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1、中药指纹图谱技术在中药质量控制方面的研究进展,聂蔓 中药学2013级3班 201340302149,中药质量控制,1,2,3,中药指纹图谱技术,中药蟾酥的质量控制,目录,中药质量控制技术,中药质量控制技术,历史：中国五千年的历史文明中，中医学在发展的历史长河中，凝集了无数医家的智慧结晶。历代医家以黄帝内经、难经、本草纲目、伤害杂病论、金匮要略等古代医典的理论为指导，致力于临床实践，从正反两方面取得直接经验，并以之医籍记述、师承授受的间接经验结合起来，通过反复实践，逐步积累，达到心领神会的境地，从而产生出对理论问题的各种精辟见解，以及创造出诊治某些病症的独到经验。这是历代医家取得学术成就的主要方
2、法，也是中医学术发挥咱的主要途径。,中药质量控制技术,现状：中医发展到今天，它已经逐步走向国际医学领域。目前，影响中医发展尤其是中医药的发展的中药因素是中药质量问题。由于中医发挥疗效的物质基础是中药的有效成分，而一味中药中的有效成分可能是几种，也可能是几十种甚至更多。因此，目前中药质量的评价和质量控制只有先解决复杂样品的组分分析，才能建立其质量标准。,中药质量控制技术,检测技术方法：今年发展起来的包括高效液相色谱（HPLC)、气相色谱（GC)、毛细管电泳（CE）等多种色谱联用技术，它利用他们不同的分离效果，再结合计算机技术和色谱专家系统，把他们运用于中药质量的检验中，完全可以满足中药样品的分离
3、要求，再使用红外光谱，质谱-质谱的联用技术，就可以完成对中药中有效成分的分离和测定，可以实现对药材的真正客观、可靠、合理、有效的质量评价和质量控制，建立中药的质量标准，以推动我国中医学的发展。,中药质量控制技术,随着中药在国际上的广泛应用，其有效性、安全性问题引起了广泛关注。建立高品质的质量标准以保证药物的安全性、有效性是一项长期而艰巨的任务。中药质量控制一直都是中药研究与生产中的难点和热点，也是实现中药现代化的重要基础和关键；而且目前国内中药质量控制的模式和手段具有很多局限性，已成为中药打入国际市场的主要障碍之一。,中药质量控制技术,我国目前推行的中药质量标准体系是由区分优劣的定量指标（包括
4、纯度、异物、灰分、水分等）和辨别真伪的定性指标（包括产地、采收期、形状、特征、颜色反应、浸出物等）组成的。由药材中单一或几个化合物来对一种或几种药材定性或定量标定是一种普遍现象，其控制的是中药中的某部分组分，忽略了中药中多种成分、多种机制的协同作用，难以全面衡量中药的疗效和质量。,中药指纹图谱技术,中药指纹图谱技术,经过二十几年发展的中药指纹图谱在中药质量的综合评价和控制方面迈进了一大步，被认为是中药质量控制的里程碑，已由最初的在方法和技术方面的基础研究，开始逐渐进入到中药质量控制和评价的实际应用中。 指纹图谱是基于对中药物质群整体作用的认识，借助于波谱和色谱等技术获得中药化学成分的光谱或色谱
5、图，是实现鉴别中药真实性、评价质量一致性和产品稳定性的可行模式，具有信息量大、特征性强、整体性和模糊性等特点。,中药指纹图谱技术,指纹图谱包括了对已知成分和未知成分的分析，反映的化学成分信息（具体表现为相对保留时间和相对峰面积）具有高度特异性和选择性，可较充分地反映出中药复杂混合体系中各种化学成分量分布的整体状况，尤其是在现阶段有效成分绝大多数没有明确的情况下，能够结合各种色谱、光谱、波谱手段，特征性地鉴定中药的真伪与优劣，成为中药自身的“化学条码”。 因此，中药指纹图谱能较全面地反映药材所含化学成分的相对关系，体现了中药成分的复杂性和相关性，与中医药的传统理论相适应，能真正对中药内在质量进行
6、有效表征、综合评价和全面控制，尤其适用于有效成分不完全明确或不需要完全明确的情况下，对中药材及中药产品进行质量控制。中药指纹图谱除能用于考察中药材产地、采收季节、采收部位、炮制加工、储存时间等因素，以提供依据鉴别生产前原料药材的真伪优劣，更可用于中药生产过程的质量控制：追踪制剂中某些化学成分的变化，监测原料药材与成品之间、成品的各批次间质量的一致性及稳定性。,中药指纹图谱技术,指纹图谱所用技术包括化学指纹图谱、生物指纹图谱和代谢指纹图谱。,中药指纹图谱技术,化学指纹图谱化学指纹图谱是依据中药中所含化学成分种类及其量用不同的仪器、方法检测得到的指纹图谱。根据所用方法的不同将中药化学指纹图谱分为
7、2类：波（光）谱指纹图谱、色谱指纹图谱。 波（光）谱指纹图谱：光谱指纹图谱中常用的有红外光谱、近红外光谱、紫外光谱以及 X 射线衍射光谱、核磁共振等。由于这些方法能够给出药效物质基础的结构信息，部分信息也可能与特定的化学成分有直接关联，所以它们在中药指纹图谱的研究中仅是作为辅助手段。,中药指纹图谱技术,红外光谱仪,中药指纹图谱技术,紫外光谱仪,中药指纹图谱技术,荧光光谱仪,中药指纹图谱技术,核磁共振波谱仪,中药指纹图谱技术,色谱指纹图谱:色谱法是分析化学领域中发展最快、应用最广泛的分析方法之一，也是中药指纹图谱最基本的技术和现代中药产业的关键技术，非常适合我国的国情。常用的色谱指纹图谱技术有薄
8、层色谱指纹图谱、液相色谱指纹图谱、气相色谱指纹图谱、高效毛细管电泳指纹图谱等。各种技术均有各自的优点和缺点，适用范围也各有差别，选择何种色谱指纹图谱技术取决于供试品的性质和研究目的。,中药指纹图谱技术,薄层色谱法,中药指纹图谱技术,液相色谱仪,中药指纹图谱技术,生物指纹图谱：中药生物指纹图谱主要应用于植物遗传育种研究以及种子质量标准化、品种审定、假种辨别等方面，包括蛋白质组学指纹图谱和 DNA（基因组学）指纹图谱。 代谢指纹图谱：对此的研究有 2 种：一种是植物和中药的代谢组学研究，主要研究不同的处置方式（包括栽培、环境、病虫害、采集、加工和贮存）对中药材的影响，以及提取物的标准化和质量控制等
9、；另一方面，研究中药对动物、人体代谢组的影响，以进行药物安全性评价和发现生物活性化合物群及其作用机制研究等。,中药蟾酥的质量控制,蟾酥属动物药,为蟾蜍耳后腺及皮肤腺分泌的浆液经干燥制成。其主要有效成分是蟾蜍甾烯,占药材干重的15%以上,尤以华蟾毒精(cinobufagin)、蟾毒灵(bufalin)、脂蟾毒配基(resibufogenin)的含量最高,且活性较强。 蟾酥作为动物药,其来源很难鉴定,导致药材质量差异显著。另外,蟾蜍甾烯既是蟾酥的有效成分,也是其毒性成分,服用过量可能导致严重的毒副作用甚至死亡。,中药蟾酥的质量控制,因此迫切需要建立一套完善的质量控制标准,对蟾酥药材的蟾蜍甾烯类成分
10、进行有效监控,从而保证用药安全。 现在建立了定性定量分析方法用于蟾酥药材的质量控制。在此基础上,开展了体内代谢研究以阐明蟾酥的体内药效物质基础。,中药蟾酥的质量控制,对蟾酥药材的甲醇提取物进行液相色谱-质谱联用(LCMS)分析。共检测到35个蟾蜍甾烯类成分,包括4个新化合物。其中17个成分经与纯化合物对照予以鉴定,其它化合物则主要根据质谱裂解特征并参考相关文献推测其结构。,中药蟾酥的质量控制,在此基础上,确定8个主要的蟾蜍甾烯作为蟾酥定量分析的指标性成分,并建立HPLCUV方法,对这8个主要成分同时进行含量测定。这些成分占蟾酥中蟾蜍甾烯总量的90%以上,占蟾酥药材干重的15%以上。 定性及定量分析的HPLC条件完全一致。这样把定性与定量结合起来,首次全面阐明了蟾酥的化学组成,也为蟾酥药材的质量控制提供了简便、快速的分析方法。,中药蟾酥的质量控制,通过建立SPE-HPLCUV分析方法,检测蟾酥经大鼠口服后5种主要蟾蜍甾烯在血液中的含量。这些指标化合物是蟾酥入血的主要成分,证明蟾蜍甾烯是蟾酥的有效成分。同时在血浆中还可检测到其他蟾蜍甾烯类化合物,可能是代谢产物，其结构测定工作正在进行之中。,谢谢观赏！,
