血液样本采集和血涂片制备汇总.

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1、血液样本采集和血涂片制备1、 抽血时针栓只能外抽,不能内推,以免静脉内注入空气形成气栓,造成严重后果。2、 属于酸性染料的是:伊红属于酸性染料,通常为钠盐,有色部分为阴离子。3、 疟原虫检查常用的染色方法是 :吉姆萨染液对细胞核、寄生虫(如疟原虫等)找色较好,结构更清晰,但对细胞质的着色能力略差。4、 手工推片法,推片与载玻片的夹角为2530。5、 血液黏度与血细胞比容和血浆黏度有关,其中,血浆黏度受血浆中纤维蛋白原、球蛋白等大分子蛋白质的影响,它们的浓度越高,血浆黏度越高。6、 涂片瑞氏染色时,缓冲液常用的pH为6.46.8。 7、 瑞氏染料是由酸性染料伊红和碱性染料亚甲蓝(又名美蓝)组成。

2、染色原理既有物理的吸附作用,又有化学的亲和作用。血红蛋白、嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染伊红结合,染粉红色;细胞核蛋白、淋巴细胞、嗜碱性粒细胞胞质为酸性,与碱性染料亚甲蓝或天青结合,染紫蓝色或蓝色;中性颗粒呈等电状态与伊红和亚甲蓝均可结合,染淡紫红色;原始红细胞、早幼红细胞胞质、核仁含较多酸性物质,染成较浓厚的蓝色;中幼红细胞既含酸性物质,又含碱性物质,染成红蓝色或灰红色;完全成熟红细胞,酸性物质彻底消失后,染成粉红色。瑞氏染色法是最经典、最常用染色法。 8、 瑞氏染料亚甲蓝容易氧化为一二三甲基硫堇等次级染料(即天青)。将适量伊红、亚甲蓝溶解在甲醇中,即为瑞氏染料,由酸性染料伊红(E)和碱性

3、染料亚甲蓝(M)组成。液磷酸盐缓冲液pH为6.46.8。在偏碱性环境中负电荷增多,易与亚甲蓝结合,所有细胞呈灰蓝色,颗粒呈深暗,嗜酸 颗粒呈暗褐,甚至棕黑色,中性颗粒偏粗,呈紫黑色。 9、细胞各种成分均属蛋白质,由于蛋白质系两性电解质,所带电荷随溶液pH而定,在偏酸环境中正电荷增多易与伊红结合染色偏红;在偏碱环境中负电荷增多易与亚甲蓝或天青结合偏蓝。因此,细胞染色对氢离子浓度十分敏感,所以在瑞氏染色中缓冲液起到恒定pH作用。 10、 染色原理:既有物理的吸附作用,又有化学的亲和作用。各种细胞成分化学性质不同,对各种染料的亲和力也不一样。 11、血清与血浆的差别是:血清中缺少某些凝血因子,如凝血

4、因子(纤维蛋白原)、凝血因子(凝血酶原)、凝血因子、凝血因子等。 12、正常成人血量约为(7010ml)/kg体重,成人45L,占体重的6%8%,其中血浆占55%,血细胞占45%。 13、全血由血细胞和血浆组成;血浆为全血除去血细胞部分,除钙离子外,含有其他全部凝血因子;血清是离体后的血液自然凝固后析出的液体部分,除纤维蛋白原等凝血因子在凝血时消耗外,其他成分与血浆基本相同。 14、涂片瑞氏染色时,缓冲液常用的pH为6.46.8。15、很多因素影响血涂片时血膜的厚度,血滴大、血黏度高、推片角度大、速度快则血膜厚,反之则血膜薄。16、引起血涂片分布不均的主要原因有:推片边缘不整齐,用力不均匀,载

5、片不清洁。17、疟原虫、微丝蚴检查,采用厚血膜涂片法。18、红细胞沉降率测定时,抗凝剂与血液的比例为1:4。 19、肝素能加强凝血酶灭活丝氨酸蛋白酶,从而阻止凝血酶形成。过量肝素可引起白细胞聚集合血小板减少,均不适合白细胞分类和血小板计数,更不适用于止血学检验,但是红细胞渗透脆性试验的理想抗凝剂。每毫升血液的肝素用量为10.012.5IU,多为肝素钠盐或钾盐20、血液由血细胞和血浆组成,将抗凝的全血离心后除去血细胞成分即为血浆。21、双草酸盐抗凝剂可用于血细胞比容、CBC、网织红细胞计数等项目检查,但其可使血小板聚集,影响白细胞形态,不适用于血小板计数、白细胞分类计数。 22、枸橼酸盐:常用有

6、枸橼酸钠,能与血液中钙离子结合形成螯合物,阻止血液凝固。23、肝素:加强抗凝血酶(AT)灭活丝氨酸蛋白酶作用,阻止凝血酶的形成,并阻止血小板聚集等作用,从而阻止血液凝固。 24、血液常规分析所用的抗凝剂 :EDTA-K2。临床上常用的抗凝剂有:枸橼酸盐,可与钙离子形成可溶性螯合物,从而阻止血液凝固,常用于凝血象和红细胞沉降率的测定;草酸盐,可与钙离子生成草酸钙沉淀,从而阻止血液凝固,常用于凝血象检查;双草抗凝剂,适用于血细胞比容、血细胞计数、网织红细胞计数等检查,不适用于血小板计数和白细胞分类计数;肝素,是红细胞渗透脆性试验的理想抗凝剂,但不适用于细胞形态学检查和全血细胞计数;乙二胺四乙酸ED

7、TA盐,可与钙离子形成螯合物,使钙离子失去凝血作用,阻止血液凝固,适用于全血细胞计数,不适用于凝血检查、血小板功能试验。24、EDTA抗凝剂对血细胞形态、血小板计数影响很小,适用于血液学检查,尤其是血小板计数。 25、纤维蛋白原国际命名为凝血因子,是血浆的成分之一。 26、抗凝血标本采集后保存的最佳温度为4左右,通常室温(22左右)放置的待测血标本应在采集后8h内测定完毕;如果室温大于32,血标本采集后应在4h内完成检测。27、皮肤采血法又称毛细血管采血法。耳垂采血痛感较轻,但血液循环较差,受气温影响较大,检查结果不够恒定(如红细胞、白细胞、血红蛋白和血细胞比容等测定结果比手指血或静脉血高),

8、一般情况下不宜使用。手指采血检查结果比较恒定,世界卫生组织(WHO)推荐采集左手无名指指端内侧血液。 28、毛细血管采血法如血液不易流出,可于伤口远端稍加压力或重新穿刺,切勿用力挤压,以免造成组织液混入,影响结果的准确性。29、皮肤采血多选择手指或耳垂采血部位采血。耳垂血的红细胞、白细胞、血红蛋白和血细胞比容的测定结果均比手指血或静脉血高,一般情况下不宜使用。手指采血操作方便,可获较多血量,检查结果比较恒定。 30、静脉采血法根据采血量可选用不同型号注射器,配备相应的针头。某些特殊检查,为避免血小板激活,要使用塑料注射器和硅化处理后的试管或塑料试管。 31、EDTA-K2适用于全血细胞分析,护

9、士把血常规中的血液倒入生化管中也一并把EDTA-K2抗凝剂倒入管中,使K+升高。 32、皮肤采血法,曾长期被称为毛细血管采血法,所采之血实质是微动脉血、微静脉和毛细血管的混合血,含有细胞间质和细胞内液。33、婴幼儿手指太小,可从大趾或足跟采血。34、位于体表的浅静脉几乎均可作为采血部位,通常采用肘部静脉;如肘部静脉不明显时,可改用手背静脉或内踝静脉,必要时也可从股静脉采血。 35、抽血完毕,取下注射器针头,将血液沿试管壁缓缓注入抗凝管中,防止溶血和泡沫产生。36、血涂片在用光学显微镜观察前需要固定和染色。固定是将细胞蛋白质和多糖等成分迅速交联凝固,以保持细胞原有形态结构不发生变化。染色是使细胞

10、的主要结构,如细胞膜、细胞质、细胞核等染上不同的颜色,以便于镜下观察识别。血涂片染色方法大多源自罗氏染色法,常用瑞氏染色法、姬姆萨染色法。 37结核杆菌抗酸染色时因菌体含有大量脂类而不易着色,无论是否经碘液处理,着色后均不易被盐酸乙醇脱色,所以使菌体呈红色。 38、嗜碱性点彩红细胞染色是用50g/L碱性亚甲蓝液染色12min,用水冲洗后晾干。39、网织红细胞计数的普通光学显微镜法原理:经体外活体染色,网织红细胞内RNA的磷酸基带有负电荷,能与新亚甲蓝、煌焦油蓝、中性红等碱性染料带正电荷的有色反应基团结合,使RNA胶体间电荷减少,分子间斥力下降失去分散力,形成核酸与碱性染料复合物的多聚体,呈深染

11、的颗粒状或网状结构。凡含两个以上的深染颗粒或具有线网状结构的无核红细胞,即为网织红细胞。 40、血液黏度与血细胞比容和血浆黏度有关,其中,血浆黏度受血浆中纤维蛋白原、球蛋白等大分子蛋白质的影响,它们的浓度越高,血浆黏度越高。 41、清蛋白具有维持血浆胶体渗透压和缓冲血液酸碱的能力。 42、EDTA-K2抗凝剂用于: 血小板计数、43、44、45、46、正确:47、。48、49、抗凝剂正确的是:50、瑞氏染液正确的是:51、双草酸盐抗凝剂正确:52、53、54、55、52、5354、55、56、5758、6061、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、

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