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1、sebia 毛细管电泳,汪浩,sebia 公司介绍,100 % focused on electrophoresis since its creation in 1967. One of the world market leader, number one in Europe. 179 employees in France and more than 300 all over the world. International presence: 8 subsidiaries and a wide network of distributors established in 80 count
2、ries. More thant 80 % of the revenues are due to export. A large part of the annual budget is dedicated to research and development resulting in a continuous stream of new and innovative electrophoresis product introductions.,CAPILLARYS 2/检测项目,back,3.毛细管电泳基本分离原理,毛细管的两端分别浸在含有电解质的储液槽中，管内也充满同样的电解质,其中一端
3、与检测器相连.当样品被引入后,便开始施加电压，样品中各组分向检测器方向移动,溶质的迁移时间为:,tm = Lt2/UV,Lt-有效长度 V-施加电压 U-溶质总流速 Ue-电泳速度 Ueo-电渗流速度,U = Ue/Ueo,其中，,可见，在毛细管长度一定，某时刻电压 相同的条件下，迁移时间决定于电泳速度Ue和电渗流速度Ueo,而两者均随组分的不同荷质比而异;所以，基于荷质比的差异就可以实现组分的分离。,CE优点,柱效高，可达105106/m 分离速度快，几十秒几十分钟 溶剂和试样消耗极少 没有高压泵，仪器成本比HPLC更低 选择性强,毛细管与HPLC区别,CE和高效液相色谱法(HPLC)相比,
4、其相同处在于都是高效分离技术,仪器操作均可自动化,且二者均有多种不同分离模式。二者之间的差异在于：CE用迁移时间取代HPLC中的保留时间,CE的分析时间通常不超过30min,比HPLC速度快；对CE而言,从理论上推得其理论塔板高度和溶质的扩散系数成正比,对扩散系数小的生物大分子而言,其柱效就要比HPLC高得多；CE所需样品为nl级,最低可达270fl,流动相用量也只需几毫升,而HPLC所需样品为l级,流动相则需几百毫升乃至更多；但CE仅能实现微量制备,而HPLC可作常量制备。,在外电场驱动下产生的电渗流为平流，即塞式流形。液体流动速度除在管壁附近因摩擦力迅速减小到零以外，其余部分几乎处处相等。
5、这一点和HPLC中靠泵驱动的流动相的流形完全不同。,4.电渗流的流形,3. 电解质溶液性质的影响,（1）溶液pH的影响 对于石英毛细管，溶液pH增高时，表面电离多，电荷密度增加，管壁zeta电势增大，电渗流增大，pH=7，达到最大； pH3，完全被氢离子中和，表面电中性，电渗流为零。分析时，采用缓冲溶液来保持pH稳定。 （2）缓冲液阴离子的影响 在其他条件相同，浓度相同而阴离子不同时，毛细管中的电流有较大差别，产生的焦耳热不同。,5. 添加剂的影响,（1）加入浓度较大的中性盐，如K2SO4，溶液离子强度增大，电渗流减小。,（2）加入表面活性剂，可改变电渗流的大小和方向 某些阳离子表面活性剂使电渗流减小，某些阴离子表面活性剂，如十二烷基硫酸钠（SDS），可以使壁表面负电荷增加，电渗流增大 （3）加入有机溶剂如甲醇、乙腈，使溶液的粘度减小，电渗流增大。,三、HPCE中影响电渗流的因素,1.电场强度的影响 电渗流速度和电场强度成正比，当毛细管长度一定时，电渗流速度正比于工作电压。,2.毛细管材料的影响,酸度影响毛细管的表面Si-OH基的电离，特别是在pH47范围内，影响更显著，此时溶液pH值与EOF成近线性关系,缺点,不是新技术是新产品 速度38个/小时 变异体 各有所长 8通道 各个不同需要,浪费试剂 维护成本,
