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1、观察植物细胞的有丝分裂观察植物细胞的有丝分裂研究对象研究对象:n洋葱的根尖洋葱的根尖为什么?为什么?二、根尖结构n成熟区没有细胞分裂 。n伸长区有少量细胞分裂。n分生区有大量细胞分裂。剪根解离漂洗染色制片实验用具:实验用具:n载玻片(载玻片(2),盖玻片,镊子,滴管,吸水纸),盖玻片,镊子,滴管,吸水纸n烧杯烧杯(盛有清水盛有清水)n染色液(质量浓度为染色液(质量浓度为0.01g/ml或或0.02g/ml的龙胆的龙胆 紫溶液)紫溶液)n永久装片永久装片(1个个)实验步骤:实验步骤:n洋葱的根尖预培养(已完成)洋葱的根尖预培养(已完成) 质量分数为质量分数为15的盐酸与体积分数的盐酸与体积分数为
2、为95的酒精溶液的酒精溶液的混合液(的混合液(1:1)实验步骤实验步骤n解离:解离: 取取23mm根尖放入根尖放入解离液解离液中中解离解离3-5min 使细胞彼此使细胞彼此分开!分开!注意!注意! 控制解离控制解离时间时间 (为什么(为什么?过长过短会如何过长过短会如何?)实验步骤实验步骤n漂洗漂洗 用镊子将解离后的根尖放入盛有用镊子将解离后的根尖放入盛有清水的玻璃皿中漂洗清水的玻璃皿中漂洗10分钟分钟 ( 思考:目的?)思考:目的?)实验步骤实验步骤n染色(重要!)染色(重要!) 轻轻轻轻取出漂洗干净的根尖放入取出漂洗干净的根尖放入龙胆龙胆紫紫中染色中染色3-5分钟分钟注意注意: : 染色的
3、时间控制染色的时间控制,建议建议4分钟分钟 (过长或过短会怎样?)(过长或过短会怎样?)碱性染料碱性染料实验步骤实验步骤n制片制片 用镊子将根尖取出放在载玻片上,用镊子将根尖取出放在载玻片上, 加一滴清水,加一滴清水, 盖盖玻片,盖盖玻片, 再加一个载玻片,再加一个载玻片, 轻轻的挤压两个载玻片,使细胞分散轻轻的挤压两个载玻片,使细胞分散。 注意:注意: 盖盖玻片时尽量盖盖玻片时尽量不产生气泡不产生气泡 太重,太重,破坏细胞结构破坏细胞结构;太轻,;太轻,细胞不能分散细胞不能分散切切散散实验步骤实验步骤n观察观察 用显微镜观察细胞有丝分裂的各个时用显微镜观察细胞有丝分裂的各个时期期n注意:注意
4、:先低倍后高倍先低倍后高倍爱护显微镜,特别是物镜保护爱护显微镜,特别是物镜保护我们的目标是我们的目标是分生区细胞分生区细胞 显微镜下的细胞有丝分裂末期后期中期低倍镜间期末期中期后期前期高倍镜显微镜的结构根尖结构根尖结构成熟区成熟区伸长区伸长区分生区分生区根冠根冠正方形正方形, ,排列排列紧密密, ,细胞核胞核较大大, ,1cm2-3mm1.1.培养根尖时,为何要经常换水?培养根尖时,为何要经常换水?提示:提示:增加水中的氧气,防止根进行无氧呼吸造成根的腐烂。增加水中的氧气,防止根进行无氧呼吸造成根的腐烂。2.2.为何要控制解离时间?为何要控制解离时间?提示:提示:若解离时间过短,细胞在压片时不
5、易分散开;若解离时若解离时间过短,细胞在压片时不易分散开;若解离时间过长,导致解离过度,无法取出根尖进行染色和制片。间过长,导致解离过度,无法取出根尖进行染色和制片。3.3.教材上做实验时先漂洗后染色,顺序能否颠倒?教材上做实验时先漂洗后染色,顺序能否颠倒?提示:提示:顺序不能颠倒,否则解离液中的盐酸会干扰染色效果。顺序不能颠倒,否则解离液中的盐酸会干扰染色效果。4.4.染色时应注意什么问题?染色时应注意什么问题?提示:提示:染色时,染色液的浓度和染色时间必须掌握好,应注意染色时,染色液的浓度和染色时间必须掌握好,应注意染色不能过深,否则不能正常观察细胞图像。染色不能过深,否则不能正常观察细胞
6、图像。5.5.解离和压片的目的分别是什么?压片时为何要再加一片载玻解离和压片的目的分别是什么?压片时为何要再加一片载玻片?片?提示:提示:解离是为了使细胞相互分离开来,压片是为了使细胞相解离是为了使细胞相互分离开来,压片是为了使细胞相互分散开来;再加一片载玻片是为了使受力均匀,防止盖玻片互分散开来;再加一片载玻片是为了使受力均匀,防止盖玻片被压破。被压破。 6.6.若所观察的组织细胞大多是破碎而不完整的,其原因是什么若所观察的组织细胞大多是破碎而不完整的,其原因是什么?提示:提示:压片时用力过大。压片时用力过大。7.7.在显微镜下能否观察到有丝分裂的动态变化?在显微镜下能否观察到有丝分裂的动态变化?提示:提示:不能。显微镜下观察到的都是死细胞,不能观察到有丝不能。显微镜下观察到的都是死细胞,不能观察到有丝分裂的动态变化,若视野中找不到某一时期的细胞,可通过移分裂的动态变化,若视野中找不到某一时期的细胞,可通过移动玻片在邻近的区域中寻找。动玻片在邻近的区域中寻找。8.8.在显微镜下观察到哪个时期的细胞最多?为什么?在显微镜下观察到哪个时期的细胞最多?为什么?提示:提示:在显微镜下观察到间期的细胞数目最多,因为间期历时在显微镜下观察到间期的细胞数目最多,因为间期历时最长。最长。