第二章血液一般检验第二章血液一般检验 BLOOD ROUTINE TEST 第一节第一节 红细胞检查(二)红细胞检查(二)定义定义: 嗜碱性点彩红细胞嗜碱性点彩红细胞(basophilicstipplingcell)是不完全成熟的红是不完全成熟的红细胞胞质内残存的核酸变性、聚集形成颗粒,经碱性染料细胞胞质内残存的核酸变性、聚集形成颗粒,经碱性染料(如如美蓝美蓝)染色后,细胞内可见到深染的颗粒;若以瑞氏染色,则染色后,细胞内可见到深染的颗粒;若以瑞氏染色,则在粉红色的胞质中见到在粉红色的胞质中见到大小,形状不一大小,形状不一紫红色或蓝黑色颗粒,紫红色或蓝黑色颗粒,故名嗜碱性点彩红细胞故名嗜碱性点彩红细胞嗜碱性点彩红细胞计数嗜碱性点彩红细胞计数 [检测原理检测原理] 点点彩彩红红细细胞胞计计数数(basiphilic stippling count),,用用碱碱性性美美蓝蓝液液作作血血涂涂片片染染色色,,红红细细胞胞呈呈淡淡蓝蓝绿绿色色,,颗颗粒粒显显深深蓝蓝色色;;用用瑞瑞氏氏染染色色,,颗粒呈蓝黑色颗粒呈蓝黑色通通常常在在油油镜镜下下计计数数1 000个个红红细细胞胞中中的的点点彩彩红细胞数,换算成百分率。
红细胞数,换算成百分率 [方法学评价方法学评价] 点点彩彩红红细细胞胞计计数数操操作作目目前前仍仍用用显显微微镜镜血血涂涂片片染染色色的的传传统统检检查查法法必必要要时时可可扩扩大大红红细细胞胞计计数数的的数数量量例例如如,,先先计计数数50个个视视野野中中点点彩彩红红细细胞胞数数,,同同时时计计数数5个个视视野野内内红红细细胞胞总总数数,,再再按按下下式式求求出出点点彩彩红红细细胞胞的百分比的百分比 50个视野中点彩红细胞数个视野中点彩红细胞数点彩红细胞%=点彩红细胞%=———————————— 5个视野内红细胞总数个视野内红细胞总数×10 [质量控制质量控制] 计数时必须选择红细胞分布均匀的区域计数计数时必须选择红细胞分布均匀的区域计数 [参考值参考值] <0.03% [临床意义临床意义] 点彩红细胞计数增高主要见于:点彩红细胞计数增高主要见于:1.中毒患者.中毒患者 如铅、汞、银、铋等金属中毒及硝如铅、汞、银、铋等金属中毒及硝 基苯、苯胺等中毒时,点彩红细胞显著增高。
基苯、苯胺等中毒时,点彩红细胞显著增高 2.各类贫血.各类贫血 如溶血性贫血、巨幼细胞性贫血、如溶血性贫血、巨幼细胞性贫血、 恶性贫血、恶性肿瘤等,此时网织红细恶性贫血、恶性肿瘤等,此时网织红细胞增加胞增加 常表示造血旺盛常表示造血旺盛 网网织织红红细细胞胞(reticulocyte,,Ret)是是晚晚幼幼红红细细胞胞脱脱核核后后到完全成熟红细胞间的过渡细胞,到完全成熟红细胞间的过渡细胞,胞胞质质中中残残存存嗜嗜碱碱性性物物质质核核糖糖核核酸酸(RNA),,经经煌煌焦焦油油蓝蓝等等活活体体染染色色后后,,嗜嗜碱碱性性物物质质凝凝聚聚成成蓝蓝黑黑色色颗颗粒粒,,连连缀缀成线,线连接成网成线,线连接成网属属于于尚尚未未完完全全成成熟熟的的红红细细胞胞(当当嗜嗜碱碱性性物物质质消消耗耗殆殆尽尽后后才被视为成熟红细胞才被视为成熟红细胞),一般为,一般为8~七、网织红细胞计数七、网织红细胞计数 [检测原理检测原理] 1.普通光学显微镜法普通光学显微镜法 活体染色(新亚甲蓝或煌焦油蓝活体染色(新亚甲蓝或煌焦油蓝)的碱性着色基团的碱性着色基团 网织红细胞网织红细胞RNA的磷酸基的磷酸基(带负电荷带负电荷) RNA胶体间的负电荷减少而发生凝缩,胶体间的负电荷减少而发生凝缩, 蓝色的点状、线状或网状结构蓝色的点状、线状或网状结构 ,, 显显微微镜镜下下计计数数1000个个红红细细胞胞中中所所占占的的网网织织红红细细胞胞数数,,以百分比或分数数表示。
以百分比或分数数表示 [检测原理检测原理] 流式细胞仪法流式细胞仪法2.仪器法.仪器法 网织红细胞计数仪网织红细胞计数仪 血液分析仪法血液分析仪法 荧光染料与网织红细胞中荧光染料与网织红细胞中RNA结合,结合, 发出特定颜色的荧光进行发出特定颜色的荧光进行RNA定量定量•精确计数网织红细胞占成熟红细胞的百分数精确计数网织红细胞占成熟红细胞的百分数(Ret%%)•将网织红细胞分成高、中、低荧光强度网织红细胞将网织红细胞分成高、中、低荧光强度网织红细胞 比率比率(HFR 、、MFR、、 LFR)•并计算网织红细胞其他参数并计算网织红细胞其他参数 血液分析仪法血液分析仪法 提供与网织红细胞相关的提供与网织红细胞相关的多个多个参数,参数, 网织红细胞绝对值、网织红细胞绝对值、 网织红细胞百分比、网织红细胞百分比、 网织红细胞平均体积、网织红细胞平均体积、 网织红细胞血红蛋白分布宽度、网织红细胞血红蛋白分布宽度、 网织红细胞血红蛋白浓度、网织红细胞血红蛋白浓度、 网织红细胞平均血红蛋白浓度、网织红细胞平均血红蛋白浓度、 LFR、、MFR、、HFR、、 网织红细胞成熟指数。
网织红细胞成熟指数【【质量保证质量保证】】 以手工计数法为重点以手工计数法为重点 1.染料选择.染料选择 【【质量保证质量保证】】 2.正确辨认网织红细胞.正确辨认网织红细胞 外周血中网织红细胞主要为外周血中网织红细胞主要为Ⅳ型,凡含有型,凡含有2个以上个以上网织颗粒的红细胞均应计为网织红细胞网织颗粒的红细胞均应计为网织红细胞 3.网织红细胞计数方法.网织红细胞计数方法 (1)Miller窥盘:窥盘: (2)显微成像系统:计算机和细胞形态分析软件,显微成像系统:计算机和细胞形态分析软件, ①①HFR:粗颗粒堆积成网状粗颗粒堆积成网状 ②②MFR:粗颗粒在:粗颗粒在10个以上,或细小颗粒超过个以上,或细小颗粒超过15个 ③③LFR:细胞内含:细胞内含15个以下细小颗粒个以下细小颗粒 ①①网织红细胞百分数:网织红细胞百分数: 成人和儿童~成人和儿童~ 新生儿~新生儿~②②网织红细胞绝对数:网织红细胞绝对数: 成人和儿童成人和儿童: (24~~84)X109//L参考值参考值临床意义临床意义1.评价骨髓增生能力,判断贫血类型.评价骨髓增生能力,判断贫血类型。
1)网织红细胞增多:表示骨髓造血功能旺盛,网织红细胞增多:表示骨髓造血功能旺盛, 各种增生性贫血各种增生性贫血 (2)网织红细胞减少:常见于再生障碍性贫血网织红细胞减少:常见于再生障碍性贫血 (3)鉴别贫血:鉴别贫血:临床意义临床意义2.评价疗效.评价疗效 (1)观察贫血疗效观察贫血疗效:贫血随访:贫血随访缺铁贫或巨幼贫有效治疗后,缺铁贫或巨幼贫有效治疗后,2~~3d后后Ret开始上开始上升,升,7~~10d达到最高峰达到最高峰(约约10%%),,2周后渐降至周后渐降至正常 (2)骨髓移植后监测骨髓造血恢复:骨髓移植后监测骨髓造血恢复:骨髓移植后第骨髓移植后第21天,如天,如Ret大于大于15X109//L,常,常表示无移植并发症;表示无移植并发症;若骨髓开始恢复造血功能,首先若骨髓开始恢复造血功能,首先HFR和和MFR上上升,其次为网织红细胞计数值上升升,其次为网织红细胞计数值上升临床意义临床意义3.放疗和化疗的监测.放疗和化疗的监测 •指导临床适时调整治疗方案,避免造成严重的指导临床适时调整治疗方案,避免造成严重的骨髓抑制骨髓抑制•机体接受放、化疗后,如出现骨髓抑制,早期机体接受放、化疗后,如出现骨髓抑制,早期HFR和和MFR降低,而后网织红细胞数值降低;降低,而后网织红细胞数值降低;停止放、化疗,骨髓功能恢复后,这些指标依次停止放、化疗,骨髓功能恢复后,这些指标依次上升。
上升临床意义临床意义。