免疫测定室内质控血清的运用免疫测定室内质控血清的运用张 瑞卫生部临床检验中心 免疫测定用室内质控血清的调整免疫测定用室内质控血清的调整 随着临床实验室检验程度的不断提高和检测试剂质量的不断改良，原有的室内质控物曾经不能满足室内质控任务的需求，因此部中心对免疫测定用室内质控血清的含量进展了调整，同时改良了包装 针对的检测工程针对的检测工程•HBsAg•抗HCV•抗HIV•梅毒螺旋体抗体提供不同含量的质控物是为了实验室根据不同试剂的检测值选择适宜的质控物，使质控物的检测值〔S/CO值〕在1.5～4之间 HBsAg质控血清定值的调整质控血清定值的调整HBsAg定值单位改动：2019年，WHO研制了第二代HBsAg规范物质，并将定值单位从ng/ml改为IU/ml现1IU/ml≈0.5ng/ml定值（调整前）定值（调整后）调整原因0.2IU/ml用于一些灵敏度较高的试剂0.5IU/ml0.5ng/ml1IU/ml 1ng/ml 2IU/ml 2ng/ml 4IU/ml5ng/ml 浓度较高≥1万ng/ml “钩状效应” HBsAg室内质控品的选用室内质控品的选用定值适用试剂0.2IU/mlMurex，生物梅里埃试剂0.5IU/mlOrtho，Bio-Rad试剂，雅培i2000和Axsym检测系统和配套试剂1IU/ml国产试剂盒（万泰、新创、科华……），血站和医院用2IU/ml国产试剂盒（万泰、新创、科华……），医院用4IU/ml国产试剂盒（万泰、新创、科华……），医院用 抗抗HCV质控血清定值的调整及选用质控血清定值的调整及选用定值（调整前）定值（调整后）适用试剂1NCU/ml国产试剂盒（万泰、新创、科华、丽珠……）和DiaSorin的试剂1NCU/ml2NCU/mlMurex、Ortho等试剂2NCU/ml 4NCU/ml雅培i2000和Axsym检测系统和配套试剂现1NCU/ml≈0.5NCU/ml 抗抗HIV质控血清定值的调整及选用质控血清定值的调整及选用定值（调整前）定值（调整后）适用试剂1NCU/ml国产试剂盒（万泰、新创、科华、丽珠……）1NCU/ml2NCU/mlBio-Rad等试剂2NCU/ml 4NCU/ml进口试剂及配套仪器4NCU/ml8NCU/ml进口试剂及配套仪器现1NCU/ml≈0.5NCU/ml1NCU/ml确实定：参考国际单位定值方法，采用确实定：参考国际单位定值方法，采用5种或以上试剂盒，结果种或以上试剂盒，结果63％的试剂盒〔按泊松分布计算〕检测结果为阳性的值为％的试剂盒〔按泊松分布计算〕检测结果为阳性的值为1NCU/ml。
梅毒螺旋体抗体定值的调整及选用梅毒螺旋体抗体定值的调整及选用定值（调整前）定值（调整后）适用试剂1NCU/ml（特异）国产试剂盒2NCU/ml（特异）国产试剂盒2NCU/ml（特异） 4NCU/ml（特异）进口试剂及/或配套仪器2NCU/ml（非特异）2NCU/ml（非特异）RPR、TRUST现1NCU/ml≈0.25NCU/ml 本卷须知本卷须知•室内质控物仅用于相应工程的室内质量控制，不能用于阴阳性结果的判别•定值质控物不适宜评价试剂盒整体性能能否合格,但可用于试剂的批内、批间变异和测定下限的评价质检假设需求对试剂进展比较评价和全面质检请选用相应工程的临床考核血清盘 临床考核血清盘临床考核血清盘项目项目规格规格支数/套HBsAg0.5ml/支40抗HCV0.25ml/支40梅毒螺旋体抗体 0.5ml/支40 HBsAg血清盘血清盘l灵敏度l特异性lHBsAg变异的检测才干：如G145R等lHook效应导致的假阴性 样本样本编号编号含量含量(IU/ml)A（（S/CO)B（（S/CO)C（（S/CO)D （（S/CO)E（（S/CO)16~80.20.40.49.57.328~101.00.70.49.814.910﹥200000040.837.636.227.124.116约约160000040.043.941.047.135.08阴性 阴性 20.91.50.40.70.719阴性 阴性 9.47.719.20.40.427阴性 阴性 16.60.30.80.50.6360.5-1.01.61.62.97.38.5370.5-1.01.11.33.03.86.838约约0.20.60.81.82.43.9390.2-0.50.20.60.91.13.0HBsAg血清盘血清盘 抗抗HCV血清盘血清盘l不同试剂厂家的不同试剂厂家的ELISAELISA试剂盒所用包被抗原的差别：试剂盒所用包被抗原的差别：目前抗目前抗HCVHCV检测检测ELISAELISA试剂盒均采用试剂盒均采用HCVHCV的基因工程或的基因工程或合成多肽抗原〔中心区、合成多肽抗原〔中心区、NS3NS3、、NS4NS4和和NS5NS5等〕包被固等〕包被固相，以间接法进展测定，上述相，以间接法进展测定，上述HCVHCV抗原的组合、来源抗原的组合、来源及用量等方面的差别而呵斥检测结果不一致。
及用量等方面的差别而呵斥检测结果不一致 l抗抗HCV ELISAHCV ELISA出现假阳性的主要缘由有：出现假阳性的主要缘由有：l 1. 1.类风湿因子〔类风湿因子〔RFRF〕的干扰〕的干扰l 2. 2.高免疫球蛋白血症高免疫球蛋白血症l 3. 3.标本中超氧化物歧化酶〔标本中超氧化物歧化酶〔SODSOD〕的干扰〕的干扰l 4. 4.用于固相包被的用于固相包被的HCVHCV基因工程抗原不纯基因工程抗原不纯 抗抗HCV血清盘血清盘样本样本编号编号ABCDEFG RIBA NS4NS3CNS5281.221.870.650.780.770.67<0.3–+±+337.8311.96.324.286.24.760.62±++––340.920.680.610.841.140.65<0.3++–±356.414.111.862.992.812.040.34–++–381.62.061.860.681.682.051.38±+±±152.42 0.820.550.65 0.5 0.5 0.5–––– 检测方法1.检测非特异性抗体----运用类脂质抗原的血清学实验 ：RPR、TRUST2.检测特异性抗体----运用密螺旋体抗原的血清学实验：FTA-ABS、TPHA、TPPA 、ELISA 、WB梅毒螺旋体抗体血清盘梅毒螺旋体抗体血清盘 梅毒螺旋体抗体血清盘梅毒螺旋体抗体血清盘TP14TP17TP45TP47EUIgMEUIgGA(OD值)BC(OD值)D(OD值)RPR胶体金胶体金1++++++0.090.7363.19927.353.7763.604+++++4+++++++++++++++++ ++0.3350.964.04127.612.1692.006+++++7+++++++++++++++++ ++0.2561.120.65431.241.2150.978+++++23+++++/-+++++++++/-+++++0.2251.133.94830.241.8971.367++++33+++++0.1600.082 1.329 0.90 0.027 0.662 +–Hook效应 原倍原倍1：：101：：201：：401：：801：：16013.3572.9462.0991.4280.9360.49042.2772.2561.9701.6151.0600.60371.7033.0662.9383.0233.1252.289232.3603.0892.8842.9752.2581.481梅毒螺旋体抗体血清盘梅毒螺旋体抗体血清盘1、4、7、23号血清稀释结果显示存在hook效应。
IgM抗体漏检梅毒螺旋体抗体血清盘梅毒螺旋体抗体血清盘TP14TP17TP45TP47EUIgMEUIgGA(OD值)BC(OD值)D(OD值)RPR胶体金胶体金1++++++0.090.7363.19927.353.7763.604+++++4+++++++++++++++++ ++0.3350.964.04127.612.1692.006+++++7+++++++++++++++++ ++0.2561.120.65431.241.2150.978+++++23+++++/-+++++++++/-+++++0.2251.133.94830.241.8971.367++++33+++++0.1600.082 1.329 0.90 0.027 0.662 +– 运用方法运用方法质控血清都控血清都经过灭活活处置，但仍置，但仍应按照有潜在生物按照有潜在生物传染性染性样本本对待HBsAgHBsAg，抗，抗HCVHCV，抗，抗HIVHIV，梅毒螺旋体抗体的，梅毒螺旋体抗体的质控血清加控血清加样时按待按待测病人原始病人原始样本本对待，按照待，按照试剂盒盒阐明明书进展操作实验室收到血清后室收到血清后应将血清保管在将血清保管在–18℃–18℃以下，保以下，保质期期为1 1年。
运用年运用时将血清在室温复融，将血清在室温复融，应留意待血清完全留意待血清完全融化后平衡至室温并充分混匀复融后的血清假融化后平衡至室温并充分混匀复融后的血清假设当当日未运用完且无日未运用完且无污染，可保管在染，可保管在2–8℃2–8℃，限，限1 1周内用完，周内用完，防止反复防止反复冻融和重新分装融和重新分装质控血清控血清样本 谢谢 谢！谢！ 。