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1、5消毒灭菌消毒灭菌16、自己选择的路、跪着也要把它走完。17、一般情况下)不想三年以后的事，只想现在的事。现在有成就，以后才能更辉煌。18、敢于向黑暗宣战的人，心里必须充满光明。19、学习的关键-重复。20、懦弱的人只会裹足不前，莽撞的人只能引为烧身，只有真正勇敢的人才能所向披靡。第5章 消毒灭菌与生物安全物理消毒灭菌法物理消毒灭菌法v热力灭菌法热力灭菌法原理：破坏菌体蛋白质与核酸，使其肽链断裂，原理：破坏菌体蛋白质与核酸，使其肽链断裂，蛋白质变性凝固，核酸解链崩解，导致细菌死亡。蛋白质变性凝固，核酸解链崩解，导致细菌死亡。 最常用于消毒最常用于消毒 和灭菌（和灭菌（565630306060分
2、钟；分钟；8058051010分钟）分钟）可以分成干热和湿热两大类可以分成干热和湿热两大类焚烧-最彻底的灭菌方法烧灼-直接用火焰灭菌方法干烤-加热160-1802小时 干热灭菌法干热灭菌法湿热灭菌法湿热灭菌法高压蒸汽灭菌法最有效的灭菌方法 1.05kg/cm2 121.31520min煮沸消毒法水煮1005分钟(繁殖体)2小时(芽胞)流动蒸汽消毒法巴氏消毒法间隙蒸汽灭菌法水蒸汽1001530分钟(繁殖体)反复多次流动蒸汽间歇加热灭菌较低的温度（71.715-30秒/61.162.8 30分钟）杀灭致病菌湿热灭菌与干热灭菌的比较湿热灭菌与干热灭菌的比较同一温度下，湿热灭菌比干热灭菌效果好同一温度
3、下，湿热灭菌比干热灭菌效果好原原因因1、湿热中细菌菌体蛋白较易凝固湿热中细菌菌体蛋白较易凝固2、湿热的穿透力比干热大湿热的穿透力比干热大3、湿热的蒸汽有潜热湿热的蒸汽有潜热 常用热力灭菌法常用热力灭菌法种类种类方法方法效果效果用途用途干干热热焚烧焚烧点燃或焚烧炉点燃或焚烧炉 灭菌灭菌废弃污物、尸体废弃污物、尸体烧灼烧灼火焰烧灼火焰烧灼 灭菌灭菌接种环，试管口接种环，试管口干烤干烤红外线红外线 干烤箱，热空气干烤箱，热空气 160-170C 2h 电磁波热效应电磁波热效应 灭菌灭菌 灭菌灭菌玻璃器皿等耐高玻璃器皿等耐高温的物品温的物品医疗器械医疗器械湿湿热热煮沸法煮沸法100C，5-10min，
4、沸水，沸水 消毒消毒饮水饮水. 食具食具. 注射器注射器高高压压蒸蒸气气灭灭菌菌法法 高压蒸气灭菌高压蒸气灭菌 器器 1.05kg/cm2、 121.3C 15-20min 灭菌灭菌耐高温、耐湿物品耐高温、耐湿物品如：如：NS .培养基培养基. 手术衣手术衣 常用热力灭菌法常用热力灭菌法种类种类方法方法 效果效果 用途用途湿湿热热巴巴氏氏消消毒法毒法 61.1- 62.830 min， 72 15sec （常用（常用）消毒（杀死病消毒（杀死病原菌，不破坏原菌，不破坏营养成分）营养成分）流流通通蒸蒸气气灭灭菌菌法法 80- 100 蒸气蒸气 1530min牛奶，酒类牛奶，酒类消毒（杀死细消毒（杀
5、死细菌繁殖体，不菌繁殖体，不杀死芽胞）杀死芽胞）不耐高温、不耐高温、高压物品高压物品间歇灭间歇灭菌法菌法反复多次反复多次流动蒸气流动蒸气灭菌灭菌不耐高温、不耐高温、高压物品高压物品辐射杀菌法辐射杀菌法 紫外线紫外线:杀菌机理：波长240300nm的紫外线具有杀菌作用干扰DNA的复制与转录紫外线穿透力较弱不耐热物品的表面消毒特点：应用范围：空气消毒手术室、传染病房、细菌实验室波长波长波长波长380380780nm780nm为光波（可见电磁波）为光波（可见电磁波）为光波（可见电磁波）为光波（可见电磁波）紫紫紫紫红红红红 :265nm-266nm（最佳杀菌波长）（最佳杀菌波长） 电离辐射电离辐射：如
6、高速电子，：如高速电子， X-ray X-ray， -ray-ray 机理机理：自由基及自由基离子：自由基及自由基离子 破坏微生物破坏微生物 蛋白质、核酸、酶蛋白质、核酸、酶 死亡死亡 适用物品适用物品：不耐热的物品（药品及医疗用品）：不耐热的物品（药品及医疗用品）微波（微波（microwave)microwave) 机理机理：热效应：热效应 适用物品适用物品：非金属物品、食品：非金属物品、食品滤过除菌法滤过除菌法(filtration)(filtration) 机理机理：用物理阻留的方法将液体或空气中的细菌：用物理阻留的方法将液体或空气中的细菌 除去除去, ,以达到无菌目的以达到无菌目的 器
7、具器具：滤菌器（：滤菌器（filterfilter） 适用物品适用物品：不耐高温物品（：不耐高温物品（血清、血清、 毒素、抗生素）以及空气毒素、抗生素）以及空气 等的除菌。等的除菌。 干燥与低温抑菌法干燥与低温抑菌法在低温状态下真空抽去水分在低温状态下真空抽去水分冷冻真空干燥法：冷冻真空干燥法：用途：保存菌种用途：保存菌种干燥法：抑菌，用于：保存食物干燥法：抑菌，用于：保存食物化学消毒灭菌法化学消毒灭菌法作用机制作用机制常用种类常用种类菌体蛋白变性或凝固酚类、醇类、重金属盐类(高浓度)损伤细菌细胞膜脂溶剂、酚类(低浓度)、表面活性剂损伤核酸烷化剂（戊二醛、甲醛）、染料等干扰细菌的酶系统及代谢(
8、破坏-SH，酶失活) 氧化剂（过氧乙酸、高锰酸钾、H2O2,二氧化氯） 、重金属盐类(低浓度)改变细胞壁通透性表面活性剂（新洁而灭）常用消毒剂种类作用机制按杀菌能力可将消毒剂可分按杀菌能力可将消毒剂可分消毒剂消毒剂类型类型种类种类杀菌机理杀菌机理范围范围高效消高效消毒剂毒剂含氯消毒剂次氯酸钠等酶失活和氧化饮用水、地面等过氧化物类过氧化氢等酶活性丧失物品表面和皮肤醛类甲醛、戊二醛蛋白、核酸变性器械环氧乙烷环氧乙烷蛋白、核酸变性医疗器械中效消中效消毒剂毒剂含碘消毒剂含碘消毒剂碘酊、碘伏氧化、沉淀蛋白皮肤、体温计等醇类醇类乙醇或异丙醇蛋白变性皮肤、体温计等低效消低效消毒剂毒剂季铵盐类季铵盐类新洁尔灭
9、表面活性剂地面、皮肤等氯己定氯己定表面活性剂皮肤黏膜等高锰酸钾高锰酸钾高锰酸钾氧化餐具、水果等类别 作用机制 常用种类酚类 蛋白变性，细胞膜损伤 石炭酸醇类 蛋白变性 乙醇（70%-75%）氧化剂 氧化、蛋白沉淀 高锰酸钾、过氧乙酸 碘酒重金属盐 氧化、蛋白酶变性 红汞、硫柳汞表面活性剂改变细胞壁、膜通透性 新洁尔灭染料 干扰氧化、抑制繁殖 龙胆紫烷化剂 菌体蛋白质及核酸烷基化 甲醛、烷氧乙烷常用消毒剂的种类（按化学成分）常用消毒剂的种类（按化学成分）常用消毒剂的应用常用消毒剂的应用种类种类使用浓度使用浓度用途用途石炭酸石炭酸3%5%地面、器具表面、皮肤消毒地面、器具表面、皮肤消毒乙醇乙醇70
10、%75%皮肤、体温计消毒皮肤、体温计消毒高锰酸钾高锰酸钾0.1%皮肤、尿道、蔬菜、水果消毒皮肤、尿道、蔬菜、水果消毒红汞红汞2%皮肤、粘膜、小创伤消毒皮肤、粘膜、小创伤消毒硫柳汞硫柳汞0.1%皮肤消毒、手术部位消毒皮肤消毒、手术部位消毒过氧乙酸过氧乙酸0.2%0.3% 塑料、玻璃器材消毒塑料、玻璃器材消毒碘酒碘酒2.0%2.5% 皮肤消毒皮肤消毒新洁尔灭新洁尔灭0.41.6%手术洗手、浸泡手术器械手术洗手、浸泡手术器械龙胆紫龙胆紫2%4%浅表创伤消毒浅表创伤消毒消毒灭菌的运用消毒灭菌的运用使用范围使用范围常用方法常用方法室内空气紫外线；过氧乙酸喷雾；中草药烟熏皮肤乙醇；肥皂水黏膜3%过氧化氢；
11、1g/L高锰酸钾病人分泌物及排泄物漂白粉、含50g/L有效氯的次氯酸钠病人污染物煮沸、过氧乙酸、流通蒸汽饮水氯气影响消毒剂作用的因素影响消毒剂作用的因素消毒剂消毒剂微生物微生物 环境环境种类种类浓度浓度作用时间作用时间物理状态物理状态种类种类有机物有机物温度温度酸硷度酸硷度数量数量选择适当的消毒剂低毒低毒价廉价廉低破坏低破坏易贮藏易贮藏方便方便有效有效生物安全生物安全 生物安全生物安全（biosafety）是生物技术安全）是生物技术安全（safety of biotechnology）的简称。的简称。 狭义地指现代生物技术的研究、开发、应狭义地指现代生物技术的研究、开发、应用及转基因生物可能对
12、生物多样性、生态环境用及转基因生物可能对生物多样性、生态环境和人类健康产生潜在的危害。和人类健康产生潜在的危害。 广义地指与生物有关的各种因素对社会、广义地指与生物有关的各种因素对社会、经济、人类健康及生态环境所产生的危害或潜经济、人类健康及生态环境所产生的危害或潜在风险。在风险。 病病原原微微生生物物所所致致的的安安全全问问题题，如如病病原原微微生生物物实实验验室室的的安安全全隐隐患患、生生物物武武器器、生生物物恐恐怖怖、重重大大传传染染病病的的暴暴发发流流行行等等，也也是是人人类类社社会所面临的最现实的生物安全问题。会所面临的最现实的生物安全问题。 病病原原微微生生物物实实验验室室生生物物
13、安安全全的的核核心心是是防防扩散扩散和和防感染防感染。 关关于于病病原原微微生生物物实实验验室室生生物物安安全全，我我国国法法令令包包括括对对病病原原微微生生物物的的分分类类管管理理，对对实实验验室室的的分分级级管管理理，实实验验室室感感染染的的控控制制以以及及监监督督和法律责任等。和法律责任等。 一、病原微生物的分类一、病原微生物的分类 根根据据传传染染性性、感感染染后后对对个个体体或或者者群群体体的的危危害害程程度，病原微生物分为四类：度，病原微生物分为四类： 第第一一类类：能能够够引引起起人人类类或或者者动动物物非非常常严严重重疾疾病病的的微微生生物物，以以及及我我国国尚尚未未发发现现或
14、或者者已已经经宣宣布布消消灭灭的的微微生生物。如天花、埃博拉病毒等。物。如天花、埃博拉病毒等。 第第二二类类：能能够够引引起起人人类类或或者者动动物物严严重重疾疾病病，比比较较容容易易直直接接或或者者间间接接在在人人与与人人、动动物物与与人人、动动物物与与动动物物间间传传播播的的微微生生物物。 如如乙乙脑脑、狂狂犬犬病病病病毒毒、HIVHIV、脊脊灰、结核、霍乱等。灰、结核、霍乱等。 一、病原微生物的分类一、病原微生物的分类第第三三类类：能能够够引引起起人人或或动动物物疾疾病病，但但一一般般情情况况下下对对人人、动动物物或或环环境境不不构构成成严严重重危危害害，传传播播风风险险有有限限，实实验
15、验室室感感染染后后很很少少引引起起严严重重疾疾病病，并并且且具具备备有有效效治治疗疗和和预预防防措措施施的的微微生生物物。如如肝肝炎炎、风风疹疹、疱疱疹疹、流流感感、破伤风病毒等。破伤风病毒等。 第第四四类类：在在通通常常情情况况下下不不会会引引起起人人或或动动物物疾疾病病的的微微生物。如小鼠白血病病毒等。生物。如小鼠白血病病毒等。 第一类、第二类统称为高致病性病原微生物。第一类、第二类统称为高致病性病原微生物。二、病原微生物实验室的分级二、病原微生物实验室的分级级别级别处理对象处理对象一级一级对人体、动植物或环境危害较低，不具有对健康成对人体、动植物或环境危害较低，不具有对健康成人、动植物致
16、病的致病因子。人、动植物致病的致病因子。二级二级对人体、动植物或环境具有中等危害或具有潜在危对人体、动植物或环境具有中等危害或具有潜在危险的致病因子，对健康成人、动植物和环境不会造险的致病因子，对健康成人、动植物和环境不会造成严重危害，具有有效的预防和治疗措施。成严重危害，具有有效的预防和治疗措施。三级三级对人体、动植物或环境具有高度危险性，主要通过对人体、动植物或环境具有高度危险性，主要通过气溶胶使人类传染上严重的甚至是致命的疾病，或气溶胶使人类传染上严重的甚至是致命的疾病，或对动植物和环境具有高度危害的致病因子。通常有对动植物和环境具有高度危害的致病因子。通常有预防治疗措施。预防治疗措施。
17、四级四级 对人体、动植物或环境具有高度危险性，通过气溶对人体、动植物或环境具有高度危险性，通过气溶胶途径传播或传播途径不明或未知的危险的致病因胶途径传播或传播途径不明或未知的危险的致病因子。没有预防治疗措施。子。没有预防治疗措施。 一一、二二级级实实验验室室不不得得从从事事高高致致病病性性病病原原微微生生物物实实验验活活动动。三三级级、四四级级实实验验室室从事高致病性病原微生物实验活动。从事高致病性病原微生物实验活动。 从从事事高高致致病病性性病病原原微微生生物物相相关关实实验验活活动动应应当当有有名名以以上上的的工工作作人人员员共共同同进进行行。在在同同一一个个实实验验室室的的同同一一个个独
18、独立立安安全全区区域域内内，只只能能同同时时从从事事一一种种高高致致病病性性病病原原微微生生物物的的相关实验活动。应有健全安全保卫制度相关实验活动。应有健全安全保卫制度。 实实验验室室工工作作人人员员应应掌掌握握实实验验室室技技术术规规范范、操操作作规规程程、生生物物安安全全防防护护知知识识和和实实际际操操作作技技能能。应应有有符符合合要要求求的的防防护护用用品品，应应建建立立健健康康档档案案；进行预防接种。进行预防接种。 实实验验室室应应有有科科学学、严严格格的的管管理理制制度度，定定期期对对实实验验室室设设施施设设备备、材材料料等等进进行行检检查查、维维护护和和更更新新，应应对对废废水水、
19、废废气气以以及及其其他他废废物物进进行行合合理理处置，防止环境污染。处置，防止环境污染。 生物安全生物安全三、实验室感染的控制以及监三、实验室感染的控制以及监督和法律责任督和法律责任 实实验验室室感感染染控控制制工工作作包包括括定定期期检检查查实实验验室室的的生生物物安安全全防防护护、病病原原微微生生物物菌菌（毒毒）种种和和样样本本保保存存与与使使用用、安安全全操操作作、实实验验室室排排放放的的废废水水和和废废气以及其他废物处置等实施情况。气以及其他废物处置等实施情况。 实实验验室室发发生生高高致致病病性性病病原原微微生生物物泄泄漏漏时时，预预防防、控控制制措措施施包包括括：封封闭闭被被病病原
20、原微微生生物物污污染染的的实实验验室室或或可可能能造造成成病病原原微微生生物物扩扩散散的的场场所所；开开展展流流行行病病学学调调查查；对对病病人人进进行行隔隔离离治治疗疗，对对相相关关人人员员进进行行医医学学检检查查；对对密密切切接接触触者者进进行行医医学学观观察察；进进行行现现场场消消毒毒；对对染染疫疫或或者者疑疑似似染染疫的动物采取隔离、扑杀等措施。疫的动物采取隔离、扑杀等措施。 监监督督的的主主要要内内容容是是监监督督病病原原微微生生物物实实验验室室执执行行国国家家有有关关法法律律、行行政政法法规规、国国家家标标准准和和要要求求的的记记录录、档案及报告的情况。档案及报告的情况。 法法律律
21、责责任任的的核核心心是是承承担担造造成成传传染染病病传传播播、流流行行或或者者其其他他严严重重后后果果的法律责任。的法律责任。思考题v 消毒、灭菌、防腐、无菌（操作）的概念消毒、灭菌、防腐、无菌（操作）的概念v 湿热灭菌有哪些方法湿热灭菌有哪些方法? ? 各有何用途各有何用途? ? （温温度、时间、物品度、时间、物品）v 筒述紫外线杀菌的作用机制和注意事项筒述紫外线杀菌的作用机制和注意事项1.1.新生儿预防淋球菌所致脓漏眼的消毒剂是新生儿预防淋球菌所致脓漏眼的消毒剂是A A2%2%4%4%龙胆紫龙胆紫B B0.1%0.1%高锰酸钾高锰酸钾C C2%2%红汞红汞D D1%1%硝酸银硝酸银E E2
22、%2%碘伏碘伏2.2.消毒是指消毒是指 A. A.杀死病原微生物的方法杀死病原微生物的方法 B. B.杀死物体上所有微生物的方法杀死物体上所有微生物的方法 C. C.物体中无活菌存在物体中无活菌存在 D. D.抑制微生物生长繁殖的方法抑制微生物生长繁殖的方法 E. E.防止表面细菌生长繁殖的方法防止表面细菌生长繁殖的方法3.3.杀死芽胞最常用的有效方法是杀死芽胞最常用的有效方法是 A. A.煮沸煮沸5min B.5min B.紫外线照射紫外线照射 C. C.高压蒸气灭菌高压蒸气灭菌 D. D.干烤灭菌干烤灭菌 E. E.巴氏消毒巴氏消毒4.4.关于高压蒸汽灭菌法，不正确的描述是关于高压蒸汽灭菌
23、法，不正确的描述是A.A.灭菌效果最可靠灭菌效果最可靠B.B.适用于耐高温和耐湿物品的灭菌适用于耐高温和耐湿物品的灭菌C.C.可杀灭包括细菌芽孢在内的所有微生物可杀灭包括细菌芽孢在内的所有微生物D.D.通常灭菌压力为通常灭菌压力为2.05kg/cm22.05kg/cm2E.E.通常灭菌温度为通常灭菌温度为121.3121.35.5.在在103.4kPa(1.05kg/cm2)103.4kPa(1.05kg/cm2)蒸气压力下，灭菌的标准时间通常是蒸气压力下，灭菌的标准时间通常是A.1A.15 5分钟分钟 B.6 B.61010分钟分钟C.11C.111414分钟分钟D.15D.152020分钟
24、分钟E.21E.212525分钟分钟6.6.紫外线可以杀灭细菌主要是紫外线可以杀灭细菌主要是 A. A.破坏细胞壁破坏细胞壁 B. B.干扰蛋白质合成干扰蛋白质合成 C. C.损伤细胞膜损伤细胞膜 D. D.干扰干扰DNADNA的转录与复制的转录与复制 E. E.破坏细菌酶系统破坏细菌酶系统7.7.酒精消毒最适宜的浓度酒精消毒最适宜的浓度 A.20A.20 B.25B.25 C.50 C.50 D.75D.75 E.90E.908.8.下列消毒灭菌法正确的是下列消毒灭菌法正确的是 A A病人排泄物病人排泄物漂白粉漂白粉 B B金属器械金属器械漂白粉漂白粉 C C饮水饮水过滤除菌过滤除菌 D D
25、人和动物血清人和动物血清氯气氯气 E E含糖培养基含糖培养基过滤除菌过滤除菌9.9.手术用金属器械宜采用手术用金属器械宜采用A.A.高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌 B. B.干烤干烤 C. C.滤过除菌滤过除菌 D. D.紫外线紫外线 E. E.煮沸消毒煮沸消毒Theend!51、天下之事常成于困约，而败于奢靡。、天下之事常成于困约，而败于奢靡。陆游陆游52、生命不等于是呼吸，生命是活动。、生命不等于是呼吸，生命是活动。卢梭卢梭53、伟大的事业，需要决心，能力，组织和责任感。、伟大的事业，需要决心，能力，组织和责任感。易卜生易卜生54、唯书籍不朽。、唯书籍不朽。乔特乔特55、为中华之崛起而读书。、为中华之崛起而读书。周恩来周恩来谢谢！
