因此嗜碱性细胞的主要功能是分泌. 所分泌的酶可以在腺管腔内 进行细胞外消化， 从而便于消化细胞的内吞与吸收。 参考文献 崔龙波。 刘传林， 2 7 . B a b u l a . A. a n d t a s . Ba 左. B u l l o u g h , W. S . 王丽景等1 9 9 5 成年皱纹盘鲍消化道的组织学研究. 烟台大学学报( 自然科学与工程版) 1 0 ( 4 ) , 2 2 - S k o we o n - W o n d l a n d 1 9 8 8 H i s t o c h e m ic a l s t u d i e s o
15、 f t h e d ig e s t i v e s y s t e m o f t h e s l u g S x. Ama . S c i . 1 - . . 尸 o rna n D. 2 6 1 9 5 8 P r a c t i c a l i n v e r t e b r a t e a n a t o n y 6 5 7 1 . 2 e d e d i t i o n . L o n d o n : Th e D a l e . ,R P . J o h n s o n , M. AY. M. P a u l e t . in v e r t e b r a t e z o o
16、 l o g y . 2 e d A. D o n v a l . e t a l . 1 9 9 6 e d it i o n . O x f o r d:B l a c k w e l l Ma c mi l l a n P r e s s L t d - 3 4 2 -3 8 0 S c i e n t i fi c P u b l i c a t i o n 1 5 5 - 1 9 0 H is t o l o g y . b i o c h e mi s t y i n t h e d i g e s t i v e s y s t e m o f t h e e n d o s y m b o i n t - b e a t i n g b i v a l v e L . , i p e s J u t i n n l i s1 9 7: 1 5 . 3 8 . O w e n , G. 1 9 7 2 P e a r - A . G . E . T h o ma s . K. A. 1 8 6 . 7 3 2 L y s o s o m e s , p
