第十章第十章 弧菌、螺杆菌和弯曲菌弧菌、螺杆菌和弯曲菌病原生物学病原生物学 学习目标1.掌握掌握：：弧菌属的分型，生物学特性，霍乱弧菌弧菌属的分型，生物学特性，霍乱弧菌的致病物的致病物质、致病机制、、致病机制、传染源、染源、传播途径和播途径和微生物学微生物学检查2.熟悉熟悉：：霍乱弧菌的防治原霍乱弧菌的防治原则3.了解了解：：副溶血性弧菌及所致疾病副溶血性弧菌及所致疾病 弧弧菌菌属属（（Vibrio））是是一一群群菌菌体体短短小小，，弯弯曲曲成成弧弧形形的的革革兰阴性菌，广泛分布于自然界，以水中最多阴性菌，广泛分布于自然界，以水中最多对人人类致致病病最最为重重要要的的是是霍霍乱乱弧弧菌菌，，其其次次为副副溶溶血血性性弧弧菌 第一第一节 霍乱弧菌霍乱弧菌v霍乱霍乱弧菌弧菌(Vibro cholerae)是霍乱是霍乱(cholera)的病原体的病原体v霍霍乱乱是是一一种种急急性性烈烈性性消消化化道道传染染病病，，一一旦旦出出现流流行行，，在在人人群群中中扩散极散极为迅速迅速v自自1817年以来，人年以来，人类已已经经历了了7次世界性霍乱大流行次世界性霍乱大流行v霍霍乱乱弧弧菌菌有有两两种种血血清清群群与与大大流流行行相相关关，，即即O1血血清清群群和和O139血血清清群群。
O1血血清清群群的的古古典典生生物物型型(classical biotype)引引起起了了前前6次次霍霍乱乱大大流流行行,，，El Tor生生物物型型(El Tor biotype) 引引起起了了第第7次次霍霍乱乱大大流流行行（（1961年年））此此外外，，还发现新新的的流流行行株株O139（（1992年） 第一第一节 霍乱弧菌霍乱弧菌一、生物学性状一、生物学性状（一）形（一）形态与染色与染色§大小大小为0.5~0.8μm×1.5~3μm，菌体呈短小弧形或逗点状，菌体呈短小弧形或逗点状§革革兰染色阴性染色阴性§无无芽胞，有些菌株有芽胞，有些菌株有荚膜，有菌毛膜，有菌毛§菌体菌体一端有一根一端有一根单鞭毛，运鞭毛，运动非常活非常活泼§若若取取患患者者米米泔泔水水样粪便便或或培培养养物物作作悬滴滴观察察，，细菌菌呈呈穿穿梭梭样或或流流星星状状运运动，，粪便便标本本直直接接涂涂片片染染色色镜检，，呈呈现相相互互衔接接、、平行排列如平行排列如“鱼群群”状 第一第一节 霍乱弧菌霍乱弧菌（二）培养特性与生化反（二）培养特性与生化反应§兼兼 性性 厌 氧氧 ，， 营 养养 要要 求求 不不 高高 ，， 生生 长 繁繁 殖殖 的的 温温 度度 范范 围 大大(18℃℃~37℃℃)，，耐耐碱碱不不耐耐酸酸，，在在pH 8.8~9.0的的碱碱性性蛋蛋白白胨水水或或碱性碱性琼脂平板上生脂平板上生长良好，形成良好，形成圆形、光滑、透明的菌落形、光滑、透明的菌落。
§碱碱性性培培养养基基可可抑抑制制其其他他细菌菌的的生生长，，故故初初次次分分离离霍霍乱乱弧弧菌菌常常用此培养基增菌用此培养基增菌§霍霍乱乱弧弧菌菌过氧氧化化氢酶阳阳性性，，氧氧化化酶阳阳性性，，能能发酵酵葡葡萄萄糖糖、、蔗蔗糖、甘露醇，糖、甘露醇，产酸不酸不产气，能气，能还原硝酸原硝酸盐，，吲哚试验阳性 第一第一节 霍乱弧菌霍乱弧菌（三）抗原构造与分型（三）抗原构造与分型本菌有不耐本菌有不耐热的的H抗原和耐抗原和耐热的的O抗原抗原H抗原特异性抗原特异性较低，低，为弧菌属所共有弧菌属所共有O抗抗原原特特异异性性较高高根根据据O抗抗原原的的不不同同，，现分分为155个个血血清清群群O1和和O139群群引引起起霍霍乱乱，，O2~O138被被称称为非非Ol霍霍乱乱弧弧菌菌，，广广泛泛分分布布于于地地面面水水中中，，可可引引起起散散发性性轻型型腹腹泻泻和和胃胃肠炎炎O1群群霍霍乱乱弧弧菌菌的的O抗抗原原由由3种种抗抗原原因因子子组成成（（A、、B、、C）），，据据此此O1群群霍霍乱乱弧弧菌菌又又分分为3个个血血清清型型，，即即稻稻叶叶型型(Inaba)、、小小川川型型(Ogawa)、、彦彦岛型型(Hikojima)（（表表10-1））。
根根据据其其表表型型差差异异，，O1群群霍霍乱乱弧弧菌菌的的每每一一个个血血清清型型还可可分分为两两个个生生物物型型，，即即古古典典生生物物型型和和El Tor生生物型 第一第一节 霍乱弧菌霍乱弧菌 第一第一节 霍乱弧菌霍乱弧菌（四）抵抗力（四）抵抗力§对热及消毒及消毒剂抵抗力抵抗力较弱弱§55℃℃湿湿热15分分钟，，100℃℃煮煮沸沸l~2分分钟即即死死亡亡，，不不耐耐酸酸，，在在正正常胃酸中常胃酸中仅能存活能存活4分分钟§El Tor生生物物型型较古古典典生生物物型型抵抵抗抗力力强，，在在河河水水、、井井水水、、海海水水中可存活中可存活1~3周，有周，有时可越冬可越冬§以以1:4比比例例加加漂漂白白粉粉处理理患患者者排排泄泄或或呕呕吐吐物物，，1小小时可可达达到到消消毒目的 第一第一节 霍乱弧菌霍乱弧菌二、致病性与免疫性二、致病性与免疫性（一）致病物（一）致病物质1．霍乱．霍乱肠毒素毒素(cholera toxin，，CT) §O1和和O139 群霍乱弧菌均能群霍乱弧菌均能产生霍乱生霍乱肠毒素毒素§霍霍乱乱肠毒毒素素是是目目前前已已知知的的致致泻泻毒毒素素中中最最强的的，，是是肠毒毒素素的的典典型代表，同霍乱的型代表，同霍乱的发病及典型症状密切相关病及典型症状密切相关。
第一第一节 霍乱弧菌霍乱弧菌1．霍乱．霍乱肠毒素毒素(cholera toxin，，CT) §霍乱毒素霍乱毒素由由1个个A亚单位和位和5个相同的个相同的B亚单位位组成成§每每1个个B亚单位位分分子子量量为11.7KDa，，可可与与小小肠黏黏膜膜上上皮皮细胞胞GM1神神经节苷脂受体苷脂受体结合，介合，介导A亚单位位进入入细胞胞§A亚单位位分分子子量量为27.2KDa，，进入入细胞胞后后在在蛋蛋白白酶作作用用下下裂裂解解成成A1和和A2两两条条多多肽A1多多肽可可激激活活细胞胞内内腺腺苷苷酸酸环化化酶，，使使ATP转化化为cAMP§cAMP浓度度升升高高可可使使细胞胞主主动分分泌泌Na+、、K+、、HCO3 –，，导致致肠腔腔渗渗透透压增增加加，，大大量量水水分分由由细胞胞进入入肠腔腔，，引引起起严重重的的腹腹泻与呕吐泻与呕吐 第一第一节 霍乱弧菌霍乱弧菌二、致病性与免疫性二、致病性与免疫性（一）致病（一）致病物物质2．菌毛及鞭毛．菌毛及鞭毛 霍霍乱乱弧弧菌菌借借助助鞭鞭毛毛的的运运动可可穿穿过肠黏黏膜膜表表面面黏黏液液层到到达达上上皮皮细胞胞，，再借助菌毛黏附于上皮再借助菌毛黏附于上皮细胞刷状胞刷状缘的的绒毛上。
毛上 第一第一节 霍乱弧菌霍乱弧菌（二）所致疾病（二）所致疾病§引起烈性引起烈性肠道道传染病霍乱，染病霍乱，为我国甲我国甲类法定法定传染病染病§在在自然情况下，人自然情况下，人类是霍乱弧菌唯一易感者是霍乱弧菌唯一易感者§除除患者外，无症状感染者也是重要患者外，无症状感染者也是重要传染源染源§传播播途径主要是通途径主要是通过污染的水源或食物染的水源或食物经口口摄入入§因因较多多细菌菌进入机体才能引起霍乱，故人与人之入机体才能引起霍乱，故人与人之间的直接的直接传播不多播不多见 第一第一节 霍乱弧菌霍乱弧菌（二）所致疾病（二）所致疾病§霍乱霍乱的潜伏期的潜伏期为1天左右，但可短至数小天左右，但可短至数小时或或长至几天至几天§典型典型的病例一般在吞食的病例一般在吞食细菌后菌后2~3天突然出天突然出现剧烈腹泻和呕烈腹泻和呕吐，最吐，最严重重时每小每小时失水量可达失水量可达1升升§腹泻腹泻物多物多为水水样或米泔水或米泔水样，并出，并出现严重脱水、重脱水、电解解质紊乱紊乱和代和代谢性酸中毒性酸中毒§患者患者可死于可死于肾衰竭和休克，但若及衰竭和休克，但若及时补液和液和纠正正电解解质紊乱，紊乱，患者可在患者可在3~7天内恢复天内恢复。
§O139群霍乱弧菌感染比群霍乱弧菌感染比O1群重，成人感染率高群重，成人感染率高 第一第一节 霍乱弧菌霍乱弧菌（三）免疫性（三）免疫性§感染霍乱弧菌后机体可感染霍乱弧菌后机体可获得牢固的免疫力，再感染者少得牢固的免疫力，再感染者少见§免免疫疫力力主主要要来来自自抗抗菌菌抗抗体体，，尤尤其其是是肠道道局局部部sIgA可可能能发挥更更为重要的作用重要的作用§sIgA可可凝凝集集黏黏膜膜表表面面的的霍霍乱乱弧弧菌菌使使其其失失去去动力力，，或或与与菌菌毛毛结合合阻阻止止其其黏黏附附上上皮皮细胞胞，，或或与与霍霍乱乱毒毒素素B亚单位位结合合阻阻断断A亚单位位进入入细胞内胞内§O1群与群与O139群两个流行株没有相互交叉保群两个流行株没有相互交叉保护作用 第一第一节 霍乱弧菌霍乱弧菌三、微生物学三、微生物学检查法法霍乱是烈性霍乱是烈性传染病，病原学的染病，病原学的诊断断应快速、准确快速、准确一）（一）标本本患者的患者的粪便、肛拭或呕吐物便、肛拭或呕吐物二）直接（二）直接镜检取取粪便便标本直接做本直接做悬滴法滴法检查，可，可见运运动极极为活活泼的的细菌革兰染色后染色后可可见呈阴性的弧形菌呈阴性的弧形菌。
第一第一节 霍乱弧菌霍乱弧菌三、微生物学三、微生物学检查法法霍乱是烈性霍乱是烈性传染病，病原学的染病，病原学的诊断断应快速、准确快速、准确三）分离培养三）分离培养将将粪便或呕吐物接种于碱性蛋白便或呕吐物接种于碱性蛋白胨水或碱性水或碱性琼脂平板脂平板进行增菌霍乱弧行增菌霍乱弧菌菌较其他其他细菌生菌生长繁殖快，繁殖快，37℃℃孵育孵育6～～8h后可直接涂片后可直接涂片镜检，并分离，并分离培养，通培养，通过生化反生化反应及血清学及血清学鉴定定细菌及其血清型菌及其血清型 第一第一节 霍乱弧菌霍乱弧菌四、防治原四、防治原则§霍乱霍乱发病急、病急、传染快，故染快，故应重重视流行病学的平流行病学的平时监测一旦发现可疑患者，可疑患者，应及及时进行隔离治行隔离治疗，并，并对患者的排泄物和患者的排泄物和呕吐物呕吐物进行消毒行消毒处理，特理，特别要防止其要防止其污染水源及食品染水源及食品§疫苗疫苗研制的重点已研制的重点已转移至口服移至口服灭活疫苗或减毒性疫苗上，但活疫苗或减毒性疫苗上，但尚无理想的疫苗得以广泛尚无理想的疫苗得以广泛应用§在在补充液体及充液体及电解解质的同的同时，，应用抗生素以清除用抗生素以清除细菌，减少菌，减少外毒素的外毒素的产生。
在生在选用抗生素用抗生素时应考考虑到当地的耐到当地的耐药菌株，菌株，且且O139群群较O1群耐群耐药性性强 第二第二节 副溶血性弧菌副溶血性弧菌v副副溶溶血血性性弧弧菌菌（（V．．parahemolyticus））最最初初于于1950年在日本一次暴年在日本一次暴发性食物中毒中分离性食物中毒中分离发现v该菌菌为嗜嗜盐菌菌，，广广泛泛分分布布于于海海湾湾河河口口及及沿沿岸岸的的水水域域中中，，常常寄寄生生在在贝类、、鱼等等海海产品品中中本本菌菌可可引引起起食食物物中中毒毒和腹泻 第二第二节 副溶血性弧菌副溶血性弧菌v副副溶血性弧菌呈弧形、杆形或溶血性弧菌呈弧形、杆形或丝形，革形，革兰染色阴性染色阴性v本本菌菌与与霍霍乱乱弧弧菌菌相相比比较一一个个显著著的的特特点点是是嗜嗜盐，，在在含含有有3.5%NaCl培养基中最易生培养基中最易生长，无，无盐则不能生不能生长 第二第二节 副溶血性弧菌副溶血性弧菌v致病性的副溶血性弧菌可致病性的副溶血性弧菌可产生溶血毒素，具有破坏生溶血毒素，具有破坏红细胞及胞及细胞毒作用，胞毒作用，该毒素与致病性呈平行关系毒素与致病性呈平行关系v该菌菌经海海产品及品及盐腌品腌品传播，常播，常见的的为鱼、毛蚶、海、毛蚶、海蜇、蟹蜇、蟹类等等。
v进食食上述上述细菌菌污染的海染的海产品后，品后，经一段一段时间(潜伏期潜伏期为5~72小小时)发病病v主要主要症状症状为呕吐、腹泻、呕吐、腹泻、发热、、头痛及腹痛，痛及腹痛，粪便多便多为水水样，少数，少数为血水血水样 第二第二节 副溶血性弧菌副溶血性弧菌v病程病程较短，患者恢复短，患者恢复较快，病后免疫力不快，病后免疫力不强，可重复，可重复感染感染v本本病可病可经血清学血清学鉴定做病原体的定做病原体的诊断断v治治疗可可选用用庆大霉素、复方大霉素、复方SMZ-TMP等抗菌等抗菌药物。