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1、胶体金免疫层析技术胶体金免疫层析技术1/36EASYSWEET-培训资料2/36胶体金免疫层析技术简介Colloidal gold (enhanced) immunochromatography assy (GICA)以免疫学的高度特异性的抗原抗体反应作为反应基础以胶体金颗粒作为显示标记物应用层析法的反应形式，以硝酸纤维素膜作为载体制备2/36EASYSWEET-培训资料3/36胶体金免疫层析法检测试剂盒的特点操作方便，读取结果的时间短：一般只需要一个加样步骤，得到结果时间最短的只需要35分钟，最长的也不会超过30分钟。灵敏度和特异性好，受外界影响少：高度特异的抗原抗体反应保证该检测结果保持很
2、高的特异性和灵敏度。成本低廉，所需样本很少：一般只需要不到100l样本即可得到检测结果。产品和检测结果均易于保存：固相的产品条件，使得该产品的有效期能够达到18月以上，而且只需要保存在室温条件下。不依赖于辅助的仪器设备，而且非专业人员也可以操作，产品的适用范围广，移植能力强。3/36铁蛋白检测试剂盒铁蛋白检测试剂盒铁蛋白检测缺铁性贫血的预防性金指标EASYSWEET-培训资料4/364/365xx5/36什么是缺铁性贫血当机体对铁的需求与供给失衡，导致体内贮存铁耗尽（ID），继之红细胞内铁缺乏（IDE），最终引起缺铁性贫血（IDA）。IDA是铁缺乏症（包括ID，IDE和IDA）的最终阶段，表现
3、为缺铁引起的小细胞低色素性贫血及其他异常。IDA是最常见的贫血。其发病率在发展中国家、经济不发达地区及婴幼儿、育龄妇女明显增高。EASYSWEET-培训资料6/366/36孕妇发生缺铁性贫血的后果n增加心输出量和胎盘血流量，加重心脏负担。n胎儿缺氧，生长发育受阻。n影响免疫、消化等多系统的正常功能n多种妊娠并发症。n胎儿先天铁储存不足，婴幼儿期易缺铁。n严重的会因血红蛋白携带氧气不足而致胎儿缺氧，引起胎儿宫内发育迟缓、早产，甚至死胎。xx77/36孕妇容易发生贫血的原因8xx 妊娠妇女对铁的需求量明显增加，胎儿生长发育期共需要铁约350毫克，母体血容量的增加需要铁约650毫克，考虑妊娠全过程无
4、月经来潮的失血，约积存铁200毫克，故孕期需要铁800毫克。每天饮食中含铁1015毫克，其吸收利用率仅为10%，为11.5毫克，而此时孕妇每天至少需要4毫克铁。到妊娠后半期，铁的最大吸收率可达40%，仍不能满足要求。 因此，孕期若不补充足够的铁，孕妇极易发生缺铁性贫血。8/36婴幼儿发生缺铁性贫血的主要临床表现n皮肤粘膜逐渐苍白，尤以唇、口腔粘膜及甲床最为明显。n伴有易疲乏、不爱活动、精神不振、对周围环境反应差、烦躁不安、注意力不集中、食欲不振、呕吐、腹泻等症状。n年长患儿可自述头昏、眼前发黑、耳鸣等。部分患儿还可有异食癖(如嗜食泥土、墙皮、煤渣等)。xx99/36婴幼儿发生缺铁性贫血的危害
5、n智商降低，再记忆功能受损：据联合国儿童基金会的报道，贫血的儿童其智商较正常儿童平均低 个点；我国的研究报道，贫血儿童的运动和智能发展指数甚至较正常儿童低得更多。n情商受损：情感淡漠，不开心、紧张、易疲劳；兴趣少，不容易逗乐，不合群，注意力难集中。n身体发育受影响：听视觉神经反应迟缓；细胞、体液免疫功能降低，易感染；延缓运动神经的发育，运动功能受损。小儿长期贫血不仅会影响生长发育，还可诱发一些感染性疾病。n更重要的一点是：胎儿及婴幼儿时期铁缺乏，甚至无法被日后的补铁所逆转。xx1010/36什么是铁蛋白（Ferritin）xx11 铁蛋白为机体内一种贮存铁的可溶组织蛋白，是一种棕色的含铁蛋白，
6、含铁量为23，分子量约750kDa，它是一种直径为1214nm的球形蛋白，主要在肝脏合成。 正常人血清中含有少量铁蛋白，但不同的检测法有不同的正常值。一般正常均值男性约80130ug/L(80-130ng/ml)女性约3555ug/L(35-55ng/ml)。11/36铁蛋白起什么作用？ 铁蛋白在体内作用主要有两条：一是作为体内铁的储存库用于血红蛋白的合成；二是将铁保存在中空的球形蛋白内，防止细胞内游离铁过多而产生有害作用。xx1212/36xx13 体内储铁缺乏的诊断指标为： 血清铁蛋白12ng/ml。 血清铁蛋白含量的多少是判断体内缺铁还是铁负荷过量的指标。在临床上血清铁蛋白降低见于缺铁性
7、贫血和体内贮存铁减少导致的继发性贫血。13/36xx14 缺铁性贫血的症状是在一个较长时间内逐渐形成的。铁耗竭期，贮存铁耗尽，血清铁蛋白减低，此时并无贫血，若缺铁进一步加重。贮存铁耗尽，血清铁蛋白和血清铁下降，总铁结合力增高，出现缺铁性贫血。 铁蛋白缺乏是缺铁性贫血的初期阶段，在这个阶段及时调整就能够避免后期的贫血出现。 即使在贫血发生以前，铁缺乏就已经对机体多项功能造成伤害，有些伤害甚至是不可逆的。铁蛋白在缺铁性贫血中的作用14/36检测铁蛋白可以协助预防缺铁性贫血xx1515/3616/36临床上将缺铁性贫血分为以下三个阶段：xx17铁缺乏阶段铁缺乏阶段血清铁蛋血清铁蛋白含量白含量转铁蛋白
8、转铁蛋白饱和度饱和度红细胞游离红细胞游离原卟啉原卟啉（FEPFEP）血红蛋白血红蛋白潜在性缺铁期潜在性缺铁期12ng/ml缺铁性红细胞生成缺铁性红细胞生成12ng/ml15%4.5g/L4.5g/L缺铁性贫血缺铁性贫血12ng/ml15%4.5g/L4.5g/LHb120g/LHb120g/LHb110g/LHb110g/L( (女性女性) )17/36EASYSWEET-培训资料18/36铁蛋白与其它实验指标组合对铁营养状况的综合分析判断铁蛋白与其它实验指标组合对铁营养状况的综合分析判断铁蛋白血红蛋白元素铁解 释正常正常正常正常正常减低正常IDA恢复期，铁储备先行增高，但受红细胞生命周期影响
9、，血红蛋白尚未恢复正常。 贫血合并感染 其它原因的贫血正常减低减低 IDA恢复期，铁储备先行增高；但受红细胞生命周期影响，血红蛋白尚未恢复正常；受多因素影响的即时循环铁暂时减低。贫血合并感染 其它原因的贫血正常正常减低受多因素影响的即时循环铁减低，注意定期观察铁蛋白变化减低正常正常体内储备的铁耗竭，ID期。减低正常减低体内储备的铁耗竭，受多因素影响的即时循环铁也同时减低减低减低正常IDA缺铁性贫血期，但受多因素影响的即时循环铁正常。减低减低减低IDA缺铁性贫血期。18/36xx19 只有随时关注血液内铁蛋白的含量，只有随时关注血液内铁蛋白的含量，才能及时发现铁蛋白是否缺乏，避免缺才能及时发现铁
10、蛋白是否缺乏，避免缺铁性贫血的出现！铁性贫血的出现！19/3620 由缺铁性贫血发生主要人群来看，主要要控制孕妇和婴幼儿群体。xx20/36为什么要防治儿童和孕妇的铁缺乏?xx21类型类型比率比率人数（万）人数（万）学龄前儿童学龄前儿童20%20%16781678孕妇孕妇28.9%28.9%507.6507.6育龄期妇女育龄期妇女19.9%19.9%69306930 妇女和儿童是铁缺乏症的主要受害者，据世界卫生组织统计结果，中国国内2002年贫血人数如下表所示：21/3622 据世界卫生组织（WHO）在2008年公布的全球2005年的统计数据，全球约有16.2亿居民呈现贫血症状，患病率大概为2
11、4.8%。 全球学龄前儿童的贫血患病率高达47.4%，总数约为2.93亿； 孕妇群体的患病率为41.8%，人数高达5640万； 全球育龄期妇女贫血率为30.2%，贫血人数约为4.68亿； 而同期的学龄期儿童和青年贫血率仅为25.4%、成年男性仅为12.7%、老年人为23.9%，均处于较低水平。xx22/36世界卫生组织公布的 全球学龄前儿童贫血数据xx2323/36世界卫生组织公布的全球孕妇贫血数据xx2424/36n我国政府一向重视铁缺乏症的防治工作，在中国儿童发展纲要（20112020年）中，明确要求5岁以下儿童贫血患病率控制在12%以下，中小学生贫血患病率以2010年为基数下降1/3。在
12、中国妇女发展纲要（20112020年）中明确提出降低孕产妇中重度贫血患病率。n在卫生部2011年6月23日发布的孕产期保健工作管理办法和孕产期保健工作规范中也明确提出“提倡适量运动，预防及纠正贫血。”“进行保健指导，纠正贫血”，同时孕产妇中重度贫血患病率也作为重点健康指标用于核查。n防治儿童营养性铁缺乏症参照方案中同时指出：婴幼儿缺铁的源头是孕妇和乳母，防治婴幼儿缺铁首先要从源头人群（孕妇）补铁开始。要控制儿童铁缺乏、减少缺铁的危害，首先要着重防治孕妇的铁缺乏。 xx2525/36EASYSWEET-培训资料26/36筛查对象： 6、12、18、24个月定期体检的正常婴幼儿，早产儿应提前至生后
13、4个月检测。 已建册体检的孕妇。管理： 宣教铁缺乏的危害，指导膳食，给予必要的药物治疗，每月复查。26/36EASYSWEET-培训资料27/36心肌三项检测试剂盒心肌肌钙蛋白I（cTnI）检测cTn是存在于心肌内的蛋白质，cTnI对心肌损伤的特异性极高，仅存在于心肌收缩蛋白的细肌丝上，所以迄今为止cTnI仍是心肌损伤的最特异的标志物，不会因骨骼肌或其他组织的损害而出现假阳性 。血清中cTnI在AMI发病后36 h增高，1214 h达高峰，血中升高持续时间较长，可达610d，故对胸痛几天后人院的病人，ctnI具有相当长的窗口期，能鉴别CK-MB所不能诊断出的心肌损伤。ctnI的诊断特异性优于M
14、b，可用于评价不稳定性心绞痛，一旦检测到cTnI，即表明病人已出现不可逆的心肌损害，cTnI浓度与AMI的面积大小以及预后呈正相关。27/36EASYSWEET-培训资料28/36肌红蛋白（MYO）检测Myo是一种存在于心肌和骨骼肌的低分子量氧结合蛋白，在心肌细胞中含量丰富，心肌受损后，小分子量的Mb迅速释放入血，12h后血清浓度即可升高，并可在69h达到高峰比CK-MB的释放早36h。由于Myo在肌肉细胞质含量很高，而分子体积较小，分子量相对较低，所以在出现细胞损伤后，能够更加迅速的释放到血液循环中。在AMI发作后l2 h，患者血清中Myo的浓度即迅速增加，在6-9 h后达到峰值，比CK-M
15、B的释放早25 h，在1d内即返回到正常，是AMI诊断的早期最灵敏的指标 。因为特异性差，Myo阳性不能确诊AMI，但Myo阴性特别有助于排除AMI的诊断，在有急性症状的患者中，4 h内Myo水平不升高，则基本排除AMI。由于Mb的血中半衰期短，所以又有助于观察AMI病程中有无梗死再发生以及梗死有无扩展。28/36EASYSWEET-培训资料29/36肌酸激酶（CK-MB）检测血清中CK-MB升高是公认的诊断急性心肌梗死和确定有无心肌坏死的重要指标，在传统酶学中曾作为诊断AMI的金标准，对判定梗死发生的时间、面积、部位、梗死的扩展及有无心肌灌注均具有一定的价值 。正常人血清中CK-MB含量极少
16、(低于总活性5)，当心肌受损时释放入血。AMI发病后38 h，CK-MB即开始升高，CK-MB达峰值时问较CK短(1224 h)，如无并发症3 d后恢复至正常。在AMI病程中，若有并发症，如梗死延展，则CK-MB不下降；若新的梗死再次出现，已趋下降的CK-MB会再次升高。29/36EASYSWEET-培训资料30/36三项检测指标对比30/36降钙素原检测试剂盒降钙素原(procalcitonin, PCT) 是无激素活性的降钙素( calcitonin, CT) 的前体, 由116个氨基酸组成、分子质量为13 000的糖蛋白。PCT的半衰期为2530 h,在体内外稳定性很好。血浆中的PCT非
17、常稳定, 收集标本24 h后PCT浓度在室温下约下降12%, 4时下降6% 。PCT被特异性的蛋白酶降解, 其在循环中的半衰期是2530 h。肾功能异常患者中PCT 的清除半衰期无显著延长；新近发现血清PCT的升高与细菌感染密切相关,在全身系统性严重感染中PCT早期即可升高,经抗生素治疗使感染控制后血中PCT会下降,在病毒感染及局部细菌感染而无全身表现的患者PCT仅轻度升高。因此, PCT已被用作全身严重感染或败血症时的一个重要的观察指标。EASYSWEET-培训资料31/3631/36摘自检验医学与临床2013年6月第10卷第11期 1462-1463降钙素原临床应用现状，卢洁（天津市南开医院免疫室）EASYSWEET-培训资料32/3632/36摘自中华急诊医学杂志年月第卷第期 ，944-951降钙素原（PCT） 急诊临床应用的专家共识EASYSWEET-培训资料33/3633/36THANKS FOR YOUR ATTENTION！北京易斯威特生物医学科技有限公司2015-08-1034/36
