一、菊花的组织培养 一、菊花的组织培养 1.植物组织培养技术的原理：细胞全能性细胞全能性 3.实验操作步骤： 制备 MS固体培养基固体培养基→外植体→ 消毒消毒→接种→培养 →移栽移栽 →栽培 4.影响因素 （1）材料选择：一般选择未开花植物的茎上部新萌生新萌生的侧枝的侧枝，容易诱导脱分化和再分化脱分化和再分化 （2）营养供应：常用的培养基是MSMS培养基培养基，一般需要添加生长素生长素和细胞分裂素细胞分裂素两种植物激素 5.植物激素在植物组织培养中的作用 生长素/细胞分裂素比值高时，有利于根的分化根的分化；比值低时，有利于芽的分化芽的分化 二、月季的花药培养 二、月季的花药培养 1.理论基础：花粉具有全能性全能性 3.产生花粉植物的两种途径 （1）花粉通过胚状体胚状体 阶段发育为植株（2）花粉在诱导培养基上先形成 愈伤组织愈伤组织，再将其诱导分化成植株 4.影响花药培养的因素：材料的选择材料的选择和培养基的组成培养基的组成是主要的影响因素；对大多数植物而言，适宜进行花药培养的时期是单核期单核期 5.实验成功的关键因素 （1） 材料的选择：确定花粉发育时期最常用的方法是 醋酸洋红法醋酸洋红法 。
（2）无菌技术：如果出现了污染污染现象，说明某些操作步骤，如 培养基灭菌培养基灭菌 、花蕾消毒或 接种接种等有问题 （3）接种：接种的花药长出愈伤组织愈伤组织或释放出胚状体胚状体 ，花药培养的第一步就成功了 （4）培养：温度温度、水分等条件适宜要适时 转换培转换培养基养基 ，以便愈伤组织或胚状体进一步分化成再生植株 植物组织培养的有关概念 1.外植体：是指用于离体培养的植物器官或组织 2.愈伤组织：是指离体的植物组织或细胞，在培养了一段时间以后，通过脱分化形成的不定形的薄壁细胞 3.细胞分化、脱分化和再分化 （1）细胞分化：是指植物个体发育过程中，细胞在形态、结构和生理功能上产生稳定性差异的过程 （2）脱分化：是指由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程，又叫做去分化 （3）再分化：是指脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成根或芽等器官的过程 4.脱分化和再分化的比较 5.植物组织培养的培养基 (1)植物组织培养常用的一种培养基是MS培养基，除了大量元素、微量元素、有机物等，另外还要添加植物激素MS培养基中微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的无机盐；蔗糖提供碳源，同时能够维持细胞的渗透压；甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响后所产生的特殊营养需求。
(2)灭菌方式：高压蒸汽灭菌 (3)MS培养基与微生物培养基的比较:微生物培养基以有机营养为主，而MS培养基则需提供大量无机营养 植物组织培养的过程1.菊花的组织培养过程2.月季的花药培养过程 3.植物组织培养和花药离体培养技术的比较 4.无菌技术是植物组织培养能否获得成功的关键无菌技术是植物组织培养能否获得成功的关键 （1）必要性：由于植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差，所以对培养条件的要求较高 （2）范围：包括培养基灭菌和植物材料（外植体）的消毒对培养材料进行表面消毒时，一方面要考虑药剂的消毒效果；另一方面还要考虑植物材料的耐受能力不同药剂、不同植物材料，甚至不同器官要区别对待 （3）污染情况的分析：接种3～4 d后，在接种操作中被杂菌污染的培养物会表现出被污染的现象 植物激素在植物组织培养中的作用 启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键因素是生长素和细胞分裂素 （1）使用顺序不同，结果不同 （2）用量比例不同，结果不同 通过植物组织培养技术可以快速繁殖、生产药物及培育无病毒的植物等据下图和表回答问题 表 植物的花芽分别在含有不同比例的吲哚乙酸和细胞分裂素的培养基中的生长状况 （1）离体的植物器官、组织或细胞能够被培养成新的植物体的原因是 。
（2）用植物组织培养方法诱导离体的植物组织形成具有生根发芽能力的胚状体结构，若包上人造种皮，制成人工种子，可能解决有些作物品种繁殖能力差、结子困难或发芽率低等问题胚状体来源于离体的植物体细胞，其形成过程中要经过的生理变化大体上是图中[ ] 和[ ] 过程，在此过程中被培养的细胞始终受 的调节（［ ］内填序号） （3）应用植物组织培养技术培养茎尖或根尖组织可获得无病毒植株，其原因是 （4）从表中的实验结果可看出：吲哚乙酸和细胞分裂素是实验中的两种重要物质其中，新芽形成必需的条件是 ；而在培养形成完整新个体的过程中，对它们的调控关键是 植物组织培养利用细胞全能性的原理，在离体状态下经脱分化和再分化形成胚状体，进一步发育成新植株或被包以人造种皮，制成人工种子在此过程中细胞分裂素和吲哚乙酸起着调节作用细胞分裂素浓度较高时，诱导丛芽的产生，吲哚乙酸浓度较高时，诱导根的产生对它们的调控关键是适当控制好不同培养期的培养基中细胞分裂素与吲哚乙酸的浓度及二者的比例 （1）植物细胞具有全能性 （2）［①］脱分化 ［②］再分化 植物激素（3）植物的茎尖或根尖很少被病毒感染，甚至无病毒（4）细胞分裂素的浓度大于吲哚乙酸的浓度 适当调控好不同培养期的培养基中细胞分裂素与吲哚乙酸的浓度和它们的比例 。
