医学专题—肝功能检验讲诉9605

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1、第十三章第十三章 肝功能检验肝功能检验(jinyn)Department of Clinical Department of Clinical Department of Clinical Department of Clinical Laboratory BiochemistryLaboratory BiochemistryLaboratory BiochemistryLaboratory Biochemistry 第一页，共六十八页。n本章内容本章内容(nirng)概要：概要：n本章本章(bn zhn)教学要求：教学要求： 掌握掌握: :黄疸黄疸的发生的发生(fshng)机理、类型及实验室

2、鉴别诊断机理、类型及实验室鉴别诊断要点；要点；肝功能实验生化检查指标肝功能实验生化检查指标的种类和重点项目的测的种类和重点项目的测定方法及评价。定方法及评价。 熟悉熟悉: :肝脏的生物化学功能，胆红素代谢；各测定肝脏的生物化学功能，胆红素代谢；各测定项目的临床意义。项目的临床意义。 了解了解：肝脏的基本机构；肝功能实验项目选择的肝脏的基本机构；肝功能实验项目选择的原则。原则。 第二页，共六十八页。第一节第一节 概概 述述n肝脏结构肝脏结构n肝脏的生化功能肝脏的生化功能n肝脏疾病肝脏疾病(jbng)的生化改变的生化改变第三页，共六十八页。一、肝脏一、肝脏(gnzng)结构结构（一（一 ）解剖学特

3、点）解剖学特点(tdin)双重双重(shungchng)(shungchng)血液供应血液供应 腹主动脉的分技肝动脉腹主动脉的分技肝动脉 氧氧 门静脉门静脉 营养营养 双重输出管道双重输出管道 肝静脉肝静脉 代谢降解物代谢降解物 下腔静脉下腔静脉 胆道系统胆道系统 脂溶性物质及其代谢产物脂溶性物质及其代谢产物 体外体外 第四页，共六十八页。（二（二 ）肝脏）肝脏(gnzng)的显微结构特点的显微结构特点1 1、组织、组织(zzh)(zzh)结构结构2 2、亚细胞、亚细胞(xbo)(xbo)结构结构（三（三 ）细胞的再生）细胞的再生第五页，共六十八页。二、肝脏的生物化学二、肝脏的生物化学(shn

4、 w hu xu)功能功能排泄功能排泄功能(gngnng)物质代谢功能物质代谢功能生物转化生物转化重要重要(zhngyo)生化功能生化功能第六页，共六十八页。（一）排泄（一）排泄(pixi)功能功能主要排泄主要排泄(pixi)对象：胆汁酸、胆红素、氨对象：胆汁酸、胆红素、氨1 1、胆汁酸代谢、胆汁酸代谢(dixi)(dixi)胆汁功能胆汁功能胆汁的来源：胆汁的来源：肝胆汁肝胆汁 胆囊胆汁胆囊胆汁 十二指肠十二指肠胆汁的成分：胆汁的成分： 水水/ /胆汁酸（盐）、卵磷脂、蛋白质、胆汁酸（盐）、卵磷脂、蛋白质、脂肪酸和胆固醇脂肪酸和胆固醇第七页，共六十八页。（2 2）胆汁酸生成）胆汁酸生成(shn

5、 chn)(shn chn)及种类：及种类：初级初级初级初级(chj)(chj)(chj)(chj)胆汁酸（肝细胞）胆汁酸（肝细胞）胆汁酸（肝细胞）胆汁酸（肝细胞） 次级胆汁酸（肠道）次级胆汁酸（肠道）次级胆汁酸（肠道）次级胆汁酸（肠道）初级初级(chj)(chj)(chj)(chj)游离胆汁酸游离胆汁酸初级结合胆汁酸初级结合胆汁酸（甘氨酸（甘氨酸（甘氨酸（甘氨酸/ / / /牛磺酸）牛磺酸）牛磺酸）牛磺酸）次级游离胆汁酸次级游离胆汁酸次级游离胆汁酸次级游离胆汁酸次级结合胆汁酸次级结合胆汁酸次级结合胆汁酸次级结合胆汁酸（甘氨酸（甘氨酸（甘氨酸（甘氨酸/ / / /牛磺酸）牛磺酸）牛磺酸）牛磺酸

6、）第八页，共六十八页。（3 3）胆汁酸肝肠）胆汁酸肝肠(n chn)(n chn)循环：循环：（4 4）胆汁酸的功能）胆汁酸的功能(gngnng)(gngnng)：促进脂类消化促进脂类消化促进脂类吸收促进脂类吸收抑制胆固醇从胆汁中析出抑制胆固醇从胆汁中析出(xch)沉淀沉淀游离型胆汁酸游离型胆汁酸游离型胆汁酸游离型胆汁酸结合型胆汁酸结合型胆汁酸结合型胆汁酸结合型胆汁酸第九页，共六十八页。2 2、胆红素代谢、胆红素代谢(dixi)(dixi)胆色素胆色素 尿胆素原尿胆素原 粪胆素原粪胆素原尿胆素尿胆素粪胆素粪胆素胆绿素胆绿素胆红素胆红素胆素原胆素原第十页，共六十八页。第十一页，共六十八页。3 3

7、、血氨代谢、血氨代谢(dixi)(dixi)药物药物(yow)及体内含氮物质及体内含氮物质（如嘌呤、嘧啶等）（如嘌呤、嘧啶等）来源来源(liyun)去路相对平衡相对平衡第十二页，共六十八页。部位(bwi)肝脏细胞鸟氨酸鸟氨酸瓜瓜氨氨酸酸瓜氨酸瓜氨酸精氨酸代琥珀酸精氨酸代琥珀酸ATPAMP+PPi延延胡胡索索酸酸鸟氨酸鸟氨酸精氨酸精氨酸H2O尿素尿素(nio s)(nio s)天门冬氨酸天门冬氨酸NH3CO2氨氨甲甲酰酰磷磷酸酸(ln sun)+H2O尿素循环尿素循环第十三页，共六十八页。（二）物质代谢（二）物质代谢(dixi)功能功能1 1、营养物质代谢、营养物质代谢(dixi)(dixi)(

8、1)(1)在在蛋白质蛋白质代谢代谢(dixi)(dixi)中的作用中的作用(2)(2)在在氨基酸氨基酸代谢中的作用代谢中的作用(3)(3)在在糖代谢糖代谢中的作用中的作用(4)(4)在在脂代谢脂代谢中的作用中的作用第十四页，共六十八页。2 2、激素、激素(j s)(j s)及维生素代谢及维生素代谢激素的灭活激素的灭活多种维生素的储存多种维生素的储存(chcn)与转化与转化 第十五页，共六十八页。（三）肝脏（三）肝脏(gnzng)的生物转化的生物转化n定义定义(dngy)： n转化转化(zhunhu)对象：对象：药物、毒物、致癌物药物、毒物、致癌物n转化过程：转化过程：氧化、还原、水解、结合氧化

9、、还原、水解、结合n生理意义：生理意义：第十六页，共六十八页。三、肝脏疾病的生化三、肝脏疾病的生化(shn hu)改变改变（一）胆红素代谢（一）胆红素代谢(dixi)障碍（黄疸）障碍（黄疸）n定义定义(dngy)(dngy): :n黄疸分类黄疸分类: : 黄疸黄疸? ? 阻塞性黄疸阻塞性黄疸 溶血性黄疸溶血性黄疸肝细胞性黄疸肝细胞性黄疸高胆红素血症高胆红素血症? ?第十七页，共六十八页。第十八页，共六十八页。（二）胆汁酸代谢（二）胆汁酸代谢(dixi)障碍障碍1 1、胆汁酸合成障碍、胆汁酸合成障碍2 2、胆汁酸向肠道排出障碍、胆汁酸向肠道排出障碍3 3胆汁酸肠肝循环紊乱胆汁酸肠肝循环紊乱(wn

10、lun)(wnlun)4 4胆汁瘀积病变时胆汁酸代谢紊乱胆汁瘀积病变时胆汁酸代谢紊乱 第十九页，共六十八页。（三）血浆（三）血浆(xujing)酶异常酶异常1 1肝脏合成酶类肝脏合成酶类: :胆碱脂酶、凝血因子、铜蓝蛋白；胆碱脂酶、凝血因子、铜蓝蛋白；2.2. 肝细胞内酶肝细胞内酶: : ALT、AST 3 3肝脏阻塞性疾病肝脏阻塞性疾病(jbng)(jbng)酶活性改变酶活性改变：ALP、GGT4 4肝硬化疾病酶活性改变肝硬化疾病酶活性改变：单胺氧化酶（单胺氧化酶（MAOMAO） （四）血浆蛋白（四）血浆蛋白(dnbi)异常异常 第二十页，共六十八页。第二节第二节 肝功能试验肝功能试验(sh

11、yn)n血清血清(xuqng)（浆）蛋白（浆）蛋白n测定血清酶测定测定血清酶测定n血清胆红素测定血清胆红素测定n血清胆汁酸测定血清胆汁酸测定n血氨测定血氨测定第二十一页，共六十八页。一、血清一、血清(xuqng)（浆）蛋白测定（浆）蛋白测定（一）总蛋白、白蛋白、及白蛋白（一）总蛋白、白蛋白、及白蛋白/ /球蛋白（球蛋白（A/GA/G）比值）比值(bzh)(bzh)测定测定 1 1总蛋白总蛋白(dnbi)(dnbi)测定测定 化学法化学法( (双缩脲法双缩脲法 ) )、物理法、染料结合法、电泳法、物理法、染料结合法、电泳法 染料结合法染料结合法(BCG(BCG、BCPBCP）、沉淀法、沉淀法 2

12、.2.白蛋白测定白蛋白测定 3 3A/GA/G比值比值 第二十二页，共六十八页。【参考参考(cnko)范围范围】总蛋白总蛋白(dnbi)(dnbi) 606080g/L 80g/L 白蛋白白蛋白 353555g/L55g/L球蛋白：球蛋白：151532g/L A/G32g/L A/G比值比值:1.5:1.52.0/12.0/1【临床意义临床意义】 血中白蛋白（总蛋白浓度）减少: 见于严重(ynzhng)肝 病(?）、肾病（?） A/G比值减少与A/G比值倒置：表示肝功能损 害严重。第二十三页，共六十八页。（二）纤维蛋白（二）纤维蛋白(xin wi dn bi)(xin wi dn bi)原测定

13、原测定 （凝血因子（凝血因子） 测定方法：测定方法：分为分为(fn wi)(fn wi)三大类三大类 根据纤维蛋白根据纤维蛋白(xin wi dn bi)(xin wi dn bi)原的生物学特性测定方法原的生物学特性测定方法 根据纤维蛋白原理化性质而建立的测定方法。根据纤维蛋白原理化性质而建立的测定方法。 根据纤维蛋白原免疫学特点而建立的测定方法。根据纤维蛋白原免疫学特点而建立的测定方法。 【参考范围】2.224.22g/L(热沉淀比浊法)【临床意义】 (1) (1) 纤维蛋白原增加：纤维蛋白原增加：感染；感染；无菌炎症；无菌炎症；其它。其它。(2) (2) 纤维蛋白原减少纤维蛋白原减少:

14、: 严重的肝脏疾病；严重的肝脏疾病； 其它疾病引起纤维蛋白原减少的疾病。其它疾病引起纤维蛋白原减少的疾病。第二十四页，共六十八页。（三）甲胎蛋白（三）甲胎蛋白（1-fetoprotein1-fetoprotein，AFPAFP）测定）测定(cdng)(cdng) 测定方法：测定方法：【参考范围参考范围】成人成人101030g/L 30g/L 、400g/L400g/L作为肝癌作为肝癌(n i)(n i)诊断标准诊断标准 【临床意义临床意义】 酶联免疫吸附法、放射免疫分析法、酶联免疫吸附法、放射免疫分析法、斑点免疫结合法、火斑点免疫结合法、火箭电泳箭电泳(din yn)(din yn)放射自显影

15、法、酶联火箭电泳放射自显影法、酶联火箭电泳(din yn)(din yn)法等法等 (1) (1) 原发性肝细胞肝癌的诊断标：原发性肝细胞肝癌的诊断标：400g/L(400ng/ml) 400g/L(400ng/ml) ； (2)(2)活动性急、慢性肝炎、肝硬化或其它肝病病人的诊断活动性急、慢性肝炎、肝硬化或其它肝病病人的诊断第二十五页，共六十八页。（四）其它（四）其它(qt)(qt)【临床意义临床意义】肝豆状核变性（肝豆状核变性（WilsonWilson病）和遗传性色素病）和遗传性色素(s s)(s s)沉积症沉积症1.1.铜蓝蛋白铜蓝蛋白(dnbi)(dnbi)测定测定 【参考范围参考范围

16、】 52.952.9167.7 IU/L167.7 IU/L【临床意义临床意义】 遗传性血色素沉积症铁沉积遗传性血色素沉积症铁沉积2 2转铁蛋白转铁蛋白【原理原理】双联吡啶法双联吡啶法 【原理原理】铜蓝蛋白具有氧化酶活性铜蓝蛋白具有氧化酶活性 【参考范围参考范围】 TIBC TIBC 男男 505077mol/L 77mol/L 女女5454 77mol/L , 77mol/L , 转铁蛋白饱和度为转铁蛋白饱和度为33.0%33.0%35.0%35.0% 第二十六页，共六十八页。 二、血清二、血清(xuqng)酶测定酶测定（1 1） ALTALT的测定的测定(cdng)(cdng)（赖氏法）（

17、赖氏法） 原理：原理：丙氨酸丙氨酸+-+-酮戊二酸酮戊二酸 谷氨酸谷氨酸+ +丙酮酸丙酮酸 37 、pH7.4 ALTn丙酮酸丙酮酸+2+2，4-4-二硝基苯肼二硝基苯肼 2 2，4-4-二硝基苯腙二硝基苯腙 第二十七页，共六十八页。（2 2）方法评价）方法评价赖氏法的实验结果赖氏法的实验结果(ji gu)(ji gu)需与卡门分光法需与卡门分光法的结果的结果(ji gu)(ji gu)对比后求出；对比后求出；NaOHNaOH的浓度对显色有影响；的浓度对显色有影响；该法的重复性差。该法的重复性差。第二十八页，共六十八页。 卡门氏单位卡门氏单位：1.0ml1.0ml血清在血清在2525，340n

18、m340nm，反应体积，反应体积3.0ml,3.0ml,光径光径1.0cm1.0cm时每分钟测定时每分钟测定(cdng)(cdng)吸光度下降吸光度下降0.0010.001，即消耗，即消耗4.82 4.82 10 10-4-4mol NADHmol NADH为一个卡门氏单位为一个卡门氏单位第二十九页，共六十八页。【参考参考(cnko)(cnko)范围范围】 5 52525卡门氏单位卡门氏单位 【临床意义临床意义】(2) (2) 慢性慢性(mn xng)(mn xng)活动性肝炎或脂肪肝：活动性肝炎或脂肪肝：(1) (1) 肝细胞损伤肝细胞损伤(snshng)(snshng)的灵敏指标的灵敏指标

19、: :ALTALT轻度增高轻度增高(100(100200IU),200IU),或属正常范围或属正常范围. .第三十页，共六十八页。ALTALT测定连续监测测定连续监测(jin c)(jin c)法（速率法法（速率法）原理原理(yunl)(yunl)：L-L-丙氨酸丙氨酸+-+-酮戊二酸酮戊二酸 L-L-谷氨酸谷氨酸+ +丙酮酸丙酮酸丙酮酸丙酮酸+NAD+NAD+ + LDH乳酸乳酸(r sun)(r sun)+NADH+NADHnALT第三十一页，共六十八页。（）（） 方法评价：方法评价：存在着两个副反应，会使测定结果偏高；存在着两个副反应，会使测定结果偏高；A A、血清中存在的、血清中存在的

20、-酮酸酮酸( (如丙酮酸如丙酮酸) )能消耗能消耗NADHNADH。B B、血清中谷氨酸脱氢酶、血清中谷氨酸脱氢酶(GLDH)(GLDH)增高时，在有氨存在条件下，亦能消增高时，在有氨存在条件下，亦能消耗耗NADHNADH。 双试剂法，因温育期长，能有效地消除双试剂法，因温育期长，能有效地消除(xioch)(xioch)干扰反干扰反应，测定准确性高，应，测定准确性高，是是ALTALT测定的首选方法；测定的首选方法；血清不宜反复冰冻保存，以免影响酶活性；避免使用血清不宜反复冰冻保存，以免影响酶活性；避免使用溶血标本。溶血标本。 第三十二页，共六十八页。3.3.赖氏法测定赖氏法测定ASTAST （

21、）原理与方法评价（类似（）原理与方法评价（类似ALTALT测定）测定）【参考参考(cnko)(cnko)范围范围】 828卡门氏单位卡门氏单位 【临床意义临床意义】增高见于：增高见于：心肌梗死、心肌梗死、肌炎、胸膜炎、肾炎及肺肌炎、胸膜炎、肾炎及肺炎炎(fiyn)和各种肝病病人和各种肝病病人第三十三页，共六十八页。4 4连续连续(linx)(linx)监测法测定监测法测定ASTAST （）原理（）原理(yunl)(yunl)： L-L-门冬氨酸门冬氨酸+-+-酮戊二酸酮戊二酸 草酰乙酸草酰乙酸+L- +L- 谷氨酸谷氨酸 草酰乙酸草酰乙酸+NADH +NADH L-L-苹果酸苹果酸+NAD+N

22、AD+ 双试剂双试剂(shj)(shj)法法 : :同同ALTALT测定测定MDHMDHAST第三十四页，共六十八页。（）方法（）方法(fngf)(fngf)评价评价 误差来源误差来源内源性干扰内源性干扰: :主要来自血清主要来自血清(xuqng)(xuqng)中高浓度丙酮中高浓度丙酮酸和酸和L-L-谷氨酸脱氢酶谷氨酸脱氢酶(GLDH)(GLDH)。外源性外源性: :干扰来自试剂中污染的干扰来自试剂中污染的GLDHGLDH和和ASTAST。 【参考范围参考范围(fnwi)(fnwi)】 5 540 IU/L(40 IU/L(连续监测法测定连续监测法测定) )【临床意义临床意义】 见赖氏法见赖氏

23、法第三十五页，共六十八页。( (二二)ALP)ALP测定测定(cdng)(cdng) n化学法化学法n连续连续(linx)(linx)监测法：监测法：鲍氏法鲍氏法金氏法金氏法皮氏法皮氏法第三十六页，共六十八页。、金氏法测定、金氏法测定(cdng)(cdng)ALPALP （）原理（）原理(yunl)(yunl)：磷酸苯二钠磷酸苯二钠 酚酚+ +磷酸磷酸 酚酚+4+4AA-P AA-P 红色醌红色醌 ALP OH-K3Fe(CN)6第三十七页，共六十八页。(2) (2) 方法方法(fngf)(fngf)评价：评价：磷酸苯二钠比色法与更早的磷酸苯二钠比色法与更早的-甘油磷酸钠法甘油磷酸钠法相比相比

24、具有较大的优点，如水解具有较大的优点，如水解速度快，保温时间较短、灵速度快，保温时间较短、灵敏度较高、显色敏度较高、显色(xin s)(xin s)稳定、不需去蛋白、操作简单、稳定、不需去蛋白、操作简单、快速。快速。但与但与磷酸对硝基酚连续监测法磷酸对硝基酚连续监测法相比，准确度、精密相比，准确度、精密度较低；操作比较繁琐度较低；操作比较繁琐, ,，灵敏度低。，灵敏度低。第三十八页，共六十八页。【参考范围参考范围成人成人(chng rn)(chng rn)：3 313 13 单位单位, ,儿童：儿童：5 52828单位单位 ALPALP金氏单位金氏单位(dnwi)(dnwi)定义是定义是100

25、ml100ml血清，血清，3737与与底物保温底物保温1515分钟，产生分钟，产生1mg1mg酚为酚为1 1个金氏单位。个金氏单位。ALPALP主要用于诊断肝胆主要用于诊断肝胆(gndn)(gndn)和骨骼疾病和骨骼疾病 【临床意义临床意义】 第三十九页，共六十八页。2.2.连续连续(linx)(linx)监测法测定监测法测定ALPALP（）原理（）原理(yunl)(yunl)：4-NPP+AMP 4-NPP+AMP 对硝基对硝基(xio j)(xio j)酚酚( (黄色）黄色） （）方法评价：（）方法评价： 线性范围可达线性范围可达500U/L500U/L，批内，批内CVCV为为2.06%2

26、.06%2.36%2.36%，批，批间间CVCV为为2.74%2.74%。 ALPOH-第四十页，共六十八页。【参考参考(cnko)(cnko)范围范围】男性：男性：1 11212岁岁 500U/L, 500U/L, 女性：女性：1 11212岁岁 500U/L 500U/L 12121515岁岁 750U/L1515岁岁 40 40 150U/L150U/L，2525岁岁 4040150U/L150U/L。【临床意义临床意义】 见金氏法见金氏法第四十一页，共六十八页。( (三三)GGT)GGT测定法测定法 化学法（重氮反应化学法（重氮反应(fnyng)(fnyng)比色法）和连续监测法。比色

27、法）和连续监测法。 1. 1. 重氮反应重氮反应(fnyng)(fnyng)比色法测定比色法测定GGTGGT(1)(1)原理原理(yunl)(yunl)： 【参考范围参考范围】 男性男性 3 3 17 U/L17 U/L； 女性女性 2 2 13 U/L13 U/L(2) (2) 方法评价：方法评价：重氮比色法活性单位：100ml血清在37下反应1hr,生成0.5mol的-苯胺为1个GGT活性单位。第四十二页，共六十八页。(1) (1) 原理原理(yunl)(yunl)： (2) (2) 方法方法(fngf)(fngf)评价评价：【参考参考(cnko)范围范围】男性：男性：111150 U/L

28、50 U/L；( (以以-谷氨酰谷氨酰-3-3-羧基羧基-4-4-硝基苯胺硝基苯胺为底物为底物) )女性：女性：7 732 U/L 32 U/L 男性：男性： 40U/L40U/L；女性：；女性：30U/L(30U/L(以以-谷氨酰谷氨酰-4-4-硝硝基苯胺为底物基苯胺为底物) )第四十三页，共六十八页。( (四四)MAO)MAO测定测定(cdng)(cdng) (1)(1)原理原理(yunl)(yunl)MAOMAO主要作用于主要作用于CH2-NH2CH2-NH2基团，在氧参与基团，在氧参与(cny)(cny)下，下，氧化脱氨生成相应的卞醛、氨及过氧化氢。以苄氧化脱氨生成相应的卞醛、氨及过氧

29、化氢。以苄氨偶氮氨偶氮-萘酚为底物萘酚为底物, ,在在O O2 2和和H H2 20 0参与下，参与下，MAOMAO催化催化生成苄醛偶氮生成苄醛偶氮-萘酚、氨及过氧化氢，用环己烷萘酚、氨及过氧化氢，用环己烷抽提后进行比色测定。抽提后进行比色测定。第四十四页，共六十八页。(2) 方法方法(fngf)评价评价【单位单位(dnwi)定义定义】： 1ml1ml血清与底物在血清与底物在3737孵育孵育6060分钟，催化单胺氧分钟，催化单胺氧化产生化产生(chnshng)(chnshng)1nmol1nmol苄醛偶氮苄醛偶氮-萘酚为萘酚为1 1 个个MAOMAO单位。单位。【参考范围参考范围】 12 12

30、40 U/ml40 U/ml【临床意义临床意义】：肝硬化时，肝纤维化现象十分活跃，肝硬化时，肝纤维化现象十分活跃， MAOMAO活性明显升高。活性明显升高。 第四十五页，共六十八页。三、血清三、血清(xuqng)胆红素测定胆红素测定重氮盐法重氮盐法胆红素氧化酶胆红素氧化酶(bilirubin oxidase,BOD)(bilirubin oxidase,BOD)法法高效高效(o xio)(o xio)液相色谱法液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)(high performance liquid chromatography,HPL

31、C)、导数导数(do sh)(do sh)分光光度法分光光度法直接分光光度计法直接分光光度计法 测测定定方方法法第四十六页，共六十八页。1 1重氮盐改良重氮盐改良(giling)(giling)J-GJ-G法法(1) (1) 原理原理(yunl)(yunl): : 结合胆红素结合胆红素+ +重氮盐重氮盐 偶氮胆红素偶氮胆红素 游离游离(yul)(yul)胆红素胆红素+ +重氮盐重氮盐 偶氮胆红素偶氮胆红素 偶氮胆红素偶氮胆红素+ +碱性酒石酸钾钠碱性酒石酸钾钠 蓝色溶液，蓝色溶液， 加速剂加速剂第四十七页，共六十八页。(2) 方法方法(fngf)评价评价1 1、推荐的常规方法、推荐的常规方法2

32、 2、线性范围较宽、线性范围较宽3 3、较好的准确性和精确性，、较好的准确性和精确性，高浓度时准确高浓度时准确性和精确性降低性和精确性降低。因此，建议浓度。因此，建议浓度(nngd)(nngd)过高过高时减少血样用量测定。时减少血样用量测定。 第四十八页，共六十八页。【临床意义临床意义】 【参考参考(cnko)(cnko)范围范围】 黄疸的鉴别黄疸的鉴别(jinbi)(jinbi)诊诊断断 总胆红素总胆红素: 5.1: 5.119.0mol/L19.0mol/L 直接直接(zhji)(zhji)胆红素胆红素: 1.71: 1.716.8mol/L 6.8mol/L 第四十九页，共六十八页。胆红

33、素胆红素BODBOD测定法测定法原理原理(yunl)： 胆红素胆红素 胆绿素胆绿素BODnpH 8.0pH 8.0测总胆红素测总胆红素 npH4.5pH4.5直接直接(zhji)(zhji)胆红素胆红素第五十页，共六十八页。【参考参考(cnko)(cnko)范围范围】血清血清(xuqng)(xuqng)总胆红素：总胆红素： 10.264.1010.264.10mol/L mol/L 血清结合胆红素：血清结合胆红素： 2.572.56 2.572.56 mol/L mol/L 【临床意义临床意义】见重氮比色法见重氮比色法第五十一页，共六十八页。四、血清四、血清(xuqng)胆汁酸测定胆汁酸测定高

34、效高效(o xio)(o xio)液相色谱法液相色谱法放射免疫分析法放射免疫分析法酶免疫酶免疫(miny)(miny)分析法分析法比色分析测定法比色分析测定法 测测定定方方法法第五十二页，共六十八页。(1) (1) 酶比色法测定酶比色法测定(cdng)(cdng)原理原理 3-HSD3-HSD NADH + NBT NADH + NBT 甲甲jiejie（蓝色化合物（蓝色化合物) ) 3-3-氧氧-5-5类固醇类固醇 + NAD+ NAD+ + 3- 3-氧氧-5-5类固醇类固醇 + NADH + NADH 黄递酶黄递酶4 4-DH-DHu酶比色法酶比色法 胆汁酸胆汁酸 + NAD+ NAD+

35、 + 3- 3-氧氧-5-5类固醇类固醇+ NADH+ NADH 第五十三页，共六十八页。酶循环酶循环(xnhun)(xnhun)法测定原理为：法测定原理为：NADNAD+ + Thio-NAD Thio-NAD Thio-NADH Thio-NADH 胆汁酸胆汁酸3-3-氧代胆汁酸氧代胆汁酸NADHNADH3-HSD第五十四页，共六十八页。(2) (2) 酶比色测定法评价酶比色测定法评价(pngji)(pngji)： 优点优点: : 快速、简便、准确快速、简便、准确(zhnqu)(zhnqu)、可靠和适用、可靠和适用 缺点缺点: :试剂试剂价贵、不易保存价贵、不易保存。对酶量的要。对酶量的要

36、 求严格，易产生误差。求严格，易产生误差。 此外，标准品的制备非常重要。常采用甘此外，标准品的制备非常重要。常采用甘 氨胆酸溶入小牛血清中制成冻干品氨胆酸溶入小牛血清中制成冻干品。 第五十五页，共六十八页。【参考范围参考范围(fnwi)(fnwi)】 1 1 7 7 mol/Lmol/L( (成人空腹成人空腹) )【临床意义临床意义】 1 1、 任何引起任何引起肝细胞损伤肝细胞损伤的病理过程都可能的病理过程都可能(knng)(knng)引起引起血中胆汁酸升高血中胆汁酸升高. . 2 2、各种类型的、各种类型的肝病、肝硬化、脂肪肝肝病、肝硬化、脂肪肝，及急慢性，及急慢性胆道阻塞。胆道阻塞。 3

37、3、空腹空腹胆汁酸测定胆汁酸测定: :敏感、特异性强敏感、特异性强; ; 最敏感的肝最敏感的肝功能试验之一。特别适用于功能试验之一。特别适用于可疑有肝病可疑有肝病但其它生化但其它生化试验正常或轻度异常的病人的诊断。试验正常或轻度异常的病人的诊断。第五十六页，共六十八页。五、血氨测定五、血氨测定(cdng)n为一步法，也叫直接测定为一步法，也叫直接测定(cdng)(cdng)即不需从全血中分离出氨即可直接测定即不需从全血中分离出氨即可直接测定(cdng)(cdng) n两步法，即先从全血中分离出氨两步法，即先从全血中分离出氨, ,而后而后(r hu)(r hu)再进行测定；再进行测定； 微量扩散

38、法、离子交换法微量扩散法、离子交换法 酶法和氨电极法酶法和氨电极法 第五十七页，共六十八页。原理原理(yunl)(yunl)： NHNH3 3-酮戊二酸酮戊二酸NADPH NADPH 谷氨酸谷氨酸NADPNADP+ +H H2 2O O谷氨酸脱氢酶速率谷氨酸脱氢酶速率(sl)法：法：谷氨酸脱氢酶谷氨酸脱氢酶第五十八页，共六十八页。【参考参考(cnko)(cnko)范范围围】 血氨测定在诊断治疗肝性脑病中占有血氨测定在诊断治疗肝性脑病中占有(zhnyu)(zhnyu)重要作用。重要作用。【临床意义临床意义】1872mol/L(酶法酶法)第五十九页，共六十八页。二、肝功能试验二、肝功能试验(shy

39、n)的分类的分类第三节第三节 肝功能试验选择肝功能试验选择(xunz)原原则则一、肝功能试验一、肝功能试验(shyn)选择原则选择原则第六十页，共六十八页。第六十一页，共六十八页。（一）胆红素的类型(lixng)未结合胆红素未结合胆红素 又称又称“间接反应胆红素间接反应胆红素” 或或“间接胆红素间接胆红素” 。结合胆红素结合胆红素 又称又称“直接直接(zhji)反应胆红反应胆红素素” 或或“直接胆红素直接胆红素”。 #11-胆红素胆红素 与重氮反应呈直接阳性与重氮反应呈直接阳性 第六十二页，共六十八页。 两类胆红素的比较两类胆红素的比较(bjio) 未结合未结合bilirubin 结合结合bi

40、lirubin 水溶性水溶性 小小 大大 与与G醛酸结合醛酸结合 未结合未结合 结合结合与血浆与血浆Alb亲和力亲和力 大大 小小细胞膜通透性及毒性细胞膜通透性及毒性 大大 小小与重氮试剂反应与重氮试剂反应 间接阳性间接阳性 直接阳性直接阳性能否通过肾随尿排出能否通过肾随尿排出 不能不能 能能常见其他常见其他(qt)名称名称 间接、血间接、血bil 直接、肝直接、肝bil 第六十三页，共六十八页。-胆红素胆红素 在在肝肝C损损伤伤及及胆胆汁汁郁郁滞滞(y zh)等等高高结结合合胆胆红红素素性性黄黄疸疸时时，Alb中中赖赖氨氨酸酸残残基基的的-氨氨基基与与胆胆红红素素一一个个丙丙酸酸基基的的羧羧

41、基基形形成成酰酰胺胺键键，使使得得胆胆红红素素与与白白蛋蛋白白共共价结合，这样形成的胆红素称为价结合，这样形成的胆红素称为 -胆红素。胆红素。定义定义(dngy)：临床意义：临床意义：可作为判断可作为判断(pndun)严重肝病预后的指标严重肝病预后的指标。恢复期：恢复期： -胆红素胆红素第六十四页，共六十八页。未结合胆红素的来源未结合胆红素的来源(liyun)与转运：与转运：结合胆红素的来源结合胆红素的来源(liyun)与转运与代谢：与转运与代谢：衰老衰老(shuilo)(shuilo)红细红细胞胞血红蛋白血红蛋白 第六十五页，共六十八页。人有了知识，就会具备各种分析能力，人有了知识，就会具备

42、各种分析能力，明辨是非的能力。明辨是非的能力。所以我们所以我们(w men)要勤恳读书，广泛阅读，要勤恳读书，广泛阅读，古人说古人说“书中自有黄金屋。书中自有黄金屋。”通过阅读科技书籍，我们能丰富知识，通过阅读科技书籍，我们能丰富知识，培养逻辑思维能力；培养逻辑思维能力；通过阅读文学作品，我们能提高文学鉴赏水平，通过阅读文学作品，我们能提高文学鉴赏水平，培养文学情趣；培养文学情趣；通过阅读报刊，我们能增长见识，扩大自己的知识面。通过阅读报刊，我们能增长见识，扩大自己的知识面。有许多书籍还能培养我们的道德情操，有许多书籍还能培养我们的道德情操，给我们巨大的精神力量，给我们巨大的精神力量，鼓舞我们前进鼓舞我们前进。第六十六页，共六十八页。第六十七页，共六十八页。内容(nirng)总结第十三章 肝功能检验。【参考范围】2.224.22g/L(热沉淀比浊法)。其它疾病引起纤维蛋白原减少的疾病。【原理】双联吡啶法。【原理】铜蓝蛋白具有氧化酶活性。丙酮酸+NAD+。1ml血清与底物在37孵育60分钟，催化单胺氧化产生1nmol苄醛偶氮-萘酚为1 个MAO单位。1、 任何(rnh)引起肝细胞损伤的病理过程都可能引起血中胆汁酸升高.。NH3-酮戊二酸NADPH。鼓舞我们前进第六十八页，共六十八页。