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1、1,(二)染色质蛋白质 负责DNA分子遗传信息的组织、复制和阅读 组蛋白(histone)：是真核生物染色体的基本结 构蛋白, 是一类小分子碱性蛋白质,有5种类型, 即H1、H2A、H2B、H3、H4，它们富含带 正电荷的碱性氨基酸，能够同DNA中带负电 荷的磷酸基团相互作用。 染色质中的组蛋白与DNA的含量之比为：11。,2,组蛋白的功能: 核小体组蛋白(nucleosomal histone), 包括H2A、H2B、H3和H4, 作用是与 DNA组装成核小体 H1不参加核小体的组建, 在构成核 小体时起连接作用,并赋予染色质以 极性。,3,组蛋白的化学修饰 虽然组蛋白分子的氨基酸序列是高度
2、保守的，也会进行一些化学修饰，如酰基化、甲基化、磷酸化，以及ADP核糖化等。,4,组蛋白的化学修饰,5,非组蛋白(nonhistone) 概念: 是指细胞核中组蛋白以外的蛋白质。 特性: 非组蛋白具多样性和异质性 对DNA具有识别特异性，又称序列特异性 DNA结合蛋白 (sequence specific DNA binding proteins) 具有多种功能，包括基因表达的调控和染 色质高级结构的形成。 呈酸性、带负电荷。,6,非组蛋白的功能: 除了一些酶的特殊功能外，非组蛋白还具有以下功能 参与染色体的构建; 启动DNA的复制; 调控基因的表达。,7,非组蛋白参与染色体构建,8,序列特异
3、性DNA结合蛋白的结构特征,螺旋-转角-螺旋基序(helix-turn-helix motif) 锌指基序(Zinc finger motif) 亮氨酸拉链基序(Leucine zipper motif，ZIP) 螺旋-环-螺旋结构基序(helix-loop-helix motif，HLH) HMG-框结构基序（HMG-box motifmotif)）,9,The helix-turn-helix motif 由两个螺旋组成的同型二聚体 两个螺旋之间被一段转动的肽隔开 一个螺旋为识别螺旋(recognition helix),负 责识别DNA大沟的特异碱基序列。 另一个螺旋没有碱基特异性,与D
4、NA磷酸戊 糖链骨架接触。,10,The helix-turn-helix motif,11,锌指结构基序 (zinc finger motif) 这类蛋白因子往往含有几个相同的指结构，每一个指结构含有一段保守序列。 有两种主要的锌指单位Cys2/His2锌指单位和Cys2/Cys2的锌指单位。,12,锌指结构基序,13,亮氨酸拉链基序(Leucine zipper motif，ZIP) 含有4个或5个leu残基，彼此之间精确的相距7个 氨基酸残基； 在螺旋的每一个侧面出现一个leu,这些leu排成一 排，两个蛋白分子的螺旋之间靠leu残基之间的 疏水作用形成一条拉链； 蛋白与DNA的特异性结
5、合都是二聚体形式，但结 构域不在拉链区。,14,The leucine zipper motif,15,螺旋-环-螺旋基序 (Helix-loop-helix (HLH) motif ) 这种基序是由一个环将两个螺旋结构分隔开来. 它与螺旋-转角-螺旋结构的差别在于两个螺 旋的一侧还有一段疏水链，这样当螺旋-环-螺 旋结构位于两个多肽之间时，这两个疏水的侧 链就会将两个多肽链连在一起形成类似亮氨酸 拉链的结构。,16,几种主要序列特异性DNA结合蛋白的结构特征,引自Kleinsmith et al ., 1995,17,二、核小体（nucleosome）,核小体的结构特点 Nucleosome
6、 is basic structural unit of chromatin 。 由200个左右碱基对的DNA和四种组蛋白结合而成； 其中四种组蛋白(H2A、H2B、H3、H4 )各2分子组成 八聚体的小圆盘，是核小体的核心结构； 146个碱基对的DNA绕在小圆盘外面1 .75圈。每一 分子的H1与DNA结合, 起稳定核小体结构的作用； 两相邻核小体之间以连接DNA(linker DNA)相连, 长度 为080bp不等。,18,The organization of chromatin in nucleosomes,19,20,三、染色体的包装（chromosome packing）,核小体(
7、nucleosome) 螺线管(solenoid) 超螺线管(supersolenoid) 染色体(chromosome) 从核小体开始到染色体, DNA总共压缩: 压缩7倍 压缩6倍 压缩40倍 压缩5倍 DNA 核小体螺线管-超螺线管-染色单体,21,30nm 纤维,22,染色体的四级结构,23,四、常染色质和异染色质 常染色质(euchromatin) 指间期核内染色质纤维折叠压缩程度 低, 处于伸展状态, 用碱性染料染色时着 色浅的那些染色质。 特征: DNA包装比约为1 0002 000分之一 单一序列 DNA 和中度重复序列DNA(如组蛋 白基因和tRNA基因) 并非所有基因都具有
8、转录活性,常染色质状态 只是基因转录的必要条件而非充分条件,24,异染色质(heterochromatin)： 概念： 指在整个间期, 仍然保持折叠压缩, 处于聚缩状态,碱性染料染色时着色较深 的染色质组分。 类型 结构异染色质（或组成性异染色质） (constitutive heterochromatin) 兼性异染色质(facultative heterochromatin),25,结构异染色质 除复制期以外，在整个细胞周期均处于聚缩状态， 形成多个染色中心 结构异染色质的特征： 在中期染色体上多定位于着丝粒区、端粒、次缢痕 及染色体臂的某些节段,呈现C带染色； 由相对简单、高度重复的DN
9、A序列构成, 如卫星DNA； 具有显著的遗传惰性, 不转录也不编码蛋白质； 在复制行为上与常染色质相比表现为晚复制早聚缩； 在功能上参与染色质高级结构的形成，导致染色质区 间性，作为核DNA的转座元件，引起遗传变异。,26,兼性异染色质 在某些细胞类型或一定的发育阶段, 原来的常染色质聚缩, 并丧失基因转录活性, 变为异染色质，如X染色体随机失活 异染色质化可能是关闭基因活性的一种途径,27,第三节 染色体 中期染色体的形态结构 染色体DNA的三种功能元件（functional elements） 核型与染色体显带 巨大染色体（giant chromosome）,28,(一)中期染色体的形态结
10、构 中期染色体的典型形态 类型 染色体的主要结构,29,染色体的电镜照片,30,类 型 中着丝粒染色体(metacentric chromosome) 近（亚）中着丝粒染色体 (submetacentric chromosome) 近（亚）端着丝粒染色体 (subtelocentric chromosome) 端着丝粒染色体(telocentric chromosome)。,31,四种不同位置着丝粒的染色体,32,根据着丝粒位置进行的染色体分类,长臂长度短臂长度; 短臂长度染色体总长度 (根据Levan等,1964; Green等,1980),33,染色体的主要结构 着丝粒(centromer
11、e)与动粒(kinetochore) 主缢痕(Primary constriction) 次缢痕(secondary constriction) 核仁组织区(nucleolar organizing region, NOR) 随体(satellite) 端粒(telomere),34,着丝粒与着丝点(动粒) 着丝点结构域(kinetochore domain) 内板(inner plate) 中间间隙(middle space),innerzone 外板(outer plate) 纤维冠(fibrouscorona) 中央结构域(central domain) CENP-B盒与动粒蛋白 配对结
12、构域(pairing domain)： 内部着丝粒蛋白INCENP(inner centromere protein) 染色单体连接蛋白clips(chromatid linking proteins),35,着丝粒与动粒,36,主缢痕与主缢痕,37,(二)染色体DNA的三种功能元件 （functional elements） 自主复制DNA序列(autonomously replicating DNA sequence, ARS)： 具有一段11-14bp的同源性很高的富含AT的共有序列及其上下游 各200bp左右的区域是维持ARS功能所必需的。 着丝粒DNA序列(centromere DN
13、A sequence,CEN) ： 两个相邻的核心区：80-90bp的AT区；11bp的保守区。 端粒DNA序列(telomere DNA sequence,TEL) ： 端粒序列的复制 端粒酶 ，在生殖细胞和部分干细胞中有端粒酶活性， 端粒重复序列的长度与细胞分裂次数和细胞衰老有关。,38,(三)核型与染色体显带 核型(karyotype) 是指染色体组在有丝分裂中期的表型, 包括染色体数目、大小、形态特征的总和。 核型模式图(idiogram) 将一个染色体组的全部染色体逐个按 其特征绘制下来, 再按长短、形态等特征排 列起来的图象称为核型模式图,它代表一个 物种的核型模式。 染色体显带技
14、术,39,(四)巨大染色体 多线染色体（polytene chromosome） 灯刷染色体（lampbrush chromosome）,40,多线染色体 存在于双翅目昆虫的幼虫组织细胞、某些植物细胞 多线染色体的来源：核内有丝分裂 多线染色体的带及间带： 带和间带都含有基因，可能“管家”基因(housekeeping gene) 位于间带, “奢侈”基因(luxury gene) 位于带上。 多线染色体与基因活性：胀泡是基因活跃转录的形态学标志,41,Polytene chromosome,42,灯刷染色体 （lampbrush chromosome） 灯刷染色体是卵母细胞进行减数第一次分裂
15、时停留在双线期的染色体。 灯刷染色体的超微结构 灯刷染色体的转录功能,43,灯刷染色体,44,第四节 核 仁(nucleolus) 核仁的超微结构 核仁的功能 核仁周期,45,一、核仁的超微结构 纤维中心(fibrillar centers,FC) 致密纤维组分(dense fibrillar component,DFC) 颗粒组分(granular component,GC) 核仁相随染色质(nucleolar associated chromatin) 与核仁基质（(nucleolar matrix),46,Structure of the nucleolus,47,二、核仁的功能,核仁是
16、细胞制造核糖体的装置。 rRNA的合成 rRNA前体的加工 参与核糖体大小亚基的装配 控制蛋白质合成的速度,48,rRNA基因转录的形态及组织特征 组织特征位于NORs的rDNA是rRNA的信息来源。 形态特征:“圣诞树”样结构。 rRNA基因的转录采取受控的级联放大机制。,49,rRNA前体的加工 加工过程 修饰与加工 小分子核仁RNA(snoRNAs)、小分子核仁核糖核蛋白（snoRNPs） 引导RNA（guide RNA）,50,核糖体亚单位的组装 加工下来的蛋白质和小的RNA存留在 核仁中,可能起着催化核糖体构建的作用； 核糖体的成熟作用只发生在转移到细胞 质以后, 从而阻止有功能的核糖体与核内 加工不完全的hnRNA分子接近； 核仁的另一
