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1、第三萹第三萹 高中生物实验高中生物实验实验一实验一 生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定复习目标 1通过对实验结果的分析归纳，理解实验原理 2初步学会鉴定生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的基本方法和某些化学试剂能够使生物组职中的有关有机化合物产生特定的颜色反应命题趋势 本实验中实验基本方法的应用和运用某些化学试剂与生物组织中有关化合物的特定颜色反应来判断化合物是考查的重点多以选择题形式出现。 1实验原理 某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应 可溶性糖中的还原糖斐林试剂砖红色沉淀 脂肪 桔黄色 脂肪苏丹染液 蛋白质 紫色 可以根据
2、与某些化学试剂所产生的颜色反应，鉴定生物组织中 的存在。 2实验目的 初步掌握鉴定生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的基本方法。苏丹染液红色双缩脲试剂糖、脂肪或蛋白质3实验材料的选择 本实验成功的关健在于实验材料的选择好的材料可以提高实验效果。 (1)可溶性还原糖的鉴定；还原糖的含量，生物组织中有无色素的影响实验结果及其观察的最重要因素因此要也可用白色的甘蓝叶、白萝卜替( 经实验比较，颜色反应的明显程度依次为苹果，梨、白色甘蓝叶白萝卜。选用可溶性还原糖含量高、白色或近于白色的植物组织，其中以苹果，梨最好不能选西瓜 (2)脂肪的鉴定：所用材料一要 二要 才能做徒手切片，花生种子符合该实验的要求
3、，将花生种子 ，使其变软，有利于切成薄片；但浸泡时间也不宜过长，否则组织太软，切下的薄片不易成形。 (3)蛋白质的鉴定：一般选用浸泡12d的富含蛋白质的 (便于研磨)或用 。脂肪含量高有一定大小浸泡34h大豆种子鸡蛋清 4. 试剂的配制 (1)斐林试剂的配制： ， 。 (2)苏丹染液：配制后待 后再使用。 (3)双缩脲试剂的配制： 。即配即用甲、乙两种试剂分别配制全部溶解A、B两液分开配制，注明标签5.实验方法与步骤中应注意的事项 (1)在对可溶性还原糖鉴定的过程中，使用的斐林试剂要 (在实验中改用班氏试剂更为简便)。在水浴加热时，试管底部不要触及烧杯底部，以 ；加热时，试管口也不要朝向自己或
4、他人，防止沸腾的溶液冲出试管造成烫伤。 (2)在对脂肪进行鉴定时，切出符合要求的薄切片是实验结果能否满意的关键。要多 (特别注意切片时的安全)。该实验是把化学反应和显微镜观察结合起采的实验，叫显微化学鉴定。 (3)在对蛋白质进行鉴定时，若使用蛋清，必须按要求 。 实验样液要留出一份作为对照，便于最后进行比较。 (4)实验中 ，要牢记不同试剂的鉴定对象。现配现用，混合均匀后一次加入防止试管受热不均匀而爆裂按教材要求练习徒手切片技术稀释各试剂的使用不可弄混6实验结果与讨论 (1)如果注意了材料的选择和实验要求，本实验 会十分明显。 (2)前面提到 ，否则实验难以得到满意结果。这是因为此反应利用的是
5、斐林试剂中的 。而我们知道， ，而 是斐林试剂的改良剂，它利用 ，使之稳定溶解，灵敏度高且可以长期使用，故更为简便。颜色效果斐林试剂要现配现用Cu(OH)2产物为弱氧化剂与还原糖Cu(OH)2是一种沉淀物质，放置过久沉淀过多则不利于反应班氏试剂柠檬酸作为Cu2+的络合剂典例分析 例l 在鉴定可溶性糖的实验中，加入斐林试剂时应 ( ) (A)先加入斐林试剂甲液后加入乙液 (B)先加入斐林试剂乙液，后加入甲液 (C)将斐林试剂的甲液和乙液混合均匀后再加 (D)以上A、B、C三项操作方法都正确 解析：斐林试剂的甲液是氢氧化钠的质量浓度为0.1gmL的溶液；乙液是硫酸铜的质量浓度为0.05gmL的溶液
6、只有将甲液和乙液混合后，才能生成浅蓝色的Cu(OH)2沉淀而可溶性搪(还原糖)就是与Cu(OH)2在加热条件下才能生成砖红色的Cu2O沉淀，起到鉴定可溶性糖的作用。 答案：CC例2 下列可用于脂肪鉴定的实验材料是 ( ) (A)苹果 (B)梨 (C)卵白 (D)花生种子 解析：用于脂肪鉴定的实验材料最好选择富含脂肪的种子，如花生种子：苹果、梨富含可溶性还原糖含脂肪少；卵白含蛋白质多，含脂肪少 说明：对具体的实验选材也是进行实验设计的重要工作，实验材料的选择对实验成功与否影响很大，花生种子是用于脂肪鉴定的最好的实验材料。 例3 花生子叶细胞内的圆形透亮的小颗粒与苏丹染液发生了颜色反应形成 ( )
7、 (A)蓝色 (B)红色 (C)无变化 (D)紫色 解析：花生子叶细胞内的圆形透亮的小颗粒是脂肪颗粒，脂肪被苏丹试剂染成红色DB挑战误区 例 下列关于实验操作步骤的叙述中，正确的是 ( ) (A)用于鉴定可溶性还原糖的斐林试剂甲液和乙液，可直接用于蛋白质的鉴定 (B)脂肪的鉴定实验中需要用显微镜才能看到被染成桔黄色的脂肪漓 (C)鉴定可溶性还原糖时，要加入斐林试剂甲液摇匀后，再加入乙液 (D)用于鉴定蛋白质的双缩脲试剂A液与B液要混合均匀后再加入含样品的试管中，且必须现配现用解析：斐林试剂与双缩脲试剂所用溶质相同，且所含氢氧化钠溶液的浓度相同但二者所用的硫酸铜的质量浓度不同鉴定可溶性还原糖时，
8、是甲、乙两液现配现用，一次如入而鉴定蛋自质时要先加A液，再加B液可溶性还原糖、蛋白质的颜色反应是试剂与其发生化学反应的结果，是肉眼可见的脂肪鉴定中由于脂肪滴小且分散在细胞中所以需要借助于显微镜现察。易错分析：本题在于考查学生的操作是否规范，正确，是否注意了不同鉴定实验之间的差别在选用试剂上容易出现错误。B名题链接 例1 (2003全国新课程)在过氧化氢酶溶液中加入双缩脲试剂，其结果应该是 ( ) (A)产生气泡 (B)溶液呈蓝色 (C)溶液呈紫色 (D)产生砖红色沉淀答案：C例2 (2000上海)鉴定蓖麻籽粒中的储存蛋白质，采用的实验步骤应包括 ( ) (A)用质量分敷为l0的盐酸解离液处理种
9、仁薄片 (B)用体积分数为95的酒精解离液处理种仁薄片 (C)用革兰氏碘液染色 (D)用亚甲基蓝染液染色答案：(B)、CCB、C 例3 (2001上海)据药理研究，一种茅草的报内含有降血糖的因子及多种有益于健康的成分，某公司将它开发成一种保健钦料该产品是否适用于糖尿病的患者生物学兴趣小组的同学以此作为研究课题，请完成下面的实验鉴定报告。 (1)实验目的：鉴定一种茅草的根是否含有还原性糖和淀粉。 (2)实验原理：还原性糖可用 试剂、淀粉可用 试剂来检测 （3)实验器材一种茅草的根、所需试剂、刀片、载玻片、酒精灯，试管夹、火柴滴管 班氏革兰氏碘 液 （4)实验步骤： 鉴定还原性糖： 鉴定淀粉： (
10、5)实验现象： (6)结果分析： (7)在鉴定还原性糖的实验操作中应注意；将一种茅草的根切成薄片(或压碎)，放于载玻片上，滴加l2漓革兰氏碘液，观察颜色变化 将一种茅草的根切成薄片(或压碎)，放于载玻片上，滴加l一2滴班氏试剂将载玻片放在酒精灯上加热，观察颜色变化。观察到有红黄色，说明有还原性糖存在，如没有红黄色，说明没有还原性糖存在如有蓝色或蓝紫色出现，说明有淀粉存在；如没有蓝色或蓝紫色出现，说明没有淀粉存在 。 载玻片在火焰上加热时要来回移动，以免加热不匀而爆裂能力训练一、选择题1.鉴定蛋白质样品时加双缩脲试剂的正确做法是 ( ) （A)先加A液，混合后再加B液摇匀观察 (B)先加B液，混
11、合后再加A液摇匀观察 (C) A、B液混合后加入，摇匀后观察 (D) A、B液同时加入样液，摇匀后观察2可溶性还原糖的鉴定中，制备生物组织样液时加入少许石英砂，其目的是 ( ) (A)研磨成分 （B)防止糖被破坏 (C)防止反应 (D)无作用3组织样液制备时，过滤黄豆组织研磨液时，漏斗上（ ） （A)铺几层滤纸 (B)填一团棉花 (C)垫上一层纱布 (D)堵一小团脱脂棉AAC4在鉴定可溶性还原糖的实验中，对试管中的溶液进行加热时，操作不正确的是 （ ) （A)将这支试管放进盛有开水的大烧杯中 (B)试管底部不要触及烧杯底部 （C)试管口不要朝向实验者 (D)试管底部紧贴烧杯底部5供实验用的花生
12、种于必须提前浸泡 ( ) (A)l2d (B)34d (C)12h (D)34h6某学生在显微镜下观察落花生种叶的切片，当转动细准焦螺旋时，有一部分细胞看得清晰另一部分细胞较模糊，这是由于 ( ) （A)反光镜未调节好 （B)标本切得厚薄不均 （C)细准焦螺旋未调节好 (D)显微镜物镜损坏DDB7将面团包在纱布中在清水中搓洗，鉴定黏留在纱布上的黏稠物质和洗出的白浆用的试剂分别是( ) （A)碘液苏丹染液 （B)双缩脲试剂，碘液 （C)亚甲基蓝溶液、苏丹染液 （D)碘液、斐林试剂8与硫酸铜溶液在碱性环境中反应，生成紫色物质的是 ( ) （A)淀粉 （B)脂肪 (C)蛋白质 (D)核酸9.下列试剂
13、能与脂肪发生颜色反应的是 ( ) (A)斐林试剂 (B)苏丹 (C)双缩脲试剂 （D)硫酸铜BCBl0在显微镜下观察花生种子经处理好的装片时，要寻找切片的 。11.现有下列材料，梨，韭莱叶、胡萝卜、黄豆，花生种子，小麦种子其中适合于鉴定还原糖的是 ，理由是 小麦种子不如花生种子更适合用来鉴定脂肪，这是因为虽然小麦种子 含量很高但不适合用来鉴定 ，因为 。韭菜叶内含有大量的可溶性单糖，由于 ，也不适于还原糖的鉴定。适合用来鉴定蛋白质的是 因为 ，但实验前，须提前 ，这样容易 。梨组织细胞为白色，含糖量高淀粉可溶性还原糖叶片中叶绿素颜色较深，对鉴定是的颜色反应其掩盖作用，导致实验想象不明显黄豆黄豆
14、种子蛋白质含量较高浸泡12d研磨成浆淀粉是非还原性糖且不溶于水最薄处12鉴定花生种子叶存在脂肪时，所用的试剂是 溶液，用物理方法鉴定脂肪的存在叙述鉴定方法 烘烤花生种子后，把子叶放在白纸上用手挤压，白纸上出现透明的油迹，说明子叶中含脂肪。苏丹或苏丹13利用所掌握的实验原理，鉴定家兔血液中有葡萄糖的存在提供的药品材料：硫酸铜、氢氧化钠、柠檬酸钠、新鲜的兔血，请设计操作方案并说明结果。 (1)新鲜兔血中加入柠檬酸钠(抗凝剂)，离心提取血浆上清液。 (2)配制斐林试剂：一定浓度的CuS04(甲液)和NaOH(乙液)混合呈蓝色的斐林试剂。 (3)兔血的上清液中加入斐林试剂，在沸水中加热，出现砖红色。 结论：证明兔血中有糖的存在。
