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1、机能实验学机能实验学肝功能不全的综合实验 肝脏对肾上腺素的灭活作用及高血氨对肝功能不全兔的影响 内 容实验目的1实验步骤2注意事项3实验结果4讨论5实验目的 通过实验熟悉血氨升高对肝功能不全兔肝性脑病发病的影响并掌握其机制,熟悉肝脏的主要生理功能,熟悉测试肝脏对药物灭活作用的基本方法。实验步骤固定与麻醉1(1)取家兔1只称重,将兔取仰卧位固定于兔手术台上; (2)局麻:保持家兔颈部舒展、端正,沿中线剪去颈部腹面正中皮肤上的毛,以35mL的1%普鲁卡因在颈部腹面沿中线皮下进行局部麻醉,麻醉药用量按切口长度1mL/cm; 实验步骤(续) 手术2(1)分离气管,在气管下方留置一根扎底线。 (2)暴露
2、和分离一侧颈总动脉,一侧做动脉插管(见 图);(3)进行气管插管术(见图);动脉插管手法示意气管插管气管插管实验步骤(续) 3连接呼吸和血压记录装置,设置运行操作系统软件;4沿前腹部中线剪毛、用1%的普鲁卡因行皮下局麻,在剑突下沿前腹中线做一长约810cm腹壁切口、打开腹腔;实验步骤气管插管一分叉连接呼吸换能器动脉插管连接血压换能器呼吸和血压记录装置的连接呼吸和血压记录装置的连接实验步骤(续) 5项目观察(1)用肝素化的注射器经三通管自颈总动脉抽取 0.51mL动脉血并抗凝,立即密闭针头,送血 样进一步做血气分析。 (2)按0.2 mL/kg体重的剂量由耳缘静脉注入1:10000 肾上腺素,测
3、定循环时间,并观察血压和呼吸的 变化。 实验步骤(续) 5项目观察(续)(3)待血压和呼吸恢复正常后,从腹腔中找到小肠的 肠系膜,由肠系膜静脉注入上述同等剂量的肾上 腺素以测定循环时间,及时用丝线将出血点结扎 止血,同时观察血压和呼吸等的变化,且与上一 步骤结果进行比较。实验步骤(续) 5项目观察(续)(4)轻轻上提剑突处肋弓的下缘,将肝隔面压向兔尾 侧,找到透明薄膜样的肝-横膈韧带(镰状韧带), 小心剪断此韧带的大部。用一根粗扎底线扎紧肝 脏中叶及右叶(参考图4)的根部。剪去此二叶肝 的一部分,若切面不持续出血表示结扎成功。 Caudate lobeHepatic portal veinCo
4、mmon bile ductRight external lobeQuadrate lobeGallbladderRight middle lobeLeft external lobeLeft middle lobe兔的肝叶解剖位置关系(背面观)实验步骤(续) 5项目观察(续) :(5)用扎底线结扎胃和十二指肠连接处并保留该结扎 线残余段在腹腔外,除靠近剑突处的一段腹壁切 口保持开放外,将腹壁其余大部分开口用血管钳 夹闭以保持腹腔脏器的温度并防止脏器自腹腔内 膨出。 (6)每隔5 min向十二指肠内注入氯化铵混合液10mL, 直至强直性痉挛或角弓反张发作为止。 实验步骤(续) 5项目观察(续)
5、 :(7)用肝素化的注射器经三通管自颈总动脉抽取 0.51mL动脉血并抗凝,立即密闭针头,送血 样进一步做血气分析。 (8)记录用于该兔的氯化铵混合液的总量,并计算每 公斤体重的消耗量。此刻可采取适当措施抢救中 毒家兔。 实验步骤(续) 5项目观察(续) :(9)注意用另一家兔同步做对照实验,除不部分结扎 肝叶外,其他均按上述方法同样操作,也同样每 隔5 min向其十二指肠注入氯化铵混合液,直至家 兔出现强直性痉挛或角弓反张为止,比较肝部分 结扎(或切除)兔和肝脏未经结扎的兔每公斤体重 氯化铵混合液的用量。 注意事项 实验开始前可预先设计一个氨中毒抢救与治疗的方案,并准备相应试剂; 1打开腹腔
6、时注意勿损伤腹腔内脏; 2肠系膜静脉内注药时,进针方向应朝肠系膜根部。 3注意事项(续) 注意实验和对照兔的性别一致,体重差异不超过250 g; 4区分肝叶时动作宜轻柔,剪断镰状韧带时勿损伤横膈和肝脏; 5结扎肝时应靠近肝门有结缔组织处,避免勒断肝脏,否则出血难止。 6实验结果 上述实验结果填入下表 :12先保存微机中记录的全部实验数据,再对图形数据进行编辑、重构,输出重构的曲线、保存并打印。体重体重(kg)氯化铵注射总氯化铵注射总量量 (mL)每公斤体重氯每公斤体重氯化铵注射量化铵注射量 (mL)全身情况全身情况肝部分结扎兔肝部分结扎兔正常兔(未结正常兔(未结扎肝)扎肝)表表1 肝性脑病样发作时肝部分结扎兔与肝未结扎兔氯化铵混合液用量比较肝性脑病样发作时肝部分结扎兔与肝未结扎兔氯化铵混合液用量比较 讨 论 12结合实验现象的描述、家兔呼吸、血压曲线的变化和列表比较的结果,分析实验现象的机制; 分析实验成功失败的经验教训。