《丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争抑制作》由会员分享，可在线阅读，更多相关《丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争抑制作（10页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、丙二酸对琥珀酸脱氢酶丙二酸对琥珀酸脱氢酶的的竞争性抑制作用竞争性抑制作用P P、9797教师教师： * * *生物化学与分子生物学实验室生物化学与分子生物学实验室 CQMU 2008一、实验目的一、实验目的n 学习掌握酶竞争性抑制的概念和特点学习掌握酶竞争性抑制的概念和特点n n 学习丙二酸对琥珀酸脱氢酶竞争性抑制学习丙二酸对琥珀酸脱氢酶竞争性抑制 实验的设计思路和方法实验的设计思路和方法二、实验原理二、实验原理 抑制剂和底物抑制剂和底物结构相结构相似似，可与底物，可与底物竞争结合竞争结合酶的活性中心酶的活性中心，阻碍酶，阻碍酶- -底物复合物形成底物复合物形成酶的竞争性抑制作用酶的竞争性抑制
2、作用抑制程度取决于抑制剂与酶的相对亲和力，以抑制程度取决于抑制剂与酶的相对亲和力，以及抑制剂与底物浓度的相对比例（及抑制剂与底物浓度的相对比例（I/SI/S）HOOCCHHOOCCH2 2CHCH2 2COOHCOOHHOOCCH=CHCOOHFADFADH2甲烯白甲烯白MBHMBH2 2 （无色）（无色）甲烯蓝甲烯蓝MB （蓝色）（蓝色）在在无氧条件无氧条件下以甲烯蓝褪色时间判断琥珀下以甲烯蓝褪色时间判断琥珀酸脱氢酶活性高低，观察竞争性抑制作用酸脱氢酶活性高低，观察竞争性抑制作用 丙二酸丙二酸HOOCCHHOOCCH2 2COOHCOOH琥珀酸脱氢酶琥珀酸脱氢酶三、实验步骤三、实验步骤1.
3、1. 酶提取液的制备酶提取液的制备 处死大白鼠，分离出肌肉。处死大白鼠，分离出肌肉。 制备匀浆液。制备匀浆液。. . 酶促反应及竞争性抑制作用酶促反应及竞争性抑制作用 取试管取试管6 6支，按表所列步骤操作。支，按表所列步骤操作。 加液体石蜡以隔绝空气加液体石蜡以隔绝空气3737水浴保温水浴保温 随时观察并记录各管褪色时间！随时观察并记录各管褪色时间！3. 3. 实验记录和结果分析实验记录和结果分析 试管编号试管编号1 12 23 34 45 56 6I/SI/S0:10:10:10:11:101:101:101:101:11:11:11:110.110.110.110.1- - - - -
4、- -褪色时间褪色时间酶提取液中有没有琥珀酸脱氢酶活性？酶提取液中有没有琥珀酸脱氢酶活性？各管的褪色情况有何区别？为什么？各管的褪色情况有何区别？为什么？丙二酸对琥珀酸脱氢酶抑制作用的类型及其特点是什么？丙二酸对琥珀酸脱氢酶抑制作用的类型及其特点是什么？本实验中本实验中5 5号、号、6 6号试管的作用是什么？号试管的作用是什么？四、结果分析四、结果分析1 1、酶提取液中有没有琥珀酸脱氢酶活性？、酶提取液中有没有琥珀酸脱氢酶活性？2 2、各管的褪色情况有何区别？为什么？、各管的褪色情况有何区别？为什么？3 3、丙二酸对琥珀酸脱氢酶抑制作用的类型、丙二酸对琥珀酸脱氢酶抑制作用的类型 及其特点是什么？如何证明的？及其特点是什么？如何证明的？4 4、本实验中、本实验中5 5号、号、6 6号试管的作用是什么？号试管的作用是什么？五、注意事项五、注意事项n n加试剂时加试剂时看清底物与抑制剂的浓度看清底物与抑制剂的浓度。n n注意注意随时观察记录随时观察记录各管褪色时间。各管褪色时间。n n3737水浴保温过程中，水浴保温过程中，不能振摇试管不能振摇试管，避，避免甲烯白重新氧化变蓝。免甲烯白重新氧化变蓝。n n实验结束后一定实验结束后一定洗净试管内的液体石蜡洗净试管内的液体石蜡。开始！开始！
