《马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基配制 (2)》由会员分享，可在线阅读，更多相关《马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基配制 (2)（24页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、实验一实验一马铃薯葡萄糖琼脂（马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）培养基配制培养基配制一、食用菌菌种种类一、食用菌菌种种类 人工培育的菌种有母种、原种和栽培种之分。人工培育的菌种有母种、原种和栽培种之分。1）母母种种（一一级级菌菌种种）：用用孢孢子子分分离离或或组组织织分分离等培育的菌丝体称为母种。离等培育的菌丝体称为母种。2）原原种种（二二级级菌菌种种）：把把母母种种扩扩大大到到木木屑屑、棉籽壳等为主的培养料上的菌种称为原种。棉籽壳等为主的培养料上的菌种称为原种。3）栽栽培培种种（三三级级菌菌种种）：由由原原种种扩扩大大培培养养成成为生产上使用的菌种称为栽培种。为生产上使用的菌种称为栽培种。4）菌菌种
2、种：实实质质上上就就是是经经过过人人工工培培养养并并进进一一步步繁殖的食用菌的纯菌丝体。繁殖的食用菌的纯菌丝体。 二、食用菌的制种程序二、食用菌的制种程序组织分离组织分离接种接种母种（一级）母种（一级） 接种接种 原种（二级）原种（二级） 接种接种栽培种（三级）栽培种（三级）种菇种菇孢子分离孢子分离 经过这样三级培养，食用菌菌丝数量大大增加。经过这样三级培养，食用菌菌丝数量大大增加。 一一般般1支支试试管管菌菌种种可可繁繁殖殖46瓶瓶原原种种，每每瓶瓶原原种种又又可扩大繁殖可扩大繁殖60100瓶栽培种。瓶栽培种。培养培养培养培养母母 种种原种和原种和栽培种栽培种三、菌种生产常用的设备和用具三、
3、菌种生产常用的设备和用具1、接种设备、接种设备 接种室接种室 接种箱接种箱 超净工作台超净工作台超净工作台2、灭菌设备、灭菌设备1）手提式：）手提式：容量小，适于斜面试容量小，适于斜面试管及玻璃器皿等；管及玻璃器皿等；2）立式）立式： 容量大，投资大；容量大，投资大；3）卧式）卧式：容量大，投资大；：容量大，投资大；4）家用）家用24或或26 cm压力锅：压力锅：母种、母种、原种培养基原种培养基 。高高压压蒸蒸气气灭灭菌菌锅锅优点：省时、省燃料、优点：省时、省燃料、 效果好效果好 2）、）、3）一般在菌种场或研究所应用。）一般在菌种场或研究所应用。三、菌种生产常用的设备和用具三、菌种生产常用的
4、设备和用具灭菌设备灭菌设备高压蒸气灭菌锅高压蒸气灭菌锅2、灭菌设备、灭菌设备常压灭菌锅常压灭菌锅 目目前前农农村村生生产产栽栽培培种种的的必必备备设设备备，实实际际上上是是一一种种大大型型蒸蒸笼笼式式煮煮灶灶。底底部部为为铸铸铁铁大大锅锅，上上部部为为圆圆形形木木桶桶，桶桶内内装装数数层层供供放放培培养养基基的的格格架架。桶桶盖盖装装有有活活络络搭搭及及密密闭闭的的橡橡皮皮圈圈，由由于于锅锅内内温温度度最最高高是是100，所所以以灭灭菌菌时时间间需需维维持持1012h，才能达到灭菌效果。才能达到灭菌效果。三、菌种生产常用的设备和用具三、菌种生产常用的设备和用具 培养室培养室 生化培养箱生化培养
5、箱 3、培养设备、培养设备三、菌种生产常用的设备和用具三、菌种生产常用的设备和用具4、培养菌种的容器、培养菌种的容器母母 种种 ： 试试 管管 ， 常常 用用 规规 格格 20180200mm，18180mm等。等。 原种、栽培种原种、栽培种菌种瓶：盐水瓶、罐头瓶菌种瓶：盐水瓶、罐头瓶菌种袋菌种袋聚丙稀袋聚丙稀袋聚乙稀袋聚乙稀袋规格有：规格有：12153035 cm，173545 cm 三、菌种生产常用的设备和用具三、菌种生产常用的设备和用具菌种瓶菌种瓶5、接种工具、接种工具 移移植植菌菌种种于于培培养养基基上上的的工工具具称称接接种种工工具，主要有以下几种：具，主要有以下几种：接种针、环、刀
6、、钩、铲、锄、枪等；接种针、环、刀、钩、铲、锄、枪等； 三、菌种生产常用的设备和用具三、菌种生产常用的设备和用具 70%酒精：一般用于手、种菇表面消毒；酒精：一般用于手、种菇表面消毒； 0.1%升升汞汞：常常用用于于玻玻璃璃器器皿皿、非非金金属属器器械械及种菇表面消毒；及种菇表面消毒； 0.1%KMnO4：一般用于用具、器皿消毒；一般用于用具、器皿消毒；6、常用的消毒药品、常用的消毒药品三、菌种生产常用的设备和用具三、菌种生产常用的设备和用具 5%石石炭炭酸酸：喷喷洒洒墙墙壁壁、地地面面及及擦擦洗洗桌桌面面等等，也也可用来苏尔代替；可用来苏尔代替； 2%来苏尔、新洁尔灭：用法同上；来苏尔、新洁
7、尔灭：用法同上；甲甲醛醛（福福尔尔马马林林）：用用于于菇菇房房和和接接种种箱箱等等空空气气消消毒；毒；方法：关闭门窗消毒，自行气化；方法：关闭门窗消毒，自行气化；用量：用量：10ml甲醛甲醛5g KMnO4立方米。立方米。 6、常用的消毒药品、常用的消毒药品三、菌种生产常用的设备和用具三、菌种生产常用的设备和用具四、母种生产技术四、母种生产技术 食食用用菌菌母母种种培培养养基基的的种种类类繁繁多多，由由于于不不同同营营养养类类型型的的食食用用菌菌对对营营养养物物质质的的要要求求不不同同，所所以以，在在培培养养不不同同食食用用菌菌母母种种时时，应应选选择择适适宜宜该该菌菌种种的的培培养基。养基。
8、 母母种种培培养养基基要要求求营营养养丰丰富富、完完全全、氮氮源源、维维生生素的比例应高。素的比例应高。 现将食用菌常用的母种培养基列举如下现将食用菌常用的母种培养基列举如下 ：（一）母种培养基（一）母种培养基马铃薯葡萄糖琼脂培养基（马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA） 马马铃铃薯薯200g、葡葡萄萄糖糖（或或蔗蔗糖糖）20g、琼琼脂脂20g、H2O 1000 mL、pH 6.5。 适适用用于于一一般般食食用用菌菌母母种种分分离离与与培培养养，但但草草菇、猴头菌等在此培养基上生长不良。菇、猴头菌等在此培养基上生长不良。 四、母种生产技术四、母种生产技术综合马铃薯培养基综合马铃薯培养基 马马 铃铃
9、薯薯 200g、 葡葡 萄萄 糖糖 （ 或或 蔗蔗 糖糖 ） 20g、KH2PO4 2g、MgSO4 0.5g、维维生生素素B1 10mg、琼脂琼脂20g、H2O 1000ml、pH自然。自然。适适合合培培养养草草菇菇、猴猴头头菌菌、灵灵芝芝及及各各种种食食用用菌菌菌菌种分离、保藏。种分离、保藏。四、母种生产技术四、母种生产技术胡萝卜葡萄糖琼脂培养基胡萝卜葡萄糖琼脂培养基 胡胡萝萝卜卜200g、葡葡萄萄糖糖（或或蔗蔗糖糖）1820g、琼脂琼脂20g、H2O 1000ml、pH自然。自然。四、母种生产技术四、母种生产技术 PDA培养基配制方法培养基配制方法 马铃薯（去皮、去芽眼）马铃薯（去皮、去
10、芽眼）切成片（玉米大小）切成片（玉米大小）称取称取200g1000mL H2O煮沸煮沸15-20min 双层纱布双层纱布过滤过滤取滤液并补足取滤液并补足1000mL琼脂琼脂熔化其它营熔化其它营养物质养物质调节调节pH（用（用HCl或或NaOH）分装试管分装试管塞塞上棉塞上棉塞捆扎捆扎灭菌（高压蒸气灭菌灭菌（高压蒸气灭菌15-30min）制制成斜面成斜面检查灭菌效果（即检查灭菌效果（即2830培养培养23d） （3） 作业作业（1）每人制）每人制5支试管斜面。支试管斜面。（2）什么叫食用菌菌种？它又有哪些类型？）什么叫食用菌菌种？它又有哪些类型？（3）食用菌菌种生产常用的设备和用具有哪些？）食用菌菌种生产常用的设备和用具有哪些？（4）写出食用菌的制种程序。）写出食用菌的制种程序。（5）常用的消毒药品有哪些？）常用的消毒药品有哪些？
