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1、豚鼠过敏试验豚鼠过敏试验The guinea pig allergic test病原生物学与免疫学教研室Tel:03733831083掌握豚鼠过敏实验的原理；一、实验目的一、实验目的2熟悉超敏反应的分类。熟悉超敏反应的分类。1二、原理二、原理超敏反应超敏反应 HypersensitivityHypersensitivity速发型超敏反应I I型超敏反应型超敏反应超敏反应分型超敏反应分型IIII型超敏反应型超敏反应IIIIII型超敏反应型超敏反应型超敏反应型超敏反应细胞毒型超敏反应细胞毒型超敏反应免疫复合物型超敏反应免疫复合物型超敏反应迟发型超敏反应迟发型超敏反应 型超敏反应型超敏反应又称为又称
2、为速发型超敏反应速发型超敏反应，是由特异性的，是由特异性的IgEIgE抗体抗体介导的，其主要特征为：介导的，其主要特征为： 出现快，消退也快；出现快，消退也快； 出现功能紊乱性疾病，不出现严重组织细胞损伤；出现功能紊乱性疾病，不出现严重组织细胞损伤； 有明显个体差异和遗传背景。有明显个体差异和遗传背景。静息肥大细胞静息肥大细胞激活后激活后 5 分钟分钟激活后激活后 60 分钟分钟荨麻疹荨麻疹哮喘病发作患儿哮喘病发作患儿1.1.豚鼠：体重豚鼠：体重200g200g左右的幼小豚鼠；左右的幼小豚鼠；2.2.变应原：马血清、鸡蛋清；变应原：马血清、鸡蛋清；3.3.其他：生理盐水、无菌注射器、针头、碘酒
3、、酒其他：生理盐水、无菌注射器、针头、碘酒、酒精、棉球等。精、棉球等。三、主要实验材料三、主要实验材料四、实验步骤四、实验步骤1.取豚鼠三只，编号标记； 抓取方法：先用右手掌轻轻扣住豚鼠背部，抓住其肩胛下方，以拇指和食指抓住颈部将其轻轻提起。2.2.致敏：按致敏：按1 1：1010分别稀释马血清，按照下表操作腹分别稀释马血清，按照下表操作腹腔注射。腔注射。第一次注射第一次注射12 3马血清马血清生理盐水生理盐水马血清马血清3.3.发敏：按发敏：按1 1：1010分别稀释马血清，鸡蛋清，按照下分别稀释马血清，鸡蛋清，按照下表，心内注射表，心内注射2ml2ml。2-3周后第二周后第二次注射次注射1
4、2 3鸡蛋清鸡蛋清马血清马血清马血清马血清 豚鼠豚鼠1在注射马血清在注射马血清1-5分钟会出现不安、抓鼻、喷嚏、分钟会出现不安、抓鼻、喷嚏、呼吸困难、竖毛、大小便失禁、痉挛性跳跃，症状严重者在呼吸困难、竖毛、大小便失禁、痉挛性跳跃，症状严重者在数分钟内死亡。数分钟内死亡。 而豚鼠而豚鼠2、3无任何症状。无任何症状。 五、结果判断五、结果判断将死亡豚鼠解剖，可见肺脏极度水肿，胀满整个胸腔。将死亡豚鼠解剖，可见肺脏极度水肿，胀满整个胸腔。1、心脏注射时，首先要固定好动物，然后于心跳、心脏注射时，首先要固定好动物，然后于心跳最明显之处进针，感觉有搏动、注射器内有回血时最明显之处进针，感觉有搏动、注射器内有回血时再注射过敏原；再注射过敏原；2、由于动物个体反应性不同，有的反应较轻，可、由于动物个体反应性不同，有的反应较轻，可幸免死亡。如果再注射马血清也不出现反应，此称幸免死亡。如果再注射马血清也不出现反应，此称为脱敏状态。但脱敏状态是暂时的，大约为脱敏状态。但脱敏状态是暂时的，大约2周后又周后又处于致敏状态。处于致敏状态。六、注意事项六、注意事项
