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1、实验六实验六 霉菌的霉菌的小培养和形态小培养和形态观察观察11学习并掌握观察霉菌形态的基本方法2了解四类常见霉菌的基本形态 一、实验目的一、实验目的2二、实验原理二、实验原理w霉菌：霉菌：凡在营养基质上形成绒毛状、棉絮状或蜘蛛网形的丝状菌体的真菌，统称为霉菌。霉菌包括分类学上许多不同纲或类的真菌，它们分别属于藻状菌纲、子囊菌纲、担子菌纲和半知菌类。 霉菌可产生复杂分枝的菌丝体，分基内菌丝和气生菌丝，气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。霉菌菌丝体（尤其是繁殖菌丝）及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。 3 载玻片培养观察法：载玻片培养观察法： 用无菌操作将培养基琼
2、脂薄层置于载玻片上，接种后盖上盖玻片培养，霉菌即在载玻片和盖玻片之间的有限空间内沿盖玻片横向生长。培养一定时间后，将载玻片上的培养物置显微镜下观察。这种方法既可以保持霉菌自然生长状态，还便于观察不同发育期的培养物。4三、实验材料三、实验材料1 1菌菌种种：黄曲霉、青霉、黑根霉和毛霉培养2-5d的马铃薯琼脂平板培养物。2 2培养基培养基：土豆琼脂或察氏琼脂乳酸石炭酸棉兰染液、碘液、酒精、蒸馏水等3 3仪器或其他用具仪器或其他用具：平皿，盖玻片，U形玻棒，解剖刀，20%的甘油以及显微镜等。5霉菌小培养霉菌小培养四、实验步骤四、实验步骤6 1 1、培培养养小小室室的的灭灭菌菌：在平皿皿底铺一张略小于
3、皿底的圆滤纸片，再放一U形玻棒，其上放一洁净载玻片和两块盖玻片，盖上皿盖，包扎后于121灭菌30min，烘干备用。 2 2、琼琼脂脂块块的的制制作作：取已灭菌的马铃薯琼脂（或察氏琼脂）培养基6-7ml注入另一块灭菌平皿中，使之凝固成薄层。用解剖刀切成0.5-1cm2的琼脂块，并将其移至上述培养室中的载玻片上（每块放两片）。注意无菌操作73 3、接接种种：用尖细的接种针挑取很少量的孢子接种于琼脂块的边缘上，用无菌镊子将盖玻片覆盖在琼脂块上。接种量要少，尽可能将分散的孢子接种在琼脂块的边缘上，否则培养后菌丝过于稠密影响观察。4 4、培培养养：现在平皿的滤纸上加3-5ml灭菌到20%的甘油（保持湿度
4、），盖上平皿，28培养。5 5、镜镜检检：根据需要可以在不同的培养时间内取出载玻片置低倍镜下观察，必要时换高倍镜观察。8a.a.观察黑根霉菌丝情况和孢子情况（着重辨观察黑根霉菌丝情况和孢子情况（着重辨认认匍匐菌丝、假根、包囊梗、孢子囊匍匐菌丝、假根、包囊梗、孢子囊）：）：9根霉假根假根10孢囊孢子（孢囊孢子（sporangiosporesporangiospore）11b.b.观察毛霉菌丝情况和孢子情况（着重辨观察毛霉菌丝情况和孢子情况（着重辨认认孢囊梗、孢子囊孢囊梗、孢子囊）：）：12 c. c.观察黄曲霉菌丝观察黄曲霉菌丝分隔分隔情况和分生孢子着生情情况和分生孢子着生情况（着重辨认况（着重
5、辨认足细胞、分生孢子梗和分生孢子足细胞、分生孢子梗和分生孢子）：13黑曲霉1415 足足细细胞胞16d.d.观察青霉菌丝观察青霉菌丝分隔分隔和分生孢子着生情况和分生孢子着生情况（着重辨认着重辨认帚状分支的分生孢子梗帚状分支的分生孢子梗）：）：17青霉青霉18菌落特征：菌落特征：霉菌的菌落大、疏松、干燥、不透明，多呈绒毛状、絮状或网状等，菌体可沿培养基表面蔓延生长，由于不同的真菌孢子含有不同的色素，所以菌落可呈红、黄、绿、青绿、青灰、黑、白、灰等多种颜色。1920五、实验结果五、实验结果绘四种霉菌的形态特征：绘四种霉菌的形态特征：黄曲霉：黄曲霉：有隔菌丝，外生孢子（分生孢子），有足细胞，顶囊，分
6、生孢子梗青霉：青霉：有隔菌丝，外生孢子（分生孢子），为帚帚状分生孢子穗状分生孢子穗，初级小梗，次级小梗；黑根霉：黑根霉：无隔菌丝，内生孢子（孢囊孢子），孢囊梗，匍匐枝和假根；毛霉：毛霉：无隔菌丝，内生孢子（孢囊孢子），孢囊梗21六、思考题六、思考题 w1、你主要根据哪些形态特征来区分上述四种霉菌？ P46，（1）w2、你认为在显微镜下，细菌，放线菌，酵母菌和霉菌的主要区别是什么？P46，（2） 22w1.1.镜镜检检时时，你你如如何何区区分分放放线线菌菌的的基基内内菌菌丝和气生菌丝？丝和气生菌丝？P P42 42 ，2 2（3 3） w 镜检时，基内菌丝色暗，分枝较少，而气生菌丝色深，分枝多且向上分化出孢子丝。上次实验习题解答上次实验习题解答23请确保镜头擦拭请确保镜头擦拭干净！干净！24
