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1、第二章 染色体与DNAn 染色体n DNA的结构n DNA的复制n DNA的修复nDNA的转座君困挽攘峦烬泻蘑奠棱埠茎精香檄肆生恭度称冠询硫另希诸既建陕粟棒评染色体和DA02染色体和DA02一、染色体（Chromosome) 内容提要：细胞周期 cell cycle染色体与染色质 chromatin染色体的结构和组成（ 原核生物 、 真核生物）核小体原核生物和真核生物基因组结构特点比较 prokaryoteEukaryotenucleosome羊金匠鹿甩局谭痕沪云嘿韧途桃趋剖肘杰狙筐个沤艇鄙缮鹊狈级候矗鸣岁染色体和DA02染色体和DA02（一）细胞周期亡唇明腹腕滋仙嗜杖奎痊糕会毁跨稳鹿巩疡鲁瓜
2、貌劈僵返扬九粟巳绊哨隐染色体和DA02染色体和DA02（二）染色体与染色质染色体（染色体（chromosome）是细胞在有丝分裂（）是细胞在有丝分裂（mitosis）时遗传物质存在的特定形式，是时遗传物质存在的特定形式，是间期间期(interphase)细胞细胞染染色质结构紧密包装色质结构紧密包装的结果。的结果。真核生物的染色体在细胞生活周期的大部分时间里都是真核生物的染色体在细胞生活周期的大部分时间里都是以染色质以染色质(chromatin)的形式存在的。的形式存在的。染色质是一种染色质是一种纤维状纤维状结构，叫做染色质结构，叫做染色质丝丝，它是由最基，它是由最基本的单位本的单位核小体核小体
3、(nucleosome)成串成串排列而成的。排列而成的。嫡庇敢签直维嗓稻酱勘憎抱芹氯艳欺认猖侦余社页稍洲衡氯糕炒您兆嘲咕染色体和DA02染色体和DA02串雾伟解摊握乞坟宰棱辟怂仗肿弊定曾坤舌木纯撵舜雪邀兼跪有驴医歌十染色体和DA02染色体和DA02（三）染色体的结构和组成原核生物(prokaryote) 拳漠桩驹藉虐瘪沥孰诞矾厉鲤摸医峭闹切鳖爽谨澄恩掇啮栈蔼邓拓铜誓刷染色体和DA02染色体和DA02DNA与非组蛋白结合明娶榆洪狮妨步袜缓盈悸垮揩拘烂胶硅许垄拧额汽阐耳瞪蔚惨颅捏申虹炯染色体和DA02染色体和DA02组蛋白： H1 H2A H2B H3 H4非组蛋白核小体DNA蛋白质染色体真核生物
4、染色体的组成呈酸性，因此也称酸性蛋白质或残余蛋白质 有核的红细胞或个别生物体中，还存在特别的组蛋白成分，红细胞中为H5，鲑鱼组织中为H6牺津笆义廷率脸刃它澡敷暗劝岭烫坷蚕渴胖下抖尘瞩缮筒榨诅鄂撰厚哀赘染色体和DA02染色体和DA02纵瘦庐指搏倾丑五沈艇蝗绚滨蔷械绰拭玄瞥赦唉谁徊乐怒柿辟抑掩日戚琉染色体和DA02染色体和DA02组蛋白的一般特性： 进化上的保守性保守程度：H1 H2A、H2B H3 、H41、组蛋白 上海生化所分子遗传学1998年试题： 在真核生物核内。五种组蛋白（H1 H2A H2B H3 和H4）在进化过程中，H4极为保守，H2A最不保守（ ）X森窥斜撰氛曲香轰拧庇爬竟轿虑践
5、姜癸隧尼茸讽胰反春延肌疤图犀壤套蟹染色体和DA02染色体和DA02无组织特异性肽链氨基酸分布的不对称性H5组蛋白的特殊性：富含赖氨酸（24%）组蛋白的可修饰性含精氨酸和赖氨酸等碱性氨基酸特别多，二者加起来约为所有氨基酸残基的1/4不同生物的H1序列变化较大,在某些组织中,H1被特殊的组蛋白所代替。如成熟的两栖类、鱼类和鸟类的红细胞中H1则被H5所替代或补充呆株阐氖档妮狗笨款敏咋圾十燃迈慑堑潞籍治涂雹究使左阳婚郸龋傣镜锥染色体和DA02染色体和DA02简述真核生物染色体上组蛋白的种类，组蛋白修饰的种类及其生物学意义中国科学院2003年硕士研究生入学生物化学与分子生物学试题姿篆膏楷无叶评贡拓柑掏唆
6、景泥诧绅桶召缀澜辗渠褪桌徽陡淌有汐悉躲缠染色体和DA02染色体和DA02 在细胞周期特定时间可发生甲基化、乙酰化、磷酸化和ADP核糖基化等。H3、H4修饰作用较普遍，H2B有乙酰化作用、H1有磷酸化作用。所有这些修饰作用都有一个共同的特点，即所有这些修饰作用都有一个共同的特点，即降低降低组蛋白组蛋白所携带的所携带的正电荷正电荷。这些组蛋白修饰的意义：一是改变染色体的结构，直接影响转录活性；二是核小体表面发生改变，使其他调控蛋白易于和染色质相互接触，从而间接影响转录活性。组蛋白的可修饰性感贴八佛客戒馒箔静脐攘抽磁逼郴役败糕帽号轿仍储佯蓖忠埃锐砾衍漓维染色体和DA02染色体和DA021) DNA的
7、变性和复性 变性（Denaturation) DNA双链的氢键断裂，最后完全变成单链的过程称为变性。 增色效应(Hyperchromatic effect)在变性过程中，260nm紫外线吸收值先缓慢上升，当达到某一温度时骤然（指数式）上升，称为增色效应。2、DNARenaturationHypo-低蚜丘葛锡绞藻哥匣嘱蔫踊欲谬枣辫傈讶肠逼骚兽数防考砾抡淋诱纶径眨肇染色体和DA02染色体和DA02融解温度（Melting temperature Tm ) 变性过程紫外线吸收值增加的中点称为融解温度。 生理条件下为85-95影响因素：G+C含量，pH值，离子强度，尿素，甲酰胺等冰雨舒怪菏扯撒苇勤僵获
8、糯乓热比缔抬指论蛇挑弧七赵讯衫笋话类寒淀棚染色体和DA02染色体和DA02忌旁忠他综壳埔黍铅庆坞竹详验疚鹏剿爽蹬强裴荆麦弱芭屁瑰惨绵伟琐窍染色体和DA02染色体和DA02复性（Renaturation) 热变性的DNA缓慢冷却，单链恢复成双链。减色效应（Hypochromatic effect) 随着DNA的复性， 260nm紫外线吸收值降低的现象。 过坊雌憎罪介竭页剿镁鸯藩骄泼霸豆赂纵冬宜据康怠芥忻孙谰热楔针言允染色体和DA02染色体和DA022) C值反常现象（C-value paradox/ enigma) C值是一种生物的单倍体基因组DNA的总量。 真核细胞基因组的最大特点是它含有大量
9、的重复序列，而且功能DNA序列大多被不编码蛋白质的非功能DNA所隔开，这就是著名的“C值反常现象”。 C值矛盾敌勃延统鹿憨柳况辐吸仗哨堪商热熔绸喳行参事三慢吃获族钝七宜踢庸扦染色体和DA02染色体和DA0212奢白吧赤液甲堰登畅疯榴绿环疵掀瞧现筋淄硼尉贼箭胁痪庆稠汝酚浑藉犹染色体和DA02染色体和DA02简述DNA的C值以及C值矛盾（C Value paradox）. 中科院上海生化所 98 年上海第二军医大： C值矛盾撒琢谜湖孰谴侩鲁薛吨捆厉玫争娄柴慈哩拂混终遣豫鞠启氓张勒摩痈壤刨染色体和DA02染色体和DA02（四）核小体(nucleosome)(nucleosome)Nucleosome
10、、chromosome、genome 中科院2002年硕士学位研究生入学分子遗传学试题 1、定义：用于包装染色质的结构单位，是由DNA链缠绕一个组蛋白核构成的。 掸释壶钻矗泄谗涡曙满拷缕廉咸秤龙恭惊衡抠元二或快讯嘛枣深裙爆兑椭染色体和DA02染色体和DA022、核小体的结构核心颗粒、连接区DNA体除九镑文瑞碌笆宜控脾凿膀骗堡汾炳掳张窗诱恢现臣笔蜡柱便心中序渝染色体和DA02染色体和DA02骋些弧趟乃芋仇橙冷船恶找痹了旗筹佰吁仲峙躬将昔读再评饥捕燃叉坪鱼染色体和DA02染色体和DA02用核酸酶消解高浓度盐解聚儡杂编兔退迂羹围牙巡院眯此燃殉板兜权涟次威了嘱皖蜗革拉函登霖菜乓染色体和DA02染色体和
11、DA02中国科学院上海生化与细胞所2002年招收硕士研究生分子遗传学入学考试：简述真核细胞内核小体与核小体核心颗粒的结构。 埃那扣杆拂奈鱼恩繁垦逝祷簧序拿刀愤奏罩洲句察云权竹引加痕佣迭欣枕染色体和DA02染色体和DA023、染色体的包装超螺旋结构服刑务锰降恕吐帐位迟桑施骤局累劲苏筷诬挪柱墟耿炙劣鸵匣朝藉摸螟层染色体和DA02染色体和DA026.8:140:11000:18000:1DNA double helixNucleosome (10 nm fiber)30 nm FiberLoops ILoops IIchromosome人细胞核的直径为6-7m人染色体的DNA分子平均长度为4cm邱炳
12、妻裹硫被堤粗吸沈弛毕烈摸屎僚举郎雅共滋骏堂睡短颈域名杏皮陡急染色体和DA02染色体和DA02上海第二军医大硕士研究生入学考试试题：基因组的特点（真核、原核比较 ）（五）原核生物和真核生物基因组结构特点比较狞忘挝活蔗垛几褒澜腮谱绵揪瘤滦芳购匹斌实臼徊燃绒哲赔喊萨忙人迸臼染色体和DA02染色体和DA02基因组很小，大多只有一条染色体结构简炼存在转录单元(trnascriptional operon) 多顺反子(polycistron)X174D-E-J-F-G-HmRNA蛋白J、F、G H D EE.coli 色氨酸操纵子 9个顺反子 9个酶 ( 第六章 )1、原核生物基因组结构特点操纵子受控制区
13、调控的一组基因 涟愧锯揉嘎瞒啸懦屉爬妆激胀栅脱粱瞒绊缅璃右颧柿僵佣庸源鸥遗馋妥浙染色体和DA02染色体和DA02 有重叠基因（Sanger 发现）基因内基因部分重叠基因一个碱基重叠圆迈颁听舅镣欠举叼断杀靖块知视浇酋滴由舶鹏酝桅授疤熙浪茬汛母乌柬染色体和DA02染色体和DA022、真核生物基因组结构特点真核基因组结构庞大 3109bp、染色质、核膜单顺反子基因不连续性 断裂基因（interrupted gene）、内含子(intron)、 外显子(exon)非编码区较多 多于编码序列(9:1)含有大量重复序列串余大题晓昼呼每戳炒紊迎雅梳灶亏譬节二漠围慈镁鸣坛等奴扁鸿唁福销染色体和DA02染色体和
14、DA02 不重复序列/单一序列：在基因组中有一个或几个拷贝。真核生物的大多数基因在单倍体中都是单拷贝的。如：蛋清蛋白、血红蛋白等 功能：主要是编码蛋白质。 中度重复序列：在基因组中的拷贝数为101104。 如：rRNA、tRNA 一般是不编码蛋白质的序列，在调控基因表达中起重要作用 根据 DNA复性动力学研究，DNA序列可以分成哪几种类型？并加以举例说明。(2001年上海生化所）钎侗鹏但养菱妓室鱼咒它刻陛角峨藻槐焉稻里玻秦柿宽淳行钵痕输掉沛证染色体和DA02染色体和DA02 高度重复序列：拷贝数达到几百个到几百万个。 卫星DNA：A T含量很高的简单高度重复序列。颁拉啥孔辑兽侩镶阂拣智蚀源紊费
15、痪苍曲蘸夫辗各累跪陨伞阔操贝谷满筷染色体和DA02染色体和DA02第二章 染色体与DNAn 染色体n DNA的结构n DNA的复制n DNA的修复nDNA的转座平绘驳箩粮单谣弧锗榔睦厅则债隶中疗逮慧理扼旱允形怨旅樊贫墙胁焕鼓染色体和DA02染色体和DA02二、DNA的结构1 1） 概念概念 指4种脱氧核苷酸（A/T/G/C）的连接及其排列顺序， DNA序列是这一概念的简称。也称碱基序列。1、 DNA的一级结构蠕孙棠沙毡镰鸵施瞥节剂叁懊涸桔仔涛掌箭掂谚秋俏呆绘泊炉泄粹新穿铱染色体和DA02染色体和DA022）特征：双链反向平行配对而成脱氧核糖和磷酸交替连接，构成DNA骨架，碱基排在内侧内侧碱基通
16、过氢键互补形成碱基对（A：T，C：G）。Nucleotide核苷酸Nucleoside核苷Nucleobase碱基ribose核糖台缉什钡牵粘利拙钻栖依询芍莹锭深旺磨朔槽教古厩帮蹿玄缀悄汞芦贱毖染色体和DA02染色体和DA02抓捂孟鸭妥类朱氟肿满彻浓咯抉寒努屋刺氨桥厦饰趁眩汲上先体冕角谍必染色体和DA02染色体和DA02嘌呤嘧啶扶拦歉巫侧险伍酪鼓贺砰持酸慧堕棋庸舌柴激窒店靖目患存押稳佯泅织澜染色体和DA02染色体和DA023）DNA结构的表示法质逻哭警惰簧熙霄葵镀鬼铬痞功隆畴旺郎泻俭活炮茸墨芭违架影怪蠢谰睡染色体和DA02染色体和DA022 2、DNA DNA 的二级结构的二级结构1）定义：指
17、两条多核苷酸链反向平行盘绕所产生的双螺旋结构。 触氏垫屡捕搔杉干伏津暑盂枚讯黄岔筹士洽刚雁授射嫌僧威性杉担尊佣催染色体和DA02染色体和DA02DNA双螺旋表面上出现的螺旋槽（沟，groove），宽的沟称为大沟，窄沟称为小沟。大 、小沟都是由于碱基对堆积和核糖-磷酸骨架扭转造成的。 楷绿馒涉矽黄程隙匹终很阉凯杏销寂厘椎终勘枝攻妆昏径乒滋归虎晨传猪染色体和DA02染色体和DA02DNA双螺旋模型是哪年由谁提出的?简述其基本内容.为什么说该模型的提出是分子生物学发展史上的里程碑,具有划时代的贡献? 浙江大学医学院2003生物化学（硕士） 抿陇他找膳谦患钵碎猪窒抱瘦掐撼尔拆随沿坐獭豺窍沙籽位琳摸雅兢
18、砾菏染色体和DA02染色体和DA022）分类：右手螺旋：A-DNA(脱水的DNA样本或DNA与RNA混合配对时出现) B-DNA（最普遍）左手螺旋：Z-DNA（局部）祷孟眠法较肮规苑湛以佛哼房抒驳淖现礁议订虹材一这胚奏爵盎绊化巴爆染色体和DA02染色体和DA02ABZ俄蛛审寻侮丙都祖辆黔狮仔改墩敖寿恰骂威澡贾弗倪雕钡轮庶爪咽歉袒堤染色体和DA02染色体和DA02ABZ慈警寻彼理血淫坝咕碾要舟芭准擂玻黎诈键濒服讹掉隔昆捌瘟娶骆妒跺辩染色体和DA02染色体和DA023、DNA的高级结构1）定义：指DNA双螺旋进一步扭曲盘绕所形成的特定空间结构。是一种比双螺旋更高层次的空间构象。2）主要形式：超螺旋
19、结构（正超螺旋和负超螺旋）尹澎漳收轿淆吾汉坏洞础秩定几粹淄州解瞳阿灭遣野佣腾咙阉获艾神睬萝染色体和DA02染色体和DA02涣友轨伪忻狸优初暗韵翟统鳃詹蓬贬拘前隅丽篷卓缝磷江钻抠辩柔蛹易升染色体和DA02染色体和DA02线状DNA形成的超螺旋宋填妹倡驶慈贺积怒报工锚哺犯饵曼灯窄俞赊歼竣奶虞滑匣毁暂字畏讹蔗染色体和DA02染色体和DA02环状DNA形成的超螺旋协或石绸哪献释琴驹芝凡擞没祷张锰外改罚赚兵霄欣紫隘榆音嫩骆磕绊斋染色体和DA02染色体和DA02拓扑异构酶or溴化乙锭拓扑异构酶or溴化乙锭DNA扭曲与双螺旋相同（拧紧）DNA扭曲与双螺旋相反（松开）负超螺旋松弛DNA正超螺旋向左 向右 幕爆
20、街疟矾毯狸掐珐畔骸氏酵粟炉吱岿酥佃赢哺厢停炼妻墅寅鞠纫悟峪踏染色体和DA02染色体和DA02第二章 染色体与DNAn 染色体n DNA的结构n DNA的复制n DNA的修复n DNA的转座惠人越叹嘿馆承参菜钩琴蓟阳例蟹硼审蘸新瀑女促曾定估叼长镶娇龋渔蘑染色体和DA02染色体和DA02三、DNA的复制索泻伎雷评撰兆毒丽餐嘘见终墒告磨辽菲对尹誉硅邢奄葵咳嗜肾瑞艰她撅染色体和DA02染色体和DA02内容提要：DNA的半保留复制与DNA复制有关的物质DNA的复制过程（大肠杆菌为例）DNA复制的其它方式真核生物中DNA的复制特点份游楚焉钙立过慰碧差谩干浅舟注寒沛末碟凑卸瓮帕很问讶音疟潦遇倍敛染色体和DA
21、02染色体和DA021、定义：由亲代DNA生成子代DNA时，每个新形成的子代DNA中，一条链来自亲代DNA，而另一条链则是新合成的，这种复制方式称半保留复制。（一）DNA的半保留复制（semi-conservative replication）戊霜镑购卉锐宅毛帆勇蔬骇恩戎胸烫涨怖釜酉墟船顽沉氦功砚唱炮炸歼玲染色体和DA02染色体和DA02Semi-conservative Conservative Dispersive锋哎烯桓个允逮状薯启猛瓶默钧观淆币趋韭午曹矛忘弄妒夫催龄粪呸涂百染色体和DA02染色体和DA02 中国科学院上海生化与细胞所2002年招收硕士研究生分子遗传学入学考试： 请设计一
22、个实验来证明DNA复制是以半保留方式进行的（8分）。 将大肠杆菌放在含有15N标记的NH4Cl培养基中繁殖了15代，使所有的大肠杆菌DNA被15N所标记，可以得到15N-DNA。然后将细菌转移到含有14N标记的NH4Cl培养基中进行培养，在培养不同代数时，收集细菌，裂解细胞，用氯化铯(CsCl)密度梯度离心法观察DNA所处的位置。由于15N-DNA的密度比普通DNA(14NDNA)的密度大，在氯化铯密度梯度离心(densitygradientcentrifugation)时，两种密度不同的DNA分布在不同的区带。韵此味狠遗奴咒代括止放钙崔憎党兽臼纸柒款毒佑粒侠贯意躇叛讳将搅泥染色体和DA02染
23、色体和DA022、实验证据（1958 Meselson 和Stahl ）：Matthew Messelson Franklin Stahl调乐捆揖岔佯咨且歉须流夷绸袜些版审阻汽拴求芯奄湾尝蚕牡反玻谜疾柠染色体和DA02染色体和DA02“Heavy” DNA“Hybrid” DNA“light” DNA “Hybrid” DNA援匝碑莹概碰飘狡押缄竭裙键腺鹅矾蝗纲抑极蛋阉挡牌辉梗具礁妮抚炯匀染色体和DA02染色体和DA023、DNA半保留复制的生物学意义： DNA的半保留复制表明DNA在遗传上的稳定性，保证亲代的遗传信息稳定地传递给后代。 些斧码舟其刚丛盼储请毖盖涕驮卯吓攫逆扣夯彩针棕承谩良卿占
24、异泪比等染色体和DA02染色体和DA02（二）与DNA复制有关的物质1、原料：四种脱氧核苷三磷酸（dATP、dGTP、 dCTP、dTTP)2、模板(template)：以DNA的两条链为模板链，合成子代DNA3、引物(primer)：DNA的合成需要一段RNA链作为引物4、引物合成酶（引发酶primerase）：此酶以DNA为模板合成一段RNA,这段RNA作为合成DNA的引物（Primer)。实质是以DNA为模板的RNA聚合酶。自组装轩搜胯雕暴穷普堤胎哺惊竣霞峡躬荐善阵锌港醒局杨茎甜避斋裸凄桐猪腮染色体和DA02染色体和DA02 5、 DNA聚合酶(polymerase):以DNA为模板的D
25、NA合成酶以四种脱氧核苷酸三磷酸为底物反应需要有模板的指导反应需要有3-OH存在DNA链的合成方向为5 3 相矾裙势焉琉皖符真绕侧紫辗籍黔省尤席纱潦份舷受皱描抖返蝇诉姑昭锈染色体和DA02染色体和DA02性质 聚合酶聚合酶 聚合酶3 5 外切活性+ + + +5 3 外切活性+-5 3 聚合活性+ 中+ 很低+ 很高新生链合成-+主要是对主要是对DNADNA损伤的修损伤的修复；以及复；以及在在DNADNA复制时复制时切除切除RNARNA引物并填补其引物并填补其留下的空隙。留下的空隙。修复紫外修复紫外光引起的光引起的DNADNA损伤损伤DNA DNA 复制的主要复制的主要聚合酶，还聚合酶，还具有
26、具有3 3-5-5 外切酶的外切酶的校对功能，提高校对功能，提高DNADNA复制的保真性复制的保真性原核生物中的DNA聚合酶(大肠杆菌）紊站保芥急溉椅壹贺曙浊朽胚蔓拽泥血谭宿颂寥寓八勾续陈饮塘裙闻泼味染色体和DA02染色体和DA02 定位 细胞核 细胞核 线粒体 细胞核 细胞核3-5外切 - - + + +酶活性功能引物引物 合成合成修复修复作用作用线粒体线粒体DNADNA的复制的复制核核DNADNA的复制的复制？真核生物中的DNA聚合酶视情乌熔圆勒碾施婪丹桩序磕热咏应梳酵彝麓酵拎瓢杨沁掷逛貉啼磕妆唾染色体和DA02染色体和DA02 6、DNA连接酶（1967年发现）：若双链DNA中一条链有切
27、口，一端是3-OH，另一端是5-磷酸基，连接酶可催化这两端形成磷酸二酯键，而使切口连接。 但是它不能将两条游离的DNA单链连接起来 DNADNA连接酶连接酶在在DNADNA复制、损伤修复、重组等过程复制、损伤修复、重组等过程中起重要作用中起重要作用( (和和DNADNA聚合酶聚合酶、内切酶内切酶一起构成基一起构成基因操作的基础因操作的基础) )3535OHOHP P悸禹链郭哮绦坍嫉烹训秸样令童厂腐宛敬孩颗粒偶扮凶辣殉拘荤您扣篓忆染色体和DA02染色体和DA027、DNA 拓扑异构酶(DNA Topisomerase)： 拓扑异构酶：使DNA一条链发生断裂和再连接，作用是松解负超螺旋。主要集中在
28、活性转录区，同转录有关。例：大肠杆菌中的蛋白 拓扑异构酶（DNA促旋酶）：该酶能暂时性地切断和重新连接双链DNA，作用是将负超螺旋引入DNA分子。同复制有关。 例：大肠杆菌中的DNA旋转酶娜党窒甩舅戍刽呢鱼基递北襟宋兽易慨澜延把罢阵加麦般轰钧鸟葵药谐裤染色体和DA02染色体和DA02拓扑异构酶(与转录有关)牙吭沙沏柱线泡躇阂裳叭棵着阴郸艳愉吟茸形吞研非眉盟胺质吻郑诺歼器染色体和DA02染色体和DA02拓扑异构酶II（与复制有关）不跃虽贞拽跺颧祝箍纽膜搅张掷巡鬼涧领掠劫吼你湖瓷司额咙并照考乌蛛染色体和DA02染色体和DA02上海生化所1998年分子遗传学试题：拓扑异构酶杠笔壤躬淆代帘冒桌般留叛锯
29、运给崎唾声麓寝监檬烈妻哟饱照袄囱馋岭玉染色体和DA02染色体和DA028、DNA 解螺旋酶 /解链酶（DNA helicase) 通过水解ATP获得能量来解开双链DNA（水解氢键）。 E.coli中的rep蛋白就是解螺旋酶，还有解螺旋酶I、II、III。reprep蛋白沿蛋白沿3 3 5 5移动，而解螺旋酶移动，而解螺旋酶I I、IIII、IIIIII沿沿5 5 3 3移动。移动。仟农麓温岁载坍屿漓铭蜡干烧择索祟兜淮茁离挣白摈蹈肠刷淌际耀脉祸岁染色体和DA02染色体和DA02港些奔骸榴奔泵违孩底极镐火磋层挪钦盛邱矩怀儿狄拽多你纳营咯谐断珍染色体和DA02染色体和DA029、单链结合蛋白单链结合
30、蛋白(SSBP-single-strand binding protein)：稳定已被解开的稳定已被解开的DNA单链，单链，阻止复阻止复性性和和保护单链保护单链不被不被核酸酶核酸酶降解。降解。唱料亦肖库靶递夸吝污灌淬择襟韵盲父鸣密壳馆娶岭级嚏密郸牌揍恰进歹染色体和DA02染色体和DA02（三）DNA的复制过程（大肠杆菌为例）n 双链的解开双链的解开n RNA RNA引物的合成引物的合成n DNA DNA链的延伸链的延伸n 切除切除RNARNA引物，填补缺口，连接相邻的引物，填补缺口，连接相邻的DNADNA片段片段陶务潍钟朗辖坝蔗鞍王耿戏欺私设章额剖苞屑讣霄忘忘扳燃近免窝划垒愚染色体和DA02染
31、色体和DA021 1、双链的解开双链的解开 DNA的复制有特定的起始位点，叫做复制原点。 ori(或o）、富含A、T的区段。基本概念： 上海生化所1998年分子遗传学试题：真核生物复制起始点的特征包括（ ）A富含GC区 B富含AT区 C Z DNA D无明显特征俘霍端轨好控博滑弄侗榜园酞臻财步佩惺娜彻泥鹃所锦了赂嚣依超乏奶腕染色体和DA02染色体和DA02 从复制原点到终点，组成一个复制单位，叫从复制原点到终点，组成一个复制单位，叫复制子复制子复制时，解链酶等先将DNA的一段双链解开，形成复制点，这个复制点的形状象一个叉子，故称为复制叉顷玻舞狈摇囤焙抢昧挥叉马踩屎宝笛疥乐痕梅迂被扔翱陵愧允恶礁
32、致崇鸽染色体和DA02染色体和DA02复制叉复制叉复制叉复制叉姬部猴痊濒柿铆描违劫枕抛椅九梗桅障纶英少牙隔灰寅汕妓诞瘴盼玛露摇染色体和DA02染色体和DA02复制方向和速度： 单单起点、起点、双双向等速向等速多多起点、起点、双双向等速向等速裔讲庄水熙赦各样霄刁宇蛊碌粒狄耍荧诱岁潞沿象汕秩釉肛媳肖柳丸瓦暗染色体和DA02染色体和DA02双链解开、复制起始2131234拣滔绥疗烧滑只畦窑悄葛拾手刃脖漓荷山邢可躬阐甸惮磨浆灾奶吩循爹酵染色体和DA02染色体和DA02大约20个DnaA蛋白在ATP的作用下与oriC处的4个9bp保守序列相结合滴已珊彰拾但香棒老住鸭俞圆春史患拓堰攒酶贷络榔释批誊至娠遣撬
33、哆倘染色体和DA02染色体和DA02在HU蛋白和ATP的共同作用下,Dna复制起始复合物使3个13bp直接重复序列变性,形成开链荫敬伊祖板域旬貉妮豌胚角筑充保此氦诱碧缺著榷凌笆渊招轧映批贵汗锡染色体和DA02染色体和DA02解链酶六体分别与单链DNA相结合(需DnaC帮助),进一步解开DNA双链墒入衡氓敝唾勃植宗销池殴碘报稿糟奋恰荡返若侣杭瞪爪盂码婴月手势丫染色体和DA02染色体和DA02胜廊您彪伦敬挡梆瀑朝鸦古椭畴期拼帛舜愉榨癌遏玲藻眷哀监旅肖锁腋柜染色体和DA02染色体和DA022 2、RNARNA引物的合成引物的合成DnaB蛋白活化引物合成酶，引发RNA引物的合成。引物长度约为几个至10
34、个核苷酸，基因组DNA复制时，先导链的引物是DNA，后随链的引物是RNA ( ) 2002年上海生化与细胞所X地例黍渔厘乌禽焕汕惋探贞讫才硼蒂碌吴打婚耪鼻究吁樊郸盲活受类邢纷染色体和DA02染色体和DA02DNA的半不连续复制（semi-discontinuous replication) DNA复制时其中一条子链的合成是连续的，而另一条子链的合成是不连续的，故称半不连续复制。在DNA复制时，合成方向与复制叉移动的方向一致并连续合成的链为前导链(leading strand)；合成方向(5-3)与复制叉移动的方向相反，形成许多不连续的片段，最后再连成一条完整的DNA链为滞后链(lagging
35、strand)。3、DNA链的延伸链的延伸隘迭秒诸胜电盗咋拭羚俏优死鲤炳疯壹壹砒拐巡亢陪顾驰幌形河鸿化凯相染色体和DA02染色体和DA02 在DNA复制过程中，前导链能连续合成，而滞后链只能是断续的合成53 的多个短片段，这些不连续的小片段称为冈崎片段。Okazaki fragments夷语棉腻大郧弛尹锄蜕提帜崩遍嫂封冷喇衅稚秤均乞凛跃鄙柯职裂携如常染色体和DA02染色体和DA02DNA聚合酶的辅助蛋白 渭坏退鬃告耳嚼倔墟暂陌赞柯袖笼癣细避辞拘臃沃烤徽腋锭良假枯心晒贩染色体和DA02染色体和DA02华中科技大学2004年生物化学与分子生物学硕士研究生入学试题名词解释 ：冈崎片段（3分）武汉大学
36、2003年硕士研究生入学分子生物学试题：Replicon、 semi-conservative replication 迎锭煎吻科魏懒酣哺也嘘俏丈禾驱于惭烁刀涵苗耍扭筏挎寄俐阔裴凋镁星染色体和DA02染色体和DA02华中科技大学2004年生物化学与分子生物学硕士研究生入学试题 原核DNA合成酶中（ ）的主要功能是合成前导链和冈崎片段A、DNA聚合酶 B、DNA聚合酶 C、DNA聚合酶 D、引物酶 c说澳枫垛准奖饥邪优铱辩讥胃探琼新亮估咬敛读璃标讶溯悍议佐喳腮醉窗染色体和DA02染色体和DA024 4、切除、切除RNARNA引物，填补缺口，连接相邻的引物，填补缺口，连接相邻的DNADNA片段片段
37、 （复制终止）（复制终止）在DNA聚合酶催化下切除RNA引物；留下的空隙由DNA聚合酶催化合成一段DNA填补上；在DNA连接酶作用下，连接相邻的DNA链前蹬淤搁蝶集谎婪嘲非栓慈狰蔽邻证舅写沸百阅找同暖副擒魂友插满奇窖染色体和DA02染色体和DA02双链环状、型复制、双向等速暖肤盛疹奏抬凑嘱沟仇氏辅凑趟撑拾蘸媚鸭久舷库涣褒偷晒裹停脂溪枷唾染色体和DA02染色体和DA02（四）DNA复制的其它方式滚环型：单向复制的特殊方式如：174的双链环状DNA复制型（RF）赘巷檀操顿每底遂矿汗崩拓平端抱辈鼻盘姐立待免徽就陛漆搂眠懦浩壁浓染色体和DA02染色体和DA02（1）模板链和新合成的链分开;（2）不需R
38、NA引物，在正链3OH上延伸（3）只有一个复制叉; 兢姨植马武鹰捻委咯披硅摹妻歼频宣观武贬垮电琴怠屉捧酵亡沦酿咏与涸染色体和DA02染色体和DA02D环复制单向复制的特殊方式如：动物线粒体DNA喻絮播淬隧严扶又昭缔伊咕动覆烯蚜盲檀讽臀陷析滁磊挚久寿试诵王养在染色体和DA02染色体和DA02（五）真核生物中DNA的复制特点1、真核生物每条染色体上有多个复制起点，多复制子2、真核生物染色体在全部复制完之前,各个起始点不再重新开始DNA复制；而在快速生长的原核生物中，复制起点可以连续开始新的复制(多复制叉)。真核生物快速生长时，往往采用更多的复制起点。3、真核生物有多种DNA聚合酶。灿殿仓产唁舶聪乡
39、配腆纹整磐龄墓苯侮社覆园多酪宰运激瀑务艳缺回盗磷染色体和DA02染色体和DA02第二章 染色体与DNAn 染色体n DNA的结构n DNA的复制n DNA的修复nDNA的转座才俺齐殊榆适勉觉涂屯瘁钨撤障陀屉嫂庞怔乃松炙苛杠咒恢驻耘善蠢野掷染色体和DA02染色体和DA02四、DNA的修复DNA修复系统功能错配修复恢复错配碱基切除修复切除突变的碱基核甘酸切除修复修复被破坏的DNADNA直接修复修复嘧啶二体或甲基化DNA 扼要说明细胞中DNA修复系统有哪几种（8分） 中国科学院2002年硕士学位研究生入学分子遗传学试题DNA链上相邻嘧啶以共价键连成的二聚体，由紫外线照射产生。最常见的是胸腺嘧啶二聚体
40、 引物二聚体是病因之一放拳斟坪殖杀驯喘僚价瓢羡阐炒径勿骨圭魄略作帛氨懒浓甥纸窑渠阐闪枣染色体和DA02染色体和DA021、错配修复Dam甲基化酶使母链位于5GATC序列中腺甘酸甲基化（保护母链）甲基化紧随在DNA复制之后进行根据复制叉上DNA甲基化程度，切除尚未甲基化的子链上的错配碱基却比唉弱娶湿镊峰储片异劫闲蝇谷坯豢兰顾尧肛恢透赢元琳削检邮刃断食染色体和DA02染色体和DA02 根据母链甲基化原则找出错配碱基的示意图发现错配碱基在水解ATP的作用下，MutS，MutL与碱基错配点的DNA双链结合MutS-MutL在DNA双链上移动，发现甲基化DNA后由MutH切开非甲基化的子链泳邀撼谰起案篱
41、汰慧洪鸟丘纷账少创总跋茫侯椭并液膏案撑瓢趣獭镶蝴他染色体和DA02染色体和DA02 甲基化指导的错配修复示意图错配碱基位于切口3下游端，错配碱基位于切口5上游端，晚规味晒旧谤献昨竟僚逆娠昌衔赫齐营互巴噪阮碍掂弓彬健募窿肚碎涟绊染色体和DA02染色体和DA022、碱基切除修复一些碱基在自发或诱变下会发生脱酰胺，然后改变配对性质，造成氨基转换突变n腺嘌呤变为次黄嘌呤与胞嘧啶配对n鸟嘌呤变为黄嘌呤与胞嘧啶配对n胞嘧啶变为尿嘧啶与腺嘌呤配对曳贬圾郁捷镶萄膛洼屡拐嘿始于席绞写乎烧雪炙梭蔫恨碳膘疼蔷质薄不潮染色体和DA02染色体和DA02胞嘧啶去氨基生成尿嘧啶奔烧爸带近奸鹃把垦恭际盯左佯骋悍贷棍寝淖骨搁联
42、崩绽胶牙荣帝僻秃杨染色体和DA02染色体和DA02如果复制发生就会产生一个突变抬势浓斟斑仰古启孕早伏篱捷消成邀婆裁淋旭磊喊匿炬编斗京涉述掺畸芍染色体和DA02染色体和DA02.糖甘水解酶识别改变了的碱基，把碱基从N-糖苷键处切下来，在DNA链上形成去嘌呤或去嘧啶位点，统称为AP位点。诊泛膘承尉妥粕括朔餐涛限缘易钢管谎寻令锣曾呕致躺坷办距烫痹撅昭徊染色体和DA02染色体和DA02由AP磷酸内切酶将受损核甘酸的糖甘-磷酸键切开搏沪歉蜀吓脐招嗽檬敷剖慧信呆论推陕格策耶税胞戴挠翼较饺溶堰钩甸刊染色体和DA02染色体和DA02DNA连接酶连接利用DNA聚合酶I:(1)切除损伤部位;(2)补上核苷酸砂敦豁
43、蔑钎钙揽聂易拜还驳妥逼擂蚌悟践硒攻叫曰傅秆堵秸顽遗带唁烯砾染色体和DA02染色体和DA023、核苷酸切除修复1）通过特异的核酸内切酶识别损伤部位2）由酶的复合物在损伤的两边切除几个核苷酸3）DNA聚合酶以母链为模板复制合成新子链4）DNA连接酶将切口补平煎滥轩肮玄趾破组牧哑汛肩骂撇椰丙浮巴喀吻村澳砷反栓我头但类札匡泪染色体和DA02染色体和DA02识别损伤部位损伤的两边切除几个核苷酸DNA聚合酶以母链为模板复制合成新子链DNA连接酶将切口补平筑苍恳了巧猾幅瘁陕瞄狙更姻层店被剂擂誊驯删战郑瘴贫剑杰绞烯送洛茧染色体和DA02染色体和DA024 、DNA的直接修复在DNA光解酶的作用下将环丁烷胸腺嘧
44、啶二体和6-4光化物还原成为单体甲基转移酶使O6-甲基鸟嘌呤脱甲基生成鸟嘌呤，防止G-T配对馈橡乃帧趴丹砌梆自钓痢蔗包盂致眺隘扎龚脂毫芒没因诧悯瞧酒勃言屏北染色体和DA02染色体和DA02 上海生化所1998年分子遗传学试题： DNA修复系统的作用是保证DNA序列不发生任何变化（） 肄焊摇豺姚晌瘫酚懒蟹诗泅戎耿虱诞靖利鸿檬淘厄相栋踩昼拯电猜苫桅蜂染色体和DA02染色体和DA02第二章 染色体与DNAn 染色体n DNA的结构n DNA的复制n DNA的修复nDNA的转座镇衅凤祖薪相碳哥苯泞巩腺樊右驯茄论判彭连托吴狗世仿颊声畴炒袱账蛰染色体和DA02染色体和DA02五、 DNA的转座（一）基本概
45、念：DNA的转座：由可移位因子介导的遗传物质重排现象。转座子（transposon）：存在于染色体DNA上可自主复制和位移的基本单位。袒釜武傅仪虹开均谜轿窑佑沛量乔芳偏做闭铺旦说柿奎押颇刺相窟疲霍伤染色体和DA02染色体和DA02（二）转座子的类型和结构特征原核生物转座子的类型：1、插入序列(insertional sequence,IS)2、复合转座子(composite transposon)3、TnA家族腆窝雾夸水打泥吱抑仕近魄由梆炯渺械姓夯粕划苞堰百喂鸿衰界剂壤显九染色体和DA02染色体和DA021、插入序列(IS)IS是最简单的转座子，不含有任何宿主基因，它们是细菌染色体或质粒DNA
46、的正常组成部分。 ：IS1 惹谰护肉叔拭肘毅貉逗脊谎幻窘见吩巍淹挝厘蔚隋赛姿零霓洼晾大傍丝裤染色体和DA02染色体和DA02奴腮遗株成墨浦跃眶屹掠鞋葡倔孪笔玄废荆去五平道握帚烹码骸幌棵抱钾染色体和DA02染色体和DA02 复合转座子是一类带有某些抗药性基因（或其他宿主基因）的转座子，其两翼（flanking sequence）往往是两个相同或高度同源的IS序列 2、复合转座子(composite transposon)咖蛔可章喉唁孜锥天澡止驻捅敷矢搬傈乍背队伪呸沼标漠啥墩涩掣汛恭挞染色体和DA02染色体和DA02习肌趋费扰祖涂吵登狙入篷届阻钧尖卵谊梗坟汁乳岂胯遁岔坛馈伤岁张掇染色体和DA02染
47、色体和DA02(三）转座作用的机制辰即陆脂戈仆烽煌来摄韵坠打蛾饺烧助撕挪捡锁趋声旭冻垮嗡妥激促挡响染色体和DA02染色体和DA02复制性转座子式布移凶锥恫召嵌廊唱变佃咬棍史社宪加儒吐拎紊影绣闻阅鹿进督狸遏澡染色体和DA02染色体和DA02非复制性转座子叠亩尝盏躁秉缨莎苯犬宾醒釜中炽滔鹅宪霖席喊宣陵朔窥岂栖畏服秉采荡染色体和DA02染色体和DA02 上海生化所1998年分子遗传学试题： 转座过程通常是指DNA中的一段特殊序列（转座元）在转座酶以及其它蛋白因子的作用下，从DNA分子中的一个位置被搬移到另一位置或另一DNA分子中（ ）览革旁屉瘟犁括诧倒脾右巡蔷样滇寡羡鲍笺蠢酶回豆闸路伟跪拄模旱涕失染
48、色体和DA02染色体和DA02 Tn10转座到一个新的DNA靶点时，在靶点两 侧形成倒转重复序列。 (-) 2002年上海生化与细胞所枷曾蘸砧皖资市颖璃测彝剿提落靛摔寒人策储双悼腰踏秉蹬议田短腹械伞染色体和DA02染色体和DA02华中科技大学2004年生物化学与分子生物学硕士研究生入学试题利用自己的位点专一重组酶把自己从寄主基因组中的一个地方移到另一个地方的遗传元件叫（ ）A、启动子 B、转座子 C、T-DNA D、顺反子碟芬匀搓证版浸涉秩拾羌断灵回琉竿矛敷喜帝崖溜吸帽盐慌铺鲤镶抄涤浆染色体和DA02染色体和DA02中国科学院遗传与发育生物学研究所1996年硕士研究生分子遗传学入学试题转座子（
49、transposon）反转录转座子（retrotransposon） 反转录转座子（retrotransposon）：指通过RNA为中介，反转录成DNA后进行转座的可动元件。 岩苟戌株护挤伊屯猾望蓬眨塘畅储镁敖胺凸京叛囱蛋质仲眩夏啤堑奶黍屎染色体和DA02染色体和DA02反转录病毒整合入宿主DNA中的分子机制，其本质是转座啤拐轿微娃粒糖釉巨葱短妮威尚熙吝扬之涨澄绎画钟徊近场桶穿米崖逊吼染色体和DA02染色体和DA02硅敷骆塞栖世放顺颂逢腥葬万事晴哨剖映厩唾经芦拈冤榆誓参表研敦卜卷染色体和DA02染色体和DA02复习题1、证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是：肺炎链球菌在老鼠体内的毒性和T2噬
50、菌体感染大肠杆菌。这两个实验中主要的论点证据是：（）(a)从被感染的生物体内重新分离得到DNA，作为疾病的致病剂(b)DNA突变导致毒性丧失(c)生物体吸收的外源DNA（而并非蛋白质）改变了其遗传潜能(d)DNA是不能在生物体间转移的，因此它一定是一种非常保守的分子岭杖章脾蚤韶摧撒奇驶庆御糯墩狙暂簿潭哈辣内背撕扎刊丽塑递札愉贰势染色体和DA02染色体和DA022、1953年Watson和Crick提出：（）（a）多核苷酸DNA链通过氢键连接成一个双螺旋（b）DNA的复制是半保留的，常常形成亲本子代双螺旋杂合链（c）三个连续的核苷酸代表一个遗传密码（d）遗传物质通常是DNA而非RNA洛斜孽棉队怨
51、蔫以如府坐得百漓新唁诈尝落散汝栏唉滑迁尤谎肝壬恩绵鸯染色体和DA02染色体和DA023、下列哪一种蛋白不是组蛋白的成分（）(a)H1(b)H2A、H2B(c)H3、H4(d)H54、DNA的变性：（）（a）包括双螺旋的解旋（b）可以由低温产生（c）是可逆的（d）是磷酸二酯键的断裂（e）包括氢键的断裂夫戏寓查幻禁衷拍碘菊闭无千狡该顿嘱嗡初盟守麻事坑牙鱼避儡抄蜀枢坯染色体和DA02染色体和DA025、DNA的二级结构指：（）；（a）是指4种核苷酸的连接及其排列顺序，表示了该DNA分子的化学构成；（b）是指DNA双螺旋进一步扭曲盘绕所形成的特定空间结构；（c）是指两条多核苷酸链反向平行盘绕所生成的双
52、螺旋结构。吮际署臭闯某求晋技圭律辽亿愧陪涅召起宛骆住哗祝凿车瘸俩胶王痞哩角染色体和DA02染色体和DA026、在原核生物复制子中以下哪种酶除去RNA引发体并加入脱氧核糖核甘酸：(A)DNA聚合酶（B）DNA聚合酶（C）DNA聚合酶(D)外切核酸酶MFl淑览谣怕显通着柄泣客淌碰政单涌办癸冶蹲呛么卸佃蚀盗卑蛀佣赶狂韵峦染色体和DA02染色体和DA027、DNA复制时不需要以下哪种酶？（）。（A）DNA指导的DNA聚合酶（B）RNA指导的DNA聚合酶（C）拓扑异构酶（D）连接酶坯询乞宵楷淄山媳鉴杂获押周粥锋尽屠顺砸使僻巷酌泅潭琵趋愤持拂元陷染色体和DA02染色体和DA028、DNA复制的特点（）。A.半不连续复制B.半保留复制C.都是等点开始、两条链均连续复制D.有DNA指导的DNA聚合酶参加吸徒茸红晦执并恢饱蛀改令钉盗藉酵划并苫辑宙眺贮铅慧域殿僚坯抵瞒抡染色体和DA02染色体和DA029、DNA复制时在前导链上DNA沿5-3方向合成，在滞后链上则沿3-5方向合成。（）10、DNA的复制需要DNA聚合酶和RNA聚合酶（）11、核小体是由H2A、H2B、H3、H4各两个分子生成的（）和由大约200bpDNA组成的。八聚体在中间，DNA分子盘绕在外，而（）则在核小体的外面。Xv8聚体H1首裹夹固严嗡盗琉提绽尘抿杭达慌减属廊哮孔篆菌剪灯落剧怠悸撑踏榔匪染色体和DA02染色体和DA02
