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1、精品课程建设精品课程建设基础医学院组胚教研室基础医学院组胚教研室 李银生李银生 电话：电话：电话：电话：0373-30291260373-3029126手机：手机：手机：手机： 组织学与胚胎学组织学与胚胎学 Histology and Embryology 组织学与胚胎学组织学与胚胎学开设方式v理论课48学时，每周4学时。v实验课20学时，第12教学周开始。 请关注教学进度,第16教学周结束。精品课程建设精品课程建设Introduction of Histology 组织学与胚胎学组织学与胚胎学组织学绪论组织学绪论组织学与胚胎学组织学与胚胎学内容简介内容简介组织学的内容组织学的意义组织学技术简
2、介组织学的学习方法组织学与胚胎学组织学与胚胎学一、一、组织学的内容 组织学（histology）是研究机体微细结构及其相关功能的科学。借助显微镜显微解剖学结构功能组织学与胚胎学组织学与胚胎学二、组织学意义二、组织学意义v结构是功能的基础，组织学的发展促进生理学的进步，为生理学的学习打下良好基础。v疾病的判断必须以正常为参照，良好的组织学知识为病理学的学习打下基础。 组织学与胚胎学组织学与胚胎学三、组织学技术简介三、组织学技术简介光镜技术电镜技术组织化学术 一般组织化学术 免疫组织化学术 原位杂交术放射性自显影术图像分析术 体视学组织培养术和组织工程显示光电镜结构的方法显示化学成分的方法离体组织
3、制备离体组织制备组织定量技术活体组织研究活体组织研究 组织学与胚胎学组织学与胚胎学（一）离体标本制备（一）离体标本制备 1.1.光电镜技术光电镜技术离体标本缺陷 变腐 柔软 大块 无色变硬冰冻涂 铺 磨 切5-10微米50-80纳米染色化成包埋石蜡树脂透射电镜冷冻蚀刻复型冷冻断裂扫描电镜表面适应观察对策结构染料重金属盐 固定光学显微镜 甲醛电子显微镜 戊二醛锇酸组织学与胚胎学组织学与胚胎学2 2.组织化学术（histochemistry） 显示化学成分显示化学成分 （1）一般组织化学 在组织切片上加某种试剂，和组织中的待检物发生化学反应，借助观察最终产物，对待检物定位的方法。 有色沉淀 光镜观
4、察 最终产物 重金属盐 电镜观察组织学与胚胎学组织学与胚胎学 （2）免疫组织化学（immunohistochemistry） 利用抗原和抗体结合的原理，用标记的 抗体检测组织中肽和蛋白质的技术。 抗体的标记物荧光素辣根过氧化物酶 胶体金光镜或电镜荧光显微镜电镜 组织学与胚胎学组织学与胚胎学免疫组织化学（荧光素标记）组织学与胚胎学组织学与胚胎学 免疫组织化学（辣根过氧化物酶标记）组织学与胚胎学组织学与胚胎学免疫组织化学电镜像 （A 胶体金标记 B 辣根过氧化物酶标记）组织学与胚胎学组织学与胚胎学 （3）原位杂交术（in situ hybridization) 用带有标记物的已知碱基顺序的核酸探针
5、,与细胞内待检的核酸按碱基配对的原则进行特异性结合,即杂交,然后通过对标记物的显示和检测,而获知待测核酸的有无及相对量的方法。 碱基的标记物 放射性核素 放射自显影 （涂感光乳胶、暗处曝光 、显影、定影） 地高辛 免疫组织化学术 银粒所在组织学与胚胎学组织学与胚胎学原位杂交组织学与胚胎学组织学与胚胎学3.3.组织定量技术组织定量技术v显微分光光度术 通过测定组织化学术中最终显示物的强度，获得定量信息的技术。v图像分析术（image analysis） 又称形态计量术，是应用数学和统计学原理对组织切片提供的平面图像进行分析，从而获得立体状态组织和细胞内各有形成分的数量、体积和表面积等参数的技术。
6、v体视学（stereology） 从组织平面图像，研究三维立体结构的学科。组织学与胚胎学组织学与胚胎学图像分析仪组织学与胚胎学组织学与胚胎学 计算机三维重建组织学与胚胎学组织学与胚胎学（二）活体组织的研究（二）活体组织的研究 1.放射自显影术（autoradiography） 利用放射性核素的可观察和显示性，研究放射性物质在组织或细胞内消长分布的变化来显示细胞的功能状态或该物质在组织和细胞内的代谢过程的方法。 将放射性核素或放射性核素标记的物质注入体内，有规律地间断取材、制片，放射性自显影，光镜或电镜观察。 组织学与胚胎学组织学与胚胎学放射自显影像(3H-TdR3H-TdR掺入掺入)组织学与胚
7、胎学组织学与胚胎学 2.细胞培养术（cell culture） 把机体细胞在体外模拟体内的条件下进行培养的技术。不仅可用于研究其代谢、增殖、分化、形态和功能变化，还可研究各种理化因子对活细胞的直接影响。 组织培养术、器官培养术 in vitro 原代培养 传代培养 细胞系（cell line） 细胞株（cell strain） 组织学与胚胎学组织学与胚胎学 培养细胞的倒置显微镜图像组织学与胚胎学组织学与胚胎学培养细胞的倒置相差显微镜图像组织学与胚胎学组织学与胚胎学 3.组织工程（tissue engineering） 用细胞培养术在体外模拟构建机体组织或器官的技术。实验中的组织工程耳组织学与胚
8、胎学组织学与胚胎学四、组织学的学习方法四、组织学的学习方法v基本知识相互联系、相互对比、分析记忆v用已有的知识去理解记忆新知识v结构和功能的联系v结构的直观化充分发挥观察能力 借助插图、照片和图谱等，理解记忆结构v立体和切面的关系组织学与胚胎学组织学与胚胎学立体与切面的关系典型结构：能反映立体结构特征的切面。组织学与胚胎学组织学与胚胎学教学参考资料教学参考资料v图谱 彩色、 黑白、电镜结构v教科书 1-8版本、专科教材等v专著 组织学1-2版v练习题授课教师e-mail 教研室网址 http:/ 用户名和密码均为您的学号 首次登陆后应修改您的密码v组织学与胚胎学v课堂讲授课件项v所需学习课件v
9、在线浏览v范围：本人所教授的各班同学组织学与胚胎学组织学与胚胎学一、研究内容 二、学习组织学的意义 三、组织学技术简介四、组织学学习方法小结组织学与胚胎学组织学与胚胎学离体组织的制备离体组织的制备 光电镜技术 显示化学成分的方法 组织定量技术 显微分光光度术 图像分析术 体视学 活体组织的研究活体组织的研究 放射性自显影术 细胞培养术 组织工程光镜技术电镜技术组织化学术 一般组织化学术 免疫组织化学术 原位杂交术图像分析术 放射性自显影术细胞培养术和组织工程组织学与胚胎学组织学与胚胎学思考题思考题v组织标本制备中，离体组织的缺陷和克服对策是什么？v显示组织结构和化学成分的染色方法的异同？v用什
10、么技术可以在扫描电镜下看组织内部结构？v用什么技术可以在透射电镜下看组织内部的立体状态？ 组织学与胚胎学组织学与胚胎学下次课程内容下次课程内容上皮组织精品课程建设精品课程建设 组织学与胚胎学组织学与胚胎学组织学绪论组织学与胚胎学组织学与胚胎学（一）显微镜（一）显微镜v光学显微镜光学显微镜 （light microscopelight microscope，LMLM）v电子显微镜电子显微镜 （electron electron microscopemicroscope，EMEM）样品组织学与胚胎学组织学与胚胎学普通光学显微镜组织学与胚胎学组织学与胚胎学荧光显微镜组织学与胚胎学组织学与胚胎学相差显
11、微镜组织学与胚胎学组织学与胚胎学透射电镜扫描电镜组织学与胚胎学组织学与胚胎学光学显微镜（light microscope） 普通显微镜 荧光显微镜 相差显微镜电子显微镜（electron microscope） 透射电子显微镜（transmission EM） 扫描电子显微镜 （scanning EM）（一）显微镜组织学与胚胎学组织学与胚胎学1mm=103m=106nm光镜所见放大数以千计电镜所见放大数以万计 显微镜不同，所见结构大小不一种类 结构 分辨率 度量单位光学 光镜结构 0.2m m （light structure） 电子 超微结构 0.2nm nm （ ultrastructur
12、e） 组织学与胚胎学组织学与胚胎学（二）结构（二）结构v分子分子 v亚细胞亚细胞v细胞细胞 v组织组织 v器官器官 v系统系统生物大分子包括核酸、蛋白质、多糖和脂细胞器等超微结构细胞质、细胞核等上皮、结缔、肌组织和神经组织肝、胃等消化系统、呼吸系统等生物学解剖学组织学细胞外基质细胞外基质细胞细胞组织学与胚胎学组织学与胚胎学光镜标本制作程序 石蜡包埋切片技术组织学与胚胎学组织学与胚胎学透射电镜标本制作组织学与胚胎学组织学与胚胎学显示光镜结构的常用染色法v苏木精-伊红染色 (hematoxylin-eosin staining),简称HE染色 染料 组织 名称 化学性质 色彩 化学性质 嗜好 着色
13、部位 苏木精 碱 蓝 酸 嗜碱性 细胞核 大量核糖体 伊红 酸 红 碱 嗜酸性 大部分成分v特殊染色 如硝酸银、甲苯胺蓝、醛复红等v活体染色 台盼蓝活体注射组织学与胚胎学组织学与胚胎学电子显微镜染色用重金属盐 重金属盐 醋酸铀和柠檬酸铅电子显微镜染色结果黑白图象电子密度高电子密度低电镜结构图组织学与胚胎学组织学与胚胎学透射电镜结构图组织学与胚胎学组织学与胚胎学扫描电镜结构图组织学与胚胎学组织学与胚胎学冷冻断裂技术原理冷冻断裂扫描电镜图组织学与胚胎学组织学与胚胎学冷冻蚀刻复型技术原理冷冻蚀刻复型透射电镜图组织学与胚胎学组织学与胚胎学HE染色法组织学与胚胎学组织学与胚胎学银染法组织学与胚胎学组织学与胚胎学甲苯胺蓝染色组织学与胚胎学组织学与胚胎学醛复红染色，台盼蓝活体染色组织学与胚胎学组织学与胚胎学糖类糖类PASPAS反应反应过碘酸(Periodic acid )Schiff 试剂PAS反应即过碘酸希夫反应组织学与胚胎学组织学与胚胎学肝糖原小肠粘原颗粒组织学与胚胎学组织学与胚胎学脂类脂类苏丹染色苏丹染色脂肪组织组织学与胚胎学组织学与胚胎学组织学与胚胎学组织学与胚胎学组织学与胚胎学组织学与胚胎学组织学与胚胎学组织学与胚胎学组织学与胚胎学组织学与胚胎学组织学与胚胎学组织学与胚胎学组织学与胚胎学组织学与胚胎学组织学与胚胎学组织学与胚胎学组织学与胚胎学组织学与胚胎学组织学与胚胎学组织学与胚胎学
