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1、密环菌的栽培技术（一）菌种分离与培养菌种来源从我国各地培育蜜环菌情况看，对菌种来源可分为三类：一是采取野生菌种；二是从外地单位引入菌种，再进行扩大培养；三是纯菌种分离和培养。但以纯菌索粗壮、生长快、发射荧光强、抗逆性好，适应性强的蜜环菌作为菌种。纯菌种的分离和培养菌种组织分离与培养（母种）配方一马铃薯（去皮）克 ; 葡萄糖克 ; 琼脂克 ; 水毫升配制方法：将马铃薯切成小块放入锅内，加水 1000 毫升，煮沸分钟，用纱布过滤，补水到 1000 毫升 , 放入切碎的琼脂和葡萄糖，加温溶解后，值自然，将培养基分装三角烧瓶内或分装于试管中，灭菌、放斜面、冷却接种培养等，与其它食用菌的培养基配制及制种
2、方法均相同。配方二麦麸克；葡萄糖克；琼脂克；水毫升配制方法：麦麸加水毫升煮微分钟，用双层纱布过滤，滤液补水至毫升，放入琼脂，加热溶解后，再加葡萄糖煮至全溶，值自然。然后分装试管或三角烧瓶，再高压灭菌，放斜面、冷却、接种、培养，即获得母种。如果是药用，只培养蜜环菌丝体，也就是进行一级扩大培养和二级扩大培养。一级扩大培养用斜面纯菌种接种在一级种子培养液中，在一定的条件下进行一级扩大培养。（）一号种子培养液配方：葡萄糖克；磷酸二氢钾克；磷酸氢二钾克；硫酸镁克；黄豆饼粉或花生饼粉克；酵母粉或麦芽克一克维生素 毫克；马铃薯汁毫升配制后调值到，分装于毫升的三角瓶内，每瓶装毫升，高压灭菌，备用。（）二号种子
3、培养液配方：马铃薯（去皮）克；葡萄糖克；硫酸镁克；磷酸二氢钾 . 克，蛋白胨克；维生素1 毫克，清水毫升培养液培养后，值自然，分装于毫升三角烧瓶中，每瓶装毫升，高压灭菌，备用。（）三号种子培养液配方：麦麸克；葡萄糖克；硫酸镁克；磷酸二氢钾 . 克，蛋白胨克，清水毫升配制方法：先将麦麸水煮分钟，用纱布过滤，补水至毫升，再将其经配料加入滤液中溶解，值自然，分装于毫升的三角烧瓶内，每瓶装毫升，高压灭菌，备用。接种方法：在无菌条件下用接种钩将斜面菌种打碎，然后转移到培养瓶内。装量毫升的培养瓶可转移一个斜面的菌种，装量为毫升的瓶，可转移斜面的菌种。接种后用层纱布夹回层无菌棉塞瓶口。接种完毕要扎紧瓶口，置
4、室温度的摇床上进行振荡培养。培养天一天后，可见培养液发出荧光，天一天培养液呈米黄色，荧光增加，轻摇培养瓶时，液面布满荧光点，天一天后荧光逐渐减弱。如果发现培养液的荧光突然消失，并出现大量泡沫，就表明已被杂菌污染，应立即淘汰。培养液的荧光最强时，菌丝生长繁殖最旺盛，应停止培养，即为一级种子。优质的一级种子液粘稠，呈米黄色，或象米粥。菌液中长有黄豆粒大小的菌球体，如培养时间过长，菌液老化，菌球体则变为中空、表面光滑的球体，但这种菌液仍能发微弱荧光。被污染的菌液，有时也有光滑的小球体，但不发荧光。二级扩大培养为大量培养纯菌种，或大量培养药用的蜜环菌丝体，可在毫升一毫升的大烧瓶中进行二级扩大培养，也可
5、利用发酵罐进行培养，因此，也叫发酵培养。（）一号发酵培养液配方：葡萄糖克；酵母粉克；磷酸二氢钾克；硫酸镁克；麦麸克；维生素 1 毫克；马铃薯汁 1000 毫升培养液配制后，植调至，分装，高压灭菌，备用。（）二号发酵培养液配方：葡萄糖；白蔗糖；磷酸二氢钾；硫酸镁；黄豆饼粉；花生饼粉配制后 P 值自然，分装，高压灭菌，备用。接种时，要严格按无菌制作的程序进行。用移液管将菌种接入一级种子液，在度条件下培养天一天5 种子液培养条件（）一级种子温度度，在旋转式摇床上培养天一天，偏心距为厘米一厘米，转速次分钟。（）二级种子温度度，在往复式床上培养小时一 96 小时，冲程为厘米，转速为 90 次分钟。（）发
6、酵罐温度度，容量为立升的，投料立升，搅拌速度为 200 转分钟，通气量为： 0 ： 0 ，培养小时。用乙醇提取，再浓缩，将提取物人药。二级团体扩大培养为了利用蜜环菌伴栽天麻，可将蜜环菌采用固体扩大培养，它比液体培养效果好。二级固体菌种培养基（即原种培养基）配方（）：杂木屑或玉米芯粉；玉米粉；麦新；蔗糖；。配制方法：清水拌料，含水量，装瓶或装袋，灭菌，冷却后接种，在度条件下培养天一天，即成二级固体菌种。配方（）：杂木屑；玉米轴粉；麦麸；蔗糖；骨粉；石膏粉清水拌料，含水量，装瓶或装袋，灭菌，冷却后接种（方法同于一般食用菌），在度条件下培养天，菌丝长满培养基，即为二级固体菌种。（二）扩大生产菌材和基
7、础培养料的选择（）菌材的选择凡是阔叶树种（松杉木不能用）都可以用来培养蜜环菌，也可作为培养天麻的菌材。未接菌的木棒或树枝，统称为菌材。把木棒接植蜜环菌，长出菌索，带有菌索的木棒称为菌棒。菌棒一般直径厘米一厘米，主要用于培养天麻。如果在厘米一厘米粗的树枝上接种蜜环菌，树枝上长出菌素，这样的树枝称为菌技，是培养天麻的补充材料。（）基础培养料的选择基础培养料是蜜环菌和天麻生长发育繁殖所必需的基本物质条件。基础培养料的优劣将直接影响蜜环菌丝和天麻生长发育的质量，所以，一定要选择透气性能良好，有机质丰富，并疏松、易于渗水和保温，酸碱度适宜的培养料，基础培养料的配制方法如下：天然腐殖土：即山林中的腐殖土，
8、土质疏松，团粒结构良，含有丰富的有机营养和无机盐类，透气和保水性能强，是较理想的基础培养料。半腐熟落叶加沙：晚秋收集阔叶树落叶，加适量水，堆坑封盖腐熟。来年春将树叶取出加小米大小的砂子。树叶和砂子的比例为：，作为基础培养料。这种培养料体轻、疏松、营养丰富。沙质土壤：土壤疏松、透气性和渗水性良好。木屑加砂：选择阔叶树的粗锯末加干净的粗细混合砂。砂粒象高梁粒大小，事先将砂粒用清水洗净再用，木屑和砂的比例为：或：。稻壳加砂：用新鲜的稻壳加干净的小米大小或高梁粒大小的砂子，稻壳和砂的比例为：。培养菌棒和菌枝为栽天麻时有充足的优质菌棒和菌枝，必须选择适当的培菌时间。最好在月份开始培养菌棒、菌枝（气温在度
9、，湿度在为宜）。月中旬可以进行一次扩大培养，月份开始栽天麻。也可在月份开始在室内培养。此时室内自然温度在度以下，菌棒、菌枝发菌较慢，但菌丝生命力强，菌索健壮。用这种菌棒、菌技在第二年月份栽天麻，其效果良好。培养菌棒和菌枝的方法相同，可以同时进行。接种时可采用打孔接种法，先将木棒和树枝截成段，再用打孔器打孔（每隔约厘米一厘米打一个孔），象黑木耳段木栽培法那样，向孔内接菌种，进行培养。也可以采用砍鱼鳞口接种法，将菌材截成厘米一 60 厘米长的段，用刀每隔厘米一厘米砍一个鱼鳞口，深度以露出木质部厘米为宜。培养方法：可以采用坑培法。半坑式培养法、地面砌池培养法等多种形式，但其培菌方法是相同的。下坑（池）培养时，先向坑（池）底层铺一层基础培养料，再放一层菌棒、菌技，向接种孔或鱼鳞口内塞满蜜环菌原种菌种，再撒上薄薄一层原种菌种，再铺上一层培养料。第二层直到第五、六层，方法与第一层相同。如果不用菌种，也可用切碎的带菌索的段木，放在菌棒、菌枝旁边，也能起到菌种扩大培养作用，也可用伴栽天麻的旧菇木和新菌材穿插排放，最上层同样铺上厘米厚的基础培养料，浇透水（土壤含水量左右），再用土封顶。在度条件下，个月左右，即长好蜜环菌菌索。这时可将菌棒、菌枝挖出，用作伴栽天麻和专一培养蜜环菌子实体食用。（三）蜜环菌的利用常食蜜环菌于实体（菇），能治疗夜盲症，促进眼明，还能医治人体皮肤干燥等症。
