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1、第十五章 螺旋体,第一节 概 述,螺旋体(Spirochaeta)是一类菌体细长、柔软、呈螺旋状弯曲、运动活泼的原核细胞微生物。 螺旋体广泛存在于水生环境，也有许多分布在人和动物体内。大部分营腐生生活，无致病性，只有一小部分可引起人和动物的疾病。,一、形态与结构 1、形态 螺旋体呈螺旋状圆柱形，具有多个完整的螺旋。其大小相差极为悬殊，长5250m，宽0.13m，有的甚至能通过除菌滤器。 螺旋体上螺旋数目、两螺旋间的距离及回旋角度各不相同，在分类上可作为一项重要指标。,螺 旋 体,螺 旋 体,螺 旋 体,2、结构 中心为原生质柱。 外有轴丝缠绕。 最外层是由细胞壁和粘 液层构成的外鞘。 含RNA
2、和DNA 2种核酸。 螺旋体通过轴丝运动。,螺旋体结构图,二、染色特性 革兰氏染色：呈阴性，但由于着色困难，一般不 用。 姬姆萨染色：可使菌体染成红色或蓝色，染成蓝 色者一般多为腐生性螺旋体。 镀银染色法：为常用染色法，其特点是使银盐沉 淀粘附于螺旋体上，使之变粗而显 出黑褐色。 印度墨汁或刚果红负染：染背景，而螺旋体透明 无色，结果在兰或红色的背景上， 衬托透明的螺旋体，反差明显。,三、培养 多数螺旋体需厌氧培养，较难培养。但有些种属的螺旋体培养并不难，可需氧生长。 短螺旋体、钩端螺旋体以及个别致病性密螺旋体与疏螺旋体可采用含血液、腹水或其他特殊成分的培养基培养。 其余螺旋体迄今尚不能用人工
3、培养基培养，但可用易感动物来培养和保种。,四、分类,钩端螺旋体属,纤细螺旋体属,特纳螺旋体属,钩端螺旋体科,螺旋体属,脊螺旋体属,密螺旋体属,疏螺旋体属,螺旋体科,短螺旋体属,短螺旋体科,短螺纹科,短螺纹科,螺旋体目,第二节 疏螺旋体属,本属细菌呈螺旋状，菌体上有310个不规则的疏松螺旋。 致人和动物疾病的主要螺旋体 伯氏疏螺旋体 回归热疏螺旋体 鹅疏螺旋体 色勒疏螺旋体 钝缘蜱疏螺旋体,伯氏疏螺旋体,伯氏疏螺旋体是莱姆病的病原体，由蜱传播给人类。主要感染人和犬，此外牛、马、猫等也可感染。,一、主要特性 菌体细长，2030m，有420个大而宽松的螺旋。 运动活泼。 吉姆萨染色淡紫色，镀银染色棕
4、褐色。,伯氏疏螺旋体,二、致病性 本菌经蜱传播，可致人、犬、牛和马的关节炎。 病人出现的第一个症状是被蜱叮咬的部位出现圆形红斑，随后红斑逐渐扩大，继而扩展到关节，导致关节肿胀、疼痛。 动物看不到红斑，临床可见关节肿胀、跛行。,三、微生物学诊断 1、镜检 取被蜱叮咬部位附近的皮肤、患病关节的关节液制片，镜检。 2、血清学检查 ELISA可用于检测抗体。 3、PCR技术 可用于检测病料中的螺旋体。,第三节 钩端螺旋体属(Leptospira),又称细螺旋体属，成员是一群菌体纤细、螺旋致密，一端或两端弯曲呈钩状的螺旋体，故称钩端螺旋体，简称钩体。 大多数钩体无致病性，部分为致病性螺旋体，可引起人和动
5、物的钩体病（细螺旋体病）。,一、主要生物学特性 （一）形态与染色 菌体纤细，一端或两端弯曲呈钩状。长620m，螺旋细密而规则，至少有18个。能活泼运动，由于运动常使菌体呈8字、丁字或网球拍等形状或C、S、O等字母形，且此种形状可随时消失。 镀银染色法染色，只能看到棕色或黑色的弯曲钩状体，看不到螺旋。,钩端螺旋体,（二）生长要求与培养特性 需氧，营养要求不高，在含动物血清和蛋白胨的柯氏(Korthof)培养基生长良好。该培养基含有10%新鲜灭活兔血清。兔血清能促进钩体生长。 钩体生长缓慢,接种后34天开始生长，接种后714天生长的最好。,生长特性 液体培养基 于靠近液面1处生长最旺盛，呈半透明、
6、云雾状浑浊，以后液体渐变成透明，管底出现沉淀。 固体培养基 形成无色、透明、边缘整齐或不整齐、平贴于琼脂表面的菲薄菌落，大者45mm，小者0.51.0mm。,（三）抵抗力 钩体对环境因素的抵抗力较强，湿土和水中可存活数月之久。故该病主要经污水传播。 对热、酸或碱敏感，5610min，60 10s即可将其致死。 常用浓度的各种消毒剂在1030min内可将其灭活。 对青霉素、金霉素、四环素等抗生素敏感，但对砷制剂有抗性。,（四）抗原 1、型特异性抗原 成分为蛋白质多糖复合物，具有型特异性，是钩体分型的物质基础。 2、群特异性抗原 系类脂多糖复合物，可刺激机体产生补体结合抗体，具有群特异性，可作为分
7、群的依据及补体结合反应抗原，用于检测动物血清中相应的抗体。,（五）分类 本属有2个种 问号钩端螺旋体（L.interrogans） 双曲钩端螺旋体(L.biflera) 前者包括所有寄生性和致病性血清型， 后者包括所有腐生性非致病性血清型。,抗原分类法 根据钩体群特异性抗原应用显微凝集溶解试验，可将其分为若干血清群，各群内可根据其表面抗原的不同，再用型因子血清作显微凝集试验，将每群分为若干血清型。 目前全世界已发现的致病性钩体有25个血清群，至少200个不同的血清型。,对动物致病的主要钩端螺旋体,二、致病性 （一）毒力因子 1、黏附物质 为细胞外基质成分，如纤连蛋白和胶原等。 2、溶血素 是一
8、种鞘磷脂酶C ，能溶解动物红细胞。使动物发生贫血、肝肿大、坏死、出血，伴有黄疽和血尿等病征。 3、内毒素样物质 为脂多糖样物质(LLS)，可致动物发热，引起炎症和坏死。 4、细胞毒性因子 为蛋白毒素，存在于感染动物血浆内，它在血液中循环和蔓延时能造成组织损伤，对小鼠有致死作用。,（二）感染途径及所致疾病 致病性钩体可感染50多种动物和人类，其中鼠类和猪是钩体的主要贮存宿主和传染来源。家畜中牛、羊对钩体最易感，其次为马、猪、犬、水牛和驴等，家禽的易感性较低。,感染途径 钩体在家畜大多数呈隐性感染，在肾脏内长期繁殖，并随尿不断排出，污染土壤和水源等环境。人和家畜则通过直接或间接地接触这些污染源，通
9、过损伤的皮肤、眼鼻粘膜、消化道粘膜而被感染。也可通过动物间相互咬伤、吸血昆虫的叮咬、交配或人工授精而感染。,钩体病的临床表现 急性病例 主要症状为发热、贫血、出血、黄疽、血红素尿及粘膜和皮肤坏死。 亚急性病例 表现为肾炎、肝炎、脑膜炎及产后泌乳缺乏症 慢性病例 表现虹膜睫状体炎、流产、死产及不孕。,钩体病通常经历二个阶段 菌血症(前期发热)阶段 约持续78d 菌尿期(后期无热)阶段 持续23月或更久 在前期阶段，钩体大量出现于血、肝、肾和脑脊髓液中，而后期主要定位于肾内，并经尿排出体外。故检验钩体的病料必须根据病程适时采集。,三、微生物学诊断 （一）细菌学诊断 1、病料 发病78d内（发热期）
10、可采集血、脑脊髓液、肝和肾；发病78d后（退热）可采集尿液，死后为肾。 2、镜检 肝、肾直接涂片；血、尿先离心，用沉淀物涂片。经改良镀银法染色后镜检，钩体呈深黑色或灰色。,3、分离培养 接种柯氏培养基分离。病料中含钩体，常在培养710d后见培养基略呈混浊。对光轻摇试管时，便见上13的培养基内有云雾状生长物。此时挑取培养物作暗视野检查，可见多量的典型钩体。,4、动物试验 病料经腹腔或皮下接种幼龄豚鼠、地鼠或仔兔。强毒株常在35d引起发热、贫血、黄疸、血红素尿等症状。,（二）血清学检查 常用凝集溶解试验。 此外，也可用补体结合试验、ELISA以 及PCR技术等。,四、免疫 康复动物可获得较坚实的免疫力。 注射疫苗，有良好的免疫预防效果。初次免疫 2d后，应进行再次接种，以后可每年接种1次。 所用疫苗应与引起发病的菌株同型，或使用多 价疫苗。 母牛免疫接种后产下的犊牛，可获得较高的母 源抗体，在出生后数月内不受感染。故这些犊 牛须在3月龄后才能接种疫苗。,第四节 其他致病性螺旋体,
