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1、本学位论文研究所获得的研究成果，其知识产权归河北医科大学所 有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表 与学位论文主要内容相关的论文，第一署名为单位河北医科大学，试 验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。 繇撇翩猝矽二级学 河北医科大学研究生学位论文独创性声明 本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，除了 文中特别加以标注和致谢等内容外，文中不包含其他人已经发表或撰 写的研究成果，指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写， 文责自负。 研究生签名：f f J l 奋 导师签章： 协年r 月7 日 目录 中文摘要1 英文摘要3 英文缩写5
2、研究论文类风湿肺间质纤维化患者中外周血单个核细胞的磷酸二酯酶 活性变化及密切相关的自身抗体 引言“7 第一部分磷酸二酯酶在类风湿肺间质病中的发病作用 前言“”一“一”一一8刚舌“”“”“”“”“”“一”“”“一一“8 材料与方法8 结果- 1 8 附I 蛩1 9 附表2 l 讨 念2 2 结 仑2 4 参考文献2 5 第二部分类风湿肺间质病的l 临床指标特点 前言2 7日U 舌“”“一”“一”“”“”“一”“一”“一一”“一”“2 7 材料与方法2 7 结果3 0 附表3 1 讨论3 2 结 仑- 3 6 参考文献3 6 结 念4 0 综述类风湿性关节炎肺间质病的研究进展4 1 致谢4 9 个
3、人简历5 0 类风湿关节炎( r h e u m a t o i da n h r i t i s ，R A ) 是一种以慢性进行性关节受 累为主的全身性自身免疫病，除对称性、多发性关节肿痛及畸形外，病变 可累及全身多个器官( 如肺、心、肾等) ，其中，肺间质病( i n t e r s t i t i a l l u n g d i s e a s e ，I L D ) 是R A 常见的关节外表现。 目的：分析类风湿肺间质病的磷酸二酯酶活性较类风湿病、健康人群 的病理特点，为应用磷酸二酯酶抑制剂治疗类风湿肺间质病奠定理论基 础；了解类风湿肺间质病的临床指标特点，探寻类风湿肺间质病的发病机 制
4、。 方法： 1 研究对象：选用符合类风湿关节炎诊断标准同时符合肺间质病诊断标 准的2 0 例住院患者( R A I L D ) 抽取清晨静脉血，同时抽取符合类风湿关 节炎诊断标准的1 0 例住院患者( R A ) ，并有1 0 例健康对照，性别、年 龄没有统计学差异。 2 用高效液相色谱法( H P L C ) 分别测得所有人的外周血单个核细胞 ( P B M C ) 中磷酸二酯酶( P D E ) 活性。 3 应用免疫试剂盒测得R A I L D 、I 认患者的类风湿因子、C 反应蛋白、 抗C C P 、抗灿认的指标分析R A I L D 和R A 患者的临床指标特点 4 应用S P S S
5、 l 6 O 软件进行统计学分析，数据用均数土标准差( x 士s ) 组间比 较采用两样本均数舱验，应用F i s h e r 确切概率法比较C 反应蛋白、A K A 的 阳性率进行统计学处理，尸 9 5 。 5 1 3 再将该稀释液在冰浴中用玻璃匀浆器制成匀浆，显微镜下确认细胞 研究论文 被粉碎均匀，即得富含P D E s 的酶样，一4 0 保存备用。 5 1 4 检测将一4 0 保存的P D E s 酶样取出溶解，按下表操作。 磷 按附表操作完成后，3 7 恒温，3 0 m i n 。然后沸水中加热2 m i n 终止 反应。最后高速离心1 5 0 0 0 r m i n3 0 m i n
6、 。分别取上清3 5 山加至另一试管 中送检。 5 1 5 鉴定方法：按照本实验室制订的技术标准或委托者提出的技术指标， 5 2 色谱条件 色谱柱：K r o m a s i lC 1 8 ( 4 6 m m 木1 5 0 m m ，5 u m ) ；流动相：甲醇一5 0 m m o L 磷酸缓冲液( P H 6 6 ，O 1 m m o LK H 2 P 0 4 、O 1 m m o L N a 2 H P 0 4 和纯水以 3 ：2 ：5 体积比例混匀) 组成，体积比l ：9 ；柱温：3 0 。；流速：1 O m l 木m i n ； 检测波长：2 5 4 n m ； 5 3 标准曲线的绘
7、制 取c A M P 标准品溶于D P B S 中，配制成浓度为2 0 、4 0 、6 0 p M 。分别取 研究论文 各浓度对照品溶液进样2 0 “L ，按上述色谱条件进行测定。各个浓度的对 照品溶液均进样3 次，计算其峰面积时取三次测定峰面积的平均值。以浓 度( x ) 为横坐标，c A M P 的峰面积( y ) 为纵坐标作c A M P 的标准曲线。典型的 c 剐P 的标准曲线方程为y ：O 2 6 8 0 x O 0 5 9 4 ( R 2 = O 9 9 9 8 ) 。 5 4 样品测定 取上清放入样品瓶中 ) L C 自动平行进样1 次，2 0 “l 。c A M P P D E 活性 以底物的水解百分率表示：c A M P P D E 活性= ( 空白对照管峰面积一样品 峰面积) 空白对照管底物峰面积1 0 0 6 统计学处理使用S P S S l 6 O 进行分析。组间比较采用两样本均数f 检验、 F i s h e r 确切概率法进行统计学处理，P ( 编 号：2 0 1 1 0 3 3 4 ) 第二主研人
