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1、第七章紫外第七章紫外- -可可见分光光度法分光光度法分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材学习目标学习目标u通过学习光谱分析法概论、紫外通过学习光谱分析法概论、紫外- -可见分光光度法可见分光光度法的基本原理、分光光度计的基本构造、降低测量误的基本原理、分光光度计的基本构造、降低测量误差的方法、常用的定性、定量方法等知识，了解光差的方法、常用的定性、定量方法等知识，了解光学分析法的知识体系，熟悉紫外学分析法的知识体系，熟悉紫外- -可见分光光度法可见分光光度法的实际应用，会用紫外的实际应用，会用紫外- -
2、可见分光光度计测定溶液可见分光光度计测定溶液的吸光度，并对有关物质进行定性定量分析，为学的吸光度，并对有关物质进行定性定量分析，为学习红外分光光度法、荧光分光光度法、核磁共振波习红外分光光度法、荧光分光光度法、核磁共振波谱法及药物分析课中有关药品的定性鉴别、杂质检谱法及药物分析课中有关药品的定性鉴别、杂质检查和含量测定方法奠定基础。查和含量测定方法奠定基础。 分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材知识要求知识要求1掌掌握握光光的的吸吸收收定定律律概概念念、表表达达式式及及条条件件，吸吸光光系系数数和和吸收
3、光谱的意义，常用定量分析方法的原理和应用。吸收光谱的意义，常用定量分析方法的原理和应用。2熟熟悉悉紫紫外外- -可可见见分分光光光光度度计计的的基基本本结结构构、吸吸光光度度测测量量条件的选择、偏离光的吸收定律的主要因素。条件的选择、偏离光的吸收定律的主要因素。3了了解解光光谱谱分分析析法法的的分分类类、紫紫外外- -可可见见吸吸收收光光谱谱的的产产生生机制、定性分析的依据和方法。机制、定性分析的依据和方法。分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材能力要求能力要求1. .能够用光的吸收定律解决定量计算问题能
4、够用光的吸收定律解决定量计算问题 。2. .能能 够够 绘绘 制制 吸吸 收收 光光 谱谱 曲曲 线线 ， 找找 出出 被被 测测 组组 分分 的的 最最 大吸收波长。大吸收波长。3. .能能够够绘绘制制标标准准曲曲线线，并并能能应应用用标标准准曲曲线线对对样样品品进进行定量分析。行定量分析。4. .会会使使用用常常见见的的紫紫外外- -可可见见分分光光光光度度计计测测定定溶溶液液的的吸光度。吸光度。 分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材案例导入 在在夏夏天天参参加加户户外外活活动动时时，如如果果天天气
5、气晴晴朗朗，就就应应该该注注意意保保护护皮皮肤肤，否否则则，暴暴露露在在火火辣辣辣辣太太阳阳之之下下的的皮皮肤肤，数数小小时时后后就就会会出出现现红红肿肿、瘙瘙痒痒、发发热热、刺刺痛痛症症状状，数数日日后后出出现现蜕蜕皮皮现现象象，这这表表明明太太阳阳光光中中有有一一种种光光线线能能伤伤害生物细胞。科学家研究证实，这种光线是紫外线。害生物细胞。科学家研究证实，这种光线是紫外线。 根根据据可可见见光光、紫紫外外光光与与物物质质分分子子的的相相互互作作用用建建立立了了紫外紫外- -可见分光光度法，可见分光光度法， 分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类
6、专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第一节 概述u根据待测物质（原子或分子）发射或吸收的电磁辐根据待测物质（原子或分子）发射或吸收的电磁辐射，以及待测物质与电磁辐射的相互作用而建立起射，以及待测物质与电磁辐射的相互作用而建立起来的定性、定量和结构分析方法，统称为光学分析来的定性、定量和结构分析方法，统称为光学分析法。法。 u利用光谱进行定性、定量和结构分析的方法称为光利用光谱进行定性、定量和结构分析的方法称为光谱分析法，简称光谱法。谱分析法，简称光谱法。 分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第一
7、节 概述一、物质对光的选择性吸收一、物质对光的选择性吸收单色光单色光: : 单一波长的光束单一波长的光束复色光复色光: : 含有多种波长的光束含有多种波长的光束电磁波谱电磁波谱: : 以波长大小顺序排列的电磁波谱图以波长大小顺序排列的电磁波谱图波长波长 10pm 300pm 200nm 400nm 800nm 500 m 1cm 1m光谱光谱 射线射线 X射线射线 紫外光紫外光 可见光可见光 红外光红外光 微波微波 无线电波无线电波方法方法 光谱法光谱法 分光光度法分光光度法 光谱法光谱法 核磁共振核磁共振 可可 见见 光光分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职
8、高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第一节 概述红光与绿光互补、紫光与黄光互补，等等。红光与绿光互补、紫光与黄光互补，等等。 白光的组成白光的组成 白光的色散白光的色散分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第一节 概述二、透光率与吸光度二、透光率与吸光度uI0Ia + It + Ir uI0Ia + It 分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第一节 概述u透射光透射光强度强度It与入射光强度与
9、入射光强度I0的比值称为透光率或透光的比值称为透光率或透光度度Tu透光率的负对数为吸光度透光率的负对数为吸光度A 分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第一节 概述三、吸收光谱曲线三、吸收光谱曲线 u概念：以波长概念：以波长为横坐标，吸光度为横坐标，吸光度A为纵坐标所描为纵坐标所描绘的曲线，称为吸收光谱曲线，简称吸收光谱。绘的曲线，称为吸收光谱曲线，简称吸收光谱。u特点：在相同条件下，同一物质的不同浓度的溶特点：在相同条件下，同一物质的不同浓度的溶液，其吸收光谱曲线相似，且液，其吸收光谱曲线相似，且max
10、相同。这是定相同。这是定性分析的基础。性分析的基础。分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第一节 概述吸收光谱曲线示意图吸收光谱曲线示意图 A480 520 560nm max=515分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第一节 概述四、紫外四、紫外- -可见分光光度的特点可见分光光度的特点特点特点灵敏度高灵敏度高准确度高准确度高精密度好精密度好选择性好选择性好易于普及易于普及应用广泛应用广泛仪器简单仪器简单操作简便
11、操作简便价格低廉价格低廉测定快速测定快速分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材课堂活动课堂活动1 1紫外紫外- -可见光的波长范围是可见光的波长范围是 A200400nm B400760nm C200760nm D360800nm2 2下列叙述错误的是下列叙述错误的是 A A光的能量与其波长成反比光的能量与其波长成反比 B B有色溶液越浓，对光的吸收也越强烈有色溶液越浓，对光的吸收也越强烈 C C物质对光的吸收有选择性物质对光的吸收有选择性 D D光的能量与其频率成反比光的能量与其频率成反比第一节 概述分
12、析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材课堂活动课堂活动3 3紫外紫外- -可见分光光度法属于可见分光光度法属于 A A原子发射光谱法原子发射光谱法 B B原子吸收光谱法原子吸收光谱法 C C分子发射光谱法分子发射光谱法 D D分子吸收光谱法分子吸收光谱法4 4分分子子吸吸收收可可见见- -紫紫外外光光后后，可可发发生生哪哪种种类类型型的的分分子能级跃迁子能级跃迁 A A转动能级跃迁转动能级跃迁 B B振动能级跃迁振动能级跃迁 C C电子能级跃迁电子能级跃迁 D D以上都能发生以上都能发生 第一节 概述分析化
13、学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第一节 概述点滴积累点滴积累1光光的的本本质质是是电电磁磁波波；物物质质对对光光的的吸吸收收具具有有选择性。选择性。2吸光度与透光率的关系是吸光度与透光率的关系是 :3吸吸收收曲曲线线是是溶溶液液在在一一定定条条件件下下的的吸吸光光度度随随入射光波长变化而变化的曲线。入射光波长变化而变化的曲线。 分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第二节 紫外-可见分光光度法的基本原理一、光的吸收定
14、律一、光的吸收定律 u当一束平行的单色光通过均匀、无散射的含有吸光性当一束平行的单色光通过均匀、无散射的含有吸光性物质的溶液时，在入射光的波长、强度及溶液的温度物质的溶液时，在入射光的波长、强度及溶液的温度等条件不变的情况下，该溶液的吸光度等条件不变的情况下，该溶液的吸光度A与溶液的浓与溶液的浓度度c及液层厚度及液层厚度L的乘积成正比，即：的乘积成正比，即： AKL c 。 称为光的吸收定律（朗伯称为光的吸收定律（朗伯-比尔定律）。比尔定律）。u光的吸收定律是定量分析的理论依据。光的吸收定律是定量分析的理论依据。分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品
15、类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材u朗朗伯伯- -比比尔尔定定律律不不仅仅适适用用于于可可见见光光，而而且且也也适适用用于于紫紫外外光光和和红红外外光光；不不仅仅适适用用于于均均匀匀、无无散散射射的的溶溶液液，而而且也适用于均匀、无散射的固体和气体且也适用于均匀、无散射的固体和气体。u实实验验证证明明：溶溶液液对对光光的的吸吸光光度度具具有有加加和和性性。如如果果溶溶液液中中同同时时存存在在两两种种或或两两种种以以上上的的吸吸光光性性物物质质，则则测测得得的的该该溶溶液液的的吸吸光光度度等等于于溶溶液液中中各各吸吸光光性性物物质质吸吸光光度度的的总总和，即：和，即：A（a+b+c）
16、AaAbAc 第二节 紫外-可见分光光度法的基本原理分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材课堂活动课堂活动 某某化化合合物物溶溶液液遵遵守守光光的的吸吸收收定定律律，当当浓浓度度为为c c时时，透透光光率率为为T T，试试计计算算：当当浓浓度度为为0.50.5c c、2 2c c时所对应的透光率。时所对应的透光率。 第二节 紫外-可见分光光度法的基本原理分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第二节 紫外-可见分光光度
17、法的基本原理二、吸光系数二、吸光系数 u摩尔吸光系数：在入射光波长一定时，溶液浓度摩尔吸光系数：在入射光波长一定时，溶液浓度为为1 mol/L，液层厚度为液层厚度为1cm时所测得的吸光度称时所测得的吸光度称为摩尔吸光系数，常用为摩尔吸光系数，常用表示表示 。 u光吸收系数光吸收系数 在入射光波长一定时，溶液浓度为在入射光波长一定时，溶液浓度为1g/L1g/L，液层厚度为，液层厚度为1cm1cm时的吸光度，称为光吸收系时的吸光度，称为光吸收系数，常用表示，其量纲为数，常用表示，其量纲为L/(gcm)L/(gcm)。 分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品
18、品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第二节 紫外-可见分光光度法的基本原理u百分吸光系数：在入射光波长一定时，溶液浓度百分吸光系数：在入射光波长一定时，溶液浓度为为1 （W/V）、）、层厚度为层厚度为1cm时所测得的吸光度时所测得的吸光度称为百分吸光系数，常用称为百分吸光系数，常用 表示表示。 二者的关系：二者的关系： 分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材 课堂活动课堂活动用用双双硫硫腙腙测测定定CdCd2+2+溶溶液液的的吸吸光光度度A A时时，CdCd2+2+（CdCd的的原原子子量量为
19、为112112）的的浓浓度度为为140140g/Lg/L，在在525525nmnm波波长长处处，用用L L1cm1cm的的吸吸收收池池，测测得得吸吸光光度度A A0.2200.220，试试计计算算摩摩尔尔吸吸光光系系数数和百分吸收系数。和百分吸收系数。 第二节 紫外-可见分光光度法的基本原理分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材课堂互动课堂互动某某有有色色溶溶液液的的物物质质的的量量浓浓度度浓浓度度为为c c，在在一一定定条条件件下下用用1 1cmcm比色杯测得吸光度为比色杯测得吸光度为A A，则摩尔吸光
20、系数应为：则摩尔吸光系数应为： A AcAcA B BcMcM C CA/C DA/C DC/A C/A 第二节 紫外-可见分光光度法的基本原理分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第二节 紫外-可见分光光度法的基本原理三、偏离光的吸收定律的主要因素三、偏离光的吸收定律的主要因素u化学因素化学因素:(1)溶液的浓度溶液的浓度 (2)物质的化学变化物质的化学变化 (3)溶剂的影响溶剂的影响 u光学因素光学因素:(1)非单色光非单色光 (2)杂散光杂散光 (3)非平行光非平行光 (4)反射现象反射现象 (5)
21、散射现象散射现象分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第二节 紫外-可见分光光度法的基本原理偏离光的吸收定律示意图偏离光的吸收定律示意图分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第二节 紫外-可见分光光度法的基本原理点滴积累点滴积累1 1光的吸收定律表明了吸光度与液层厚度和光的吸收定律表明了吸光度与液层厚度和浓度之间的关系，它是吸收光谱法定量分析的浓度之间的关系，它是吸收光谱法定量分析的依据。依据。2 2吸光系数的表示方
22、法有多种，随待测溶液吸光系数的表示方法有多种，随待测溶液浓度的不同标度而不同。浓度的不同标度而不同。3 3偏离光的吸收定律的因素主要有化学因素偏离光的吸收定律的因素主要有化学因素和光学因素。和光学因素。 分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第三节 紫外-可见分光光度计一、紫外一、紫外- -可见分光光度计的主要部件：可见分光光度计的主要部件：光源光源单色器单色器吸收池吸收池检测器检测器讯号处理与显示器讯号处理与显示器 分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业
23、卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第三节 紫外-可见分光光度计 二、紫外二、紫外- -可见分光光度计的光学性能可见分光光度计的光学性能1测光方式 2波长范围 3狭缝或光谱带宽 4杂散光 5波长准确度 6吸光度范围 7波长重复性 8测光准确度 9光度重复性 10分辨率 分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第三节 紫外-可见分光光度计 三、紫外三、紫外- -可见分光光度计的类型可见分光光度计的类型1.1.可见分光光度计可见分光光度计 721721型型 分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李
24、维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第三节 紫外-可见分光光度计 三、紫外三、紫外- -可见分光光度计的类型可见分光光度计的类型1.1.可见分光光度计可见分光光度计 722722型型分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第三节 紫外-可见分光光度计三、紫外三、紫外- -可见分光光度计的类型可见分光光度计的类型2.2.紫外紫外- -可见分光光度计可见分光光度计 （1 1）单波长分光光度计）单波长分光光度计 单光束分光光度计单光束分光光度计 双光束分光光度计双光束分光
25、光度计 分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第三节 紫外-可见分光光度计分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材课堂活动课堂活动 1.1.试述紫外试述紫外- -可见分光光度计的主要部件可见分光光度计的主要部件及其作用？及其作用？ 2.2.紫外紫外- -可见分光光度计有哪些类型？可见分光光度计有哪些类型？第三节 紫外-可见分光光度计分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业
26、卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第三节 紫外-可见分光光度计点滴积累点滴积累u紫外紫外- -可见分光光度计的基本结构相同，都可见分光光度计的基本结构相同，都由光源、单色器、吸收池、检测器、讯号处由光源、单色器、吸收池、检测器、讯号处理与显示器等主要部件构成，但不同型号仪理与显示器等主要部件构成，但不同型号仪器的外形差别很大，质量和价格相差悬殊，器的外形差别很大，质量和价格相差悬殊，操作方法迥异，使用之前应仔细阅读仪器使操作方法迥异，使用之前应仔细阅读仪器使用说明书。用说明书。 分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二
27、五”规划教划教材材第四节 分析条件的选择一、仪器测量条件的选择一、仪器测量条件的选择 1.1.应选择最大吸收波长作为入射光。应选择最大吸收波长作为入射光。 2.2.应控制吸光度读数范围：应控制吸光度读数范围： 吸光度在吸光度在0.20.7之间；之间； 透光率在透光率在20%65%之间。之间。 分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第四节 分析条件的选择二、显色反应条件的选择二、显色反应条件的选择1.1.对显色剂及显色反应的要求对显色剂及显色反应的要求 2.2.控制合适的显色反应条件控制合适的显色反应条件
28、三、参比溶液的选择三、参比溶液的选择1.溶剂参比溶液溶剂参比溶液 2.试样参比溶液试样参比溶液 3.试剂参比溶液试剂参比溶液 4.平行操作参比溶液平行操作参比溶液 分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第四节 分析条件的选择课堂活动课堂活动uu测定试样时，吸光度的读数应控制在测定试样时，吸光度的读数应控制在0.20.7范围内。若吸光度读数不在此范围，可范围内。若吸光度读数不在此范围，可采用哪些方法进行调整采用哪些方法进行调整?分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品
29、品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第四节 分析条件的选择点滴积累点滴积累 1 1选择吸光性物质的最大吸收波长作为测定波选择吸光性物质的最大吸收波长作为测定波长。长。 2 2使用紫外使用紫外- -可见分光光度计时，读数范围应可见分光光度计时，读数范围应控制在吸光度为控制在吸光度为0.20.20.70.7，透光率为，透光率为65% 65% 20%20%之之间。间。 3 3待测物质在紫外待测物质在紫外- -可见光区无吸收时，应加可见光区无吸收时，应加显色剂。显色剂不得有干扰，反应必须完全。显色剂。显色剂不得有干扰，反应必须完全。 4 4一般用溶剂作参比溶液。必要时采用试样参一般用溶剂作
30、参比溶液。必要时采用试样参比溶液、试剂参比溶液或平行操作参比溶液。比溶液、试剂参比溶液或平行操作参比溶液。 分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第五节 定性定量方法一、定性分析方法一、定性分析方法定性的基本依据：比较光谱的一致性。定性的基本依据：比较光谱的一致性。u未知物和标准品的吸收光谱曲线，对比二者是否一致。未知物和标准品的吸收光谱曲线，对比二者是否一致。 u比较吸收光谱的特征数据及比值的一致性。比较吸收光谱的特征数据及比值的一致性。二、杂质检查：二、杂质检查： 将药品光谱与药品标准光谱相对照，利用
31、杂质的特将药品光谱与药品标准光谱相对照，利用杂质的特征吸收，可以检测出微量杂质及其含量。征吸收，可以检测出微量杂质及其含量。 分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材案例分析案例分析贝诺酯的定性鉴别贝诺酯的定性鉴别中中国国药药典典(20(201010年年版版) )规规定定：贝贝诺诺酯酯加加无无水水乙乙醇醇制制成成每每1 1mlml约约含含7.57.5g的的溶溶液液，在在240240nmnm处处有有最最大大吸吸收收，相相应应的百分吸光系数的百分吸光系数( )( )应为应为730730760760。维维生生素素
32、B B1212也也有有三三个个吸吸收收峰峰，分分别别在在278278nmnm、361nm361nm、550nm550nm波波长长处处，它它们们的的吸吸光光度度比比值值应应为为：A A361nm361nm/ /A A278nm278nm在在1.701.701.881.88之间，之间，A A361nm361nm/ /A A550nm550nm在在3.153.153.453.45之间。之间。 第五节 定性定量方法分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材案例分析案例分析葡葡萄萄糖糖注注射射液液是是临临床床上上常常用
33、用的的药药品品之之一一。制制备备时时需需要要高高温温灭灭菌菌，葡葡萄萄糖糖会会转转化化为为5-5-羟羟甲甲基基糠糠醛醛而而引引入入杂杂质质。中中国国药药典典（20102010年年版版）规规定定葡葡萄萄糖糖注注射射液液在在284nm284nm波波长长处处的的吸吸收收度度不不得得过过0.320.32，以以此此控控制制其其杂杂质质5-5-羟甲基糠醛的量。羟甲基糠醛的量。在在284nm284nm波波长长处处，葡葡萄萄糖糖无无吸吸收收，而而杂杂质质5-5-羟羟甲甲基基糠糠醛醛在在此此波波长长处处有有最最大大吸吸收收，可可以以通通过过控控制制供供试试品品溶溶液液在此波长处的吸收度来控制杂质的含量。在此波长
34、处的吸收度来控制杂质的含量。 第五节 定性定量方法分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第五节 定性定量方法三、定量分析方法三、定量分析方法定量分析的依据定量分析的依据: : AK c L（光的吸收定律）（光的吸收定律）（一）单组分溶液的定量方法（一）单组分溶液的定量方法 1. 标准曲线法：标准曲线法： 是紫外是紫外- -可见分光光度法中最可见分光光度法中最经典的定量方法。经典的定量方法。 分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规
35、划教划教材材第五节 定性定量方法u标准曲线法标准曲线法的方法和步骤如下的方法和步骤如下:（1 1）配配制制一一系系列列不不同同浓浓度度的的标标准准溶溶液液，选选择择合合适适的的参参比比溶溶液液，在在相相同同条条件件下下，以以待待测测组组分分的的最最大大吸吸收收波波长长 作作为为入入射射光光，分分别别测测定定各各标标准准溶溶液液对应的吸光度。对应的吸光度。（2 2）以以浓浓度度c c为为横横坐坐标标、吸吸光光度度A A为为纵纵坐坐标标描描绘绘标标准曲线。准曲线。分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第五节
36、定性定量方法 （3 3）按按照照相相同同的的实实验验条条件件和和操操作作程程序序，用用待待测测溶溶液液配配制制未未知知试试样样溶溶液液并并测测定定其其吸吸光光度度A A样，在在标标准准曲曲线线上上找找到到与与之之对对应应的的未未知知试试样样溶溶液液的的浓浓度度c c样 。 如右图。 分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第五节 定性定量方法2.标准对比法标准对比法: 在在相相同同的的条条件件下下，配配制制浓浓度度为为cs的的标标准准溶溶液液和和浓浓度度为为cx的的试试样样溶溶液液，在在最最大大吸吸收收波波
37、长长处处，分分别别测测定定二二者者的的吸吸光光度度值值为为As、Ax ，依依据据朗朗伯伯- -比比尔尔定律得：定律得：As=csLAx=cxL 则则: :分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第五节 定性定量方法3.吸光系数法吸光系数法: 吸吸光光系系数数法法直直接接利利用用朗朗伯伯- -比比尔尔定定律律的的数数学学表表达达式式AKcL进进行行计计算算的的定定量量分分析析方方法法。在在手手册册中中查查出出待待测测物物质质在在最最大大吸吸收收波波长长 处处的的吸吸光光系系数数 或或 , ,并并在在相相同同条
38、条件件下下测测量量样品溶液的吸光度样品溶液的吸光度A，则其浓度为：，则其浓度为： 或或分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第五节 定性定量方法有有时时也也可可以以将将待待测测样样品品溶溶液液的的吸吸光光度度换换算算成成样样品品组组分分的的吸吸光光系系数数，计计算算与与标标准准品品的的吸吸光光系系数数的的比比值，求出样品中待测组分的质量分数。值，求出样品中待测组分的质量分数。 或或分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材
39、材第五节 定性定量方法实实例例：维维生生素素B12水水溶溶液液在在 =361nm处处的的百百分分吸吸光光系系数数 =207。取取维维生生素素B12样样品品30.0mg，加加纯纯化化水水溶溶解解，用用1L的的容容量量瓶瓶定定容容。将将溶溶液液盛盛于于1cm的的吸吸收收池池，测测得得361nm波波长长处处的的吸吸光光度度A=0.600，试试求求样样品品中中维维生生素素B12的质量分数。的质量分数。 解：解：分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第五节 定性定量方法 （二）二元组分溶液的定量方法（二）二元组分溶
40、液的定量方法 1. 1. 解联立方程组法解联立方程组法 当当试试样样溶溶液液中中各各待待测测组组分分相相互互干干扰扰不不太太严严重重时时，可可根根据据吸吸光光度度具具有有加加和和性性的的特特点点，在在同同一一试试样样溶溶液液中中同同时时测测定定两两个个或或两两个个以以上上的的待待测测组组分分。假假设设要要测测定定试试样样中中有有两两个个待待测测组组分分a a和和b b，如如果果分分别别绘绘制制a a、b b两个纯物质的吸收光谱，则有三种情况。两个纯物质的吸收光谱，则有三种情况。 分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规
41、划教划教材材第五节 定性定量方法分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第五节 定性定量方法（）表表明明，两两个个待待测测组组分分在在各各自自的的最最大大吸吸收收波波长长处处，另另一一组组分分没没有有吸吸收收，可可以以用用测测定定单单组组分分溶溶液液的的方方法法，分分别别在在1 1和和2 2波波长长处处测测定定组组分分a a、b b的的吸吸收收度度, , 由由光光的的吸收定律求得吸收定律求得c ca a、c cb b。测定时两组分互不干扰。测定时两组分互不干扰。（）表表明明，在在组组分分a a的的最最大大吸
42、吸收收波波长长1 1处处，组组分分b b对对组组分分a a的的测测定定无无干干扰扰，而而在在组组分分b b的的最最大大吸吸收收波波长长2 2处处，组组分分a a对对组组分分b b的的测测定定有有干干扰扰。这这时时，先先在在1 1波波长长处处单单独独测测量量组组分分a a；然然后后在在2 2波波长长处处测测量量组组分分a a、b b的的总总吸吸光度，根据吸光度的加和性，从而可以求出光度，根据吸光度的加和性，从而可以求出c cb b。 分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第五节 定性定量方法（）表表明明，两
43、两个个待待测测组组分分彼彼此此相相互互干干扰扰，此此时时，在在波波长长1 1和和2 2处处分分别别测测定定试试样样溶溶液液的的总总吸吸光光度度 及及 ，同同时时测测定定a a、b b纯纯物物质质的的吸吸光光系系数数 、 和和 、 ，根根据据吸吸光光度度的的加加和和性性，则则由由联联立立方方程程组求得组求得c ca a、c cb b。 分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第五节 定性定量方法2.2.等吸收波长消去法（双波长分光光度法）等吸收波长消去法（双波长分光光度法）当当试试样样中中两两个个待待测测组组
44、分分的的相相互互干干扰扰比比较较严严重重时时，用用解解联联立立方方程程组组的的方方法法进进行行定定量量分分析析会会产产生生较较大大的的误误差差，这这时时可可以以用用等等吸收波长消去法进行测定。吸收波长消去法进行测定。 在在试试样样中中含含有有两两个个待待测测组组分分a a和和b b时时，若若要要测测定定组组分分b b，组组分分a a有有干干扰扰，应应设设法法消消除除组组分分a a的的吸吸收收干干扰扰。首首先先选选择择待待测测组组分分b b的的最最大大吸吸收收波波长长2 2作作为为测测量量波波长长，然然后后用用作作图图的的方方法法选选择择参参比波长比波长1 1，使组分使组分a a在这两个波长处的
45、吸光度相等。在这两个波长处的吸光度相等。 分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第五节 定性定量方法试试样样溶溶液液在在2 2和和1 1两两个个波波长长处处的的吸吸光光度度之之差差，只只与与待待测测组组分分b b（ a a）的的浓浓度度成成正正比比，而而与与干干扰扰组分的浓度无关。组分的浓度无关。分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材3.3.差示分光光度法差示分光光度法当当待待测测组组分分含含量量过过高高时时，吸吸光
46、光度度超超出出了了准准确确测测量量的的读读数数范范围围，可可以以采采用用差差示示分分光光光光度度法法。具具体体方方法法是是用用一一个个比比试试样样溶溶液液浓浓度度稍稍低低的的标标准准溶溶液液作作为为参参比比溶溶液液，将将分分光光光光度度计计调调零零（透透光光率率100%100%），测测得得的的吸吸光光度度就就是是被被测测试试样样溶溶液液试试液液与与参参比比溶溶液液的的吸吸光光度度差差值值（相相对对吸吸光光度度）。根根据据光光的的吸吸收收定定律得：律得： A AA Ax xA As sLL( (c cx xc cs s) ) 即即：待待测测溶溶液液与与参参比比溶溶液液的的吸吸光光度度差差值值与与
47、两两溶溶液液的浓度之差成正比。的浓度之差成正比。 第五节 定性定量方法分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第五节 定性定量方法课堂活动课堂活动1.在紫外在紫外-可见分光光度法中，影响吸光系数的因素是可见分光光度法中，影响吸光系数的因素是 A溶剂的种类和性质溶剂的种类和性质 B溶液的物质量浓度溶液的物质量浓度 C物质的本性和光的波长物质的本性和光的波长 D吸收池大小吸收池大小 E待测物的分子结构待测物的分子结构2.紫外紫外-可见分光光度法常用的定量分析方法有可见分光光度法常用的定量分析方法有 A间接滴定法
48、间接滴定法 B标准对比法标准对比法 C标准曲线法标准曲线法 D直接电位法直接电位法 E吸光系数法吸光系数法分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第五节 定性定量方法课堂互动课堂互动3 3在在符符合合朗朗伯伯- -比比尔尔定定律律的的条条件件下下，有有色色物物质质的的浓浓度度、最大吸收波长、吸光度三者的关系是最大吸收波长、吸光度三者的关系是 A A增加、增加、增加增加、增加、增加 B B增加、减小、不变增加、减小、不变 C C减小、增加、减小减小、增加、减小 D D减小、不变、减小减小、不变、减小4 4维生
49、素维生素D D2 2的摩尔吸收系数的摩尔吸收系数 264264nmnm=18200=18200。用用2.02.0cmcm吸吸收池测定，如果要控制吸光度收池测定，如果要控制吸光度A A在在0.6990.6990.1870.187范范围内，应使维生素围内，应使维生素D D2 2溶液的浓度在什么范围内？溶液的浓度在什么范围内？分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第五节 定性定量方法点滴积累（点滴积累（1 1）紫外紫外- -可见分光光度法的各种定量方法的优缺点：可见分光光度法的各种定量方法的优缺点： 1 1标准
50、曲线法的优点：测定大批量样品时，操作简单标准曲线法的优点：测定大批量样品时，操作简单、准确、快速。缺点：不同人处理相同的测量数据，得到、准确、快速。缺点：不同人处理相同的测量数据，得到的结果不易完全相同。的结果不易完全相同。 2 2标准对比法的优点：测量数据相同，任何人都能得标准对比法的优点：测量数据相同，任何人都能得到完全一致的结果。缺点：随机误差较大。到完全一致的结果。缺点：随机误差较大。 3 3吸光系数法的优点：与标准对比法的优点相同。吸光系数法的优点：与标准对比法的优点相同。 缺点：测定条件不易与文献完全一致，从而引入误差。缺点：测定条件不易与文献完全一致，从而引入误差。 分析化学（第
51、分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第五节 定性定量方法点滴积累（点滴积累（2 2）紫外紫外- -可见分光光度法的各种定量方法的优缺点：可见分光光度法的各种定量方法的优缺点： 4 4解联立方程组法的优点：可以不经分离直接测定二解联立方程组法的优点：可以不经分离直接测定二元组分溶液。缺点：在两个测定波长处，要求两个组分的元组分溶液。缺点：在两个测定波长处，要求两个组分的吸光系数有较大的差别。吸光系数有较大的差别。 5 5等吸收波长消去法的优点：可以不经分离直接测定等吸收波长消去法的优点：可以不经分离直接测定二元组分溶
52、液，还适于测定混浊液的测定。缺点：要求干二元组分溶液，还适于测定混浊液的测定。缺点：要求干扰组分的吸收光谱中有一个峰或谷。扰组分的吸收光谱中有一个峰或谷。 6 6差示分光光度法的优点：可以直接测定高浓度溶液差示分光光度法的优点：可以直接测定高浓度溶液。缺点：需要用高精密度的仪器。缺点：需要用高精密度的仪器。 分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第六节第六节 紫外紫外-可见吸收光谱在有机化合物结构分析中的应用简介可见吸收光谱在有机化合物结构分析中的应用简介一、有机化合物的紫外一、有机化合物的紫外- -可见
53、吸收光谱可见吸收光谱 有机化合物的紫外有机化合物的紫外- -可见吸收光谱主要是由分子中价电子的能可见吸收光谱主要是由分子中价电子的能级跃迁而产生的。级跃迁而产生的。 电子的能级跃迁有电子的能级跃迁有4 4个基本类型。个基本类型。分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第六节第六节 紫外紫外-可见吸收光谱在有机化合物结构分析中的应用简介可见吸收光谱在有机化合物结构分析中的应用简介二、根据紫外二、根据紫外- -可见吸收光谱推断官能团可见吸收光谱推断官能团 三、根据紫外三、根据紫外- -可见吸收光谱推断异构体可见
54、吸收光谱推断异构体（一）判别顺反异构体（一）判别顺反异构体 （二）测定某些化合物的互变异构现象（二）测定某些化合物的互变异构现象 分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第六节第六节 紫外紫外-可见吸收光谱在有机化合物结构分析中的应用简介可见吸收光谱在有机化合物结构分析中的应用简介点滴积累点滴积累 1 1紫外紫外- -可见吸收光谱是化合物的价电子能可见吸收光谱是化合物的价电子能级跃迁形成的。级跃迁形成的。 2 2根据紫外根据紫外- -可见吸收光谱的光谱特征，可可见吸收光谱的光谱特征，可以推断待测化合物的官能
55、团、顺反异构和互变异构。以推断待测化合物的官能团、顺反异构和互变异构。 分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第六节第六节 紫外紫外-可见吸收光谱在有机化合物结构分析中的应用简介可见吸收光谱在有机化合物结构分析中的应用简介一、选择题一、选择题（一）单项选择题（一）单项选择题1紫外紫外-可见光的波长范围是：可见光的波长范围是：A. 200400nm B400760nm C200760nm D360800nm2下列叙述错误的是：下列叙述错误的是：A光的能量与其波长成反比光的能量与其波长成反比 B有色溶液越浓，
56、对光的吸收也越强烈有色溶液越浓，对光的吸收也越强烈C物质对光的吸收有选择性物质对光的吸收有选择性 D光的能量与其频率成反比光的能量与其频率成反比 【目标检测目标检测】分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第六节第六节 紫外紫外-可见吸收光谱在有机化合物结构分析中的应用简介可见吸收光谱在有机化合物结构分析中的应用简介3 3紫外紫外- -可见分光光度法属于：可见分光光度法属于： A A原子发射光谱原子发射光谱 B B原子吸收光谱原子吸收光谱 C C分子发射光谱分子发射光谱 D D分子吸收光谱分子吸收光谱4 4
57、分分子子吸吸收收紫紫外外- -可可见见光光后后，可可发发生生哪哪种种类类型型的的分分子能级跃迁：子能级跃迁： A A转动能级跃迁转动能级跃迁 B B振动能级跃迁振动能级跃迁 C C电子能级跃迁电子能级跃迁 D D以上都能发生以上都能发生 分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第六节第六节 紫外紫外-可见吸收光谱在有机化合物结构分析中的应用简介可见吸收光谱在有机化合物结构分析中的应用简介5某某有有色色溶溶液液的的摩摩尔尔浓浓度度为为c，在在一一定定条条件件下下用用1cm比色杯测得吸光度为比色杯测得吸光度为A
58、，则摩尔吸光系数为：，则摩尔吸光系数为： AcA BcM C D 6某某吸吸光光物物质质的的摩摩尔尔质质量量为为M，其其摩摩尔尔吸吸收收系系数数 与与比吸收系数的换算关系是比吸收系数的换算关系是 A M B /M C M/10 D /M10分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第六节第六节 紫外紫外-可见吸收光谱在有机化合物结构分析中的应用简介可见吸收光谱在有机化合物结构分析中的应用简介7关于光的性质，描述正确的是：关于光的性质，描述正确的是： A光具有波粒二象性光具有波粒二象性 B光具有发散性光具有发散
59、性 C光具有颜色光具有颜色 D本质是单色光本质是单色光8某吸光物质的吸光系数很大，则表明：某吸光物质的吸光系数很大，则表明： A该物质溶液的浓度很大该物质溶液的浓度很大 B测定该物质的灵敏度高测定该物质的灵敏度高 C入射光的波长很大入射光的波长很大 D该物质的分子量很大该物质的分子量很大分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第六节第六节 紫外紫外-可见吸收光谱在有机化合物结构分析中的应用简介可见吸收光谱在有机化合物结构分析中的应用简介9相相同同条条件件下下，测测定定甲甲、乙乙两两份份同同一一有有色色物物质
60、质溶溶液液的的吸吸光光度度。若若甲甲溶溶液液1cm吸吸收收池池，乙乙溶溶液液2cm吸吸收收池池进进行行测测定定，结结果果吸吸光光度度相相同同，甲、乙两溶液浓度的关系：甲、乙两溶液浓度的关系： Ac甲甲c乙乙 Bc乙乙4 c甲甲 Cc甲甲2c乙乙 Dc乙乙2 c甲甲 10在在符符合合光光的的吸吸收收定定律律条条件件下下，有有色色物物质质的的浓浓度度、最最大大吸吸收收波波长长、吸光度三者的关系是：吸光度三者的关系是： A增加、增加、增加增加、增加、增加 B增加、减小、不变增加、减小、不变 C减小、增加、减小减小、增加、减小 D减小、不变、减小减小、不变、减小 分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢
61、庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第六节第六节 紫外紫外-可见吸收光谱在有机化合物结构分析中的应用简介可见吸收光谱在有机化合物结构分析中的应用简介11吸吸收收曲曲线线是是在在一一定定条条件件下下以以入入射射光光波波长长为为横横坐坐标标、吸吸光度为纵坐标所描绘的曲线，又称为：光度为纵坐标所描绘的曲线，又称为： A工作曲线工作曲线 BA-曲线曲线 CA-c曲线曲线 D滴定曲线滴定曲线 12 标标准准曲曲线线是是在在一一定定条条件件下下以以吸吸光光度度为为横横坐坐标标、浓浓度度为为纵坐标所描绘的曲线，也可称为：纵坐标所描绘的曲线，也可称为： A
62、A-曲线曲线 BA-c曲线曲线 C滴定曲线滴定曲线 DE-V曲线曲线 分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第六节第六节 紫外紫外-可见吸收光谱在有机化合物结构分析中的应用简介可见吸收光谱在有机化合物结构分析中的应用简介13紫外紫外-可见分光光度计的基本结构可分为：可见分光光度计的基本结构可分为： A二个部分二个部分 B三个部分三个部分 C四个部分四个部分 D五个部分五个部分14722型分光光度计的比色皿的材料为：型分光光度计的比色皿的材料为： A石英石英 B卤族元素卤族元素 C硬质塑料硬质塑料 D光学玻
63、璃光学玻璃 分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第六节第六节 紫外紫外-可见吸收光谱在有机化合物结构分析中的应用简介可见吸收光谱在有机化合物结构分析中的应用简介15紫外紫外-可见分光光度法定量分析的理论依据是：可见分光光度法定量分析的理论依据是： A吸收曲线吸收曲线 B吸光系数吸光系数 C光的吸收定律光的吸收定律 D能斯特方程能斯特方程 16下列说法正确的是：下列说法正确的是： A吸收曲线与物质的性质无关吸收曲线与物质的性质无关 B吸收曲线的基本形状与溶液浓度无关吸收曲线的基本形状与溶液浓度无关 C浓度
64、越大，吸光系数越大浓度越大，吸光系数越大 D吸收曲线是一条通过原点的直线吸收曲线是一条通过原点的直线分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第六节第六节 紫外紫外-可见吸收光谱在有机化合物结构分析中的应用简介可见吸收光谱在有机化合物结构分析中的应用简介17测定大批量试样时，适宜的定量方法是：测定大批量试样时，适宜的定量方法是： A标准曲线法标准曲线法 B标准对比法标准对比法 C解联立方程组法解联立方程组法 D差视分光光度法差视分光光度法18. 紫外紫外-可见分光光度法是基于被测物质对：可见分光光度法是基于被
65、测物质对： A光的发射光的发射 B光的散射光的散射 C光的衍射光的衍射 D光的吸收光的吸收 分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第六节第六节 紫外紫外-可见吸收光谱在有机化合物结构分析中的应用简介可见吸收光谱在有机化合物结构分析中的应用简介19下面有关显色剂的正确叙述是：下面有关显色剂的正确叙述是： A本身必须是无色试剂并且不与待测物质发生反应本身必须是无色试剂并且不与待测物质发生反应 B本身必须是有颜色的物质并且能吸收测定波长的辐射本身必须是有颜色的物质并且能吸收测定波长的辐射 C能够与待测物质发生氧
66、化还原反应并生成盐能够与待测物质发生氧化还原反应并生成盐 D在一定条件下能与待测物质发生反应并生成稳定的吸收性物质在一定条件下能与待测物质发生反应并生成稳定的吸收性物质20某种溶液的吸光度：某种溶液的吸光度： A与比色杯厚度成正比与比色杯厚度成正比 B与溶液的浓度成反比与溶液的浓度成反比 C与溶液体积成正比与溶液体积成正比 D与入射光的波长成正比与入射光的波长成正比 分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第六节第六节 紫外紫外-可见吸收光谱在有机化合物结构分析中的应用简介可见吸收光谱在有机化合物结构分析中
67、的应用简介21双光束分光光度计与单光束分光光度计的主要区别是：双光束分光光度计与单光束分光光度计的主要区别是： A能将一束光分为两束光能将一束光分为两束光 B使用两个单色器使用两个单色器 C用两个光源获得两束光用两个光源获得两束光 D使用两个检测器使用两个检测器22下列说法错误的是：下列说法错误的是： A标准曲线与物质的性质无关标准曲线与物质的性质无关 B吸收曲线的基本形状与溶液浓度无关吸收曲线的基本形状与溶液浓度无关 C浓度越大，吸光系数越大浓度越大，吸光系数越大 D从吸收曲线上可以找到最大吸收波长从吸收曲线上可以找到最大吸收波长分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高
68、全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第六节第六节 紫外紫外-可见吸收光谱在有机化合物结构分析中的应用简介可见吸收光谱在有机化合物结构分析中的应用简介（二）多项选择题（二）多项选择题1在可见光区测定吸光度时，吸收池的材质可用：在可见光区测定吸光度时，吸收池的材质可用： A彩色玻璃彩色玻璃 B光学玻璃光学玻璃 C石英石英 D溴化钾溴化钾 E以上均可以上均可2在紫外在紫外-可见分光光度法中，影响吸光系数的因素是：可见分光光度法中，影响吸光系数的因素是： A溶剂的种类和性质溶剂的种类和性质 B溶液的物质的量浓度溶液的物质的量浓度 C物质的本性和光的波长物质的本性和光的波长
69、 D吸收池大小吸收池大小 E待测物的分子结构待测物的分子结构 分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第六节第六节 紫外紫外-可见吸收光谱在有机化合物结构分析中的应用简介可见吸收光谱在有机化合物结构分析中的应用简介3影响摩尔吸光系数的因素是：影响摩尔吸光系数的因素是： A温度温度 B溶剂的种类溶剂的种类 C物质的结构物质的结构 D入射光的波长入射光的波长 E溶液的浓度溶液的浓度4光的吸收定律通常适用于：光的吸收定律通常适用于： A散射光散射光 B单色光单色光 C平行光平行光 D折射光折射光 E稀溶液稀溶液分
70、析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第六节第六节 紫外紫外-可见吸收光谱在有机化合物结构分析中的应用简介可见吸收光谱在有机化合物结构分析中的应用简介5紫外紫外-可见分光光度法常用的定量分析方法有：可见分光光度法常用的定量分析方法有： A间接滴定法间接滴定法 B标准对比法标准对比法 C标准曲线法标准曲线法 D直接电位法直接电位法 E吸光系数法吸光系数法6紫外紫外-可见分光光度计的主要部件是：可见分光光度计的主要部件是： A光源光源 B单色器单色器 C吸收池吸收池 D检测器检测器 E显示器显示器分析化学（第分
71、析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第六节第六节 紫外紫外-可见吸收光谱在有机化合物结构分析中的应用简介可见吸收光谱在有机化合物结构分析中的应用简介7分光光度计常用的色散元件是：分光光度计常用的色散元件是： A钨丝灯钨丝灯 B棱镜棱镜 C饱和甘汞电极饱和甘汞电极 D光栅光栅 E光电管光电管8紫外紫外-可见分光光度法可用于某些药物的：可见分光光度法可用于某些药物的： A定性鉴别定性鉴别 B纯度检查纯度检查 C毒理实验毒理实验 D含量测定含量测定 E药理检查药理检查分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌
72、全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第六节第六节 紫外紫外-可见吸收光谱在有机化合物结构分析中的应用简介可见吸收光谱在有机化合物结构分析中的应用简介二、填空题二、填空题1可见光的波长范围为可见光的波长范围为 ，近紫外分光的波长范围为，近紫外分光的波长范围为 。2光光的的吸吸收收定定律律的的数数学学表表达达式式（A=KcL）中中，K称称为为吸吸光光系系数数，常常用用三三种种方方法法来来描描述述，分分别别是是 、 、 ，物质的吸光系数愈大，表示该吸光物质的吸光性愈物质的吸光系数愈大，表示该吸光物质的吸光性愈 。3吸吸收收光光谱谱是是以以 为为横横坐坐标标，以以
73、为为纵纵坐坐标标而而绘绘制制的的曲曲线线。吸收峰最高处所对应的波长为吸收峰最高处所对应的波长为 ，用，用 表示。表示。4紫紫外外可可见见分分光光光光度度法法进进行行定定量量分分析析时时，常常选选用用 作作入入射射光，此时测定的光，此时测定的 最高。最高。 分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第六节第六节 紫外紫外-可见吸收光谱在有机化合物结构分析中的应用简介可见吸收光谱在有机化合物结构分析中的应用简介5在在紫紫外外光光区区测测定定吸吸光光度度时时，应应使使用用紫紫外外-可可见见分分光光光光度计的度计的
74、灯作光源，所用吸收池的材质是灯作光源，所用吸收池的材质是。6测测定定吸吸光光度度时时，当当空空白白溶溶液液置置入入光光路路时时，应应使使T ，此时，此时 A 。7为为提提高高测测定定的的准准确确度度，溶溶液液的的吸吸光光度度读读数数范范围围应应调调节节在在0.20.7为为宜宜，可可通通过过调调节节溶溶液液的的 和和 来实现。来实现。8紫紫外外-可可见见分分光光光光度度法法对对单单组组分分溶溶液液进进行行定定量量分分析析的的常用方法有常用方法有 ， ， 。分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第六节第六节
75、紫外紫外-可见吸收光谱在有机化合物结构分析中的应用简介可见吸收光谱在有机化合物结构分析中的应用简介三、简答题三、简答题1光光的的吸吸收收定定律律的的内内容容是是什什么么？偏偏离离光光的的吸吸收收定定律律的的主要因素有哪些？主要因素有哪些？2紫紫外外-可可见见分分光光光光度度法法对对显显色色剂剂及及显显色色反反应应有有哪哪些些基基本要求？本要求？3试述紫外试述紫外-可见分光光度计的主要部件及其作用。可见分光光度计的主要部件及其作用。4请说出几种常用的空白溶液。请说出几种常用的空白溶液。分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五
76、”规划教划教材材第六节第六节 紫外紫外-可见吸收光谱在有机化合物结构分析中的应用简介可见吸收光谱在有机化合物结构分析中的应用简介5测测定定试试样样时时，吸吸光光度度的的读读数数应应控控制制在在0.20.7范范围围内内。若若吸吸光光度度读读数数不不在在此此范范围围，可可采采用用哪哪些些方方法法进进行行调整调整?6试述紫外试述紫外-可见分光光度法常用的定量分析方法。可见分光光度法常用的定量分析方法。分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第六节第六节 紫外紫外-可见吸收光谱在有机化合物结构分析中的应用简介可见吸
77、收光谱在有机化合物结构分析中的应用简介四、实例分析题四、实例分析题1吸吸光光度度A值值为为0.20、0.60、1.00对对应应透透光光率率值值为为多多少少？透透光光率率值值为为20% 、60%、100%对对应应的的吸吸光光度度值值为为多少？多少？ 2将将已已知知浓浓度度为为2.00mg/L的的蛋蛋白白质质溶溶液液用用碱碱性性硫硫酸酸铜铜溶溶液液显显色色后后，在在540nm波波长长下下测测得得其其吸吸光光度度为为0.300。另另取取试试样样溶溶液液同同样样处处理理后后，在在同同样样条条件件下下测测得得其其吸吸光光度度为为0.699，求求试试样样中中蛋蛋白白质质浓浓度度。测测定定吸吸光光度度时时应
78、应选用何种光源？选用何种光源？分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第六节第六节 紫外紫外-可见吸收光谱在有机化合物结构分析中的应用简介可见吸收光谱在有机化合物结构分析中的应用简介3用用双双硫硫腙腙测测定定Cd2+溶溶液液的的吸吸光光度度A时时， Cd2+ （Cd的的原原子子量量为为112）的的浓浓度度为为140g/L，在在525nm波波长长处处，用用L1cm的的吸吸收收池池，测测得得吸吸光光度度A0.220，试试计计算算摩尔吸光系数。摩尔吸光系数。 4维维生生素素D2的的摩摩尔尔吸吸收收系系数数 264
79、nm=18200。用用2.0cm吸吸收收池池测测定定，如如果果要要控控制制吸吸光光度度A在在0.1870.699范范围内，应使维生素围内，应使维生素D2溶液的浓度在什么范围内？溶液的浓度在什么范围内？ 分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第六节第六节 紫外紫外-可见吸收光谱在有机化合物结构分析中的应用简介可见吸收光谱在有机化合物结构分析中的应用简介5. 每每升升含含铁铁35.0mg的的溶溶液液，吸吸取取此此溶溶液液5.00ml于于100ml容容量量瓶瓶中中，用用1.0cm吸吸收收池池于于508nm处处测
80、测得得吸吸光光度度为为0.348。计计算算比比吸吸光光系系数数，摩尔吸光系数的数值为多少？摩尔吸光系数的数值为多少？6. 称称取取0.500g钢钢样样, 溶溶于于酸酸后后, 使使其其中中的的锰锰（原原子子量量55）氧氧化化成成高高锰锰酸酸根根离离子子, 将将溶溶液液稀稀释释至至100ml，再再稀稀释释10倍倍后后，用用2cm厚厚度度的的比比测测皿皿, 在在波波长长520nm处处测测得得吸吸光光度度为为0.420。在在相相同同条条件件下下，测测得得高高锰锰酸酸根根标标准准溶溶液液（1.5210-4mol/L）的的吸吸光光度度为为0.350，试试计计算算钢钢样样中中锰锰的的质质量量分分数数。请请回
81、回答答选选用用什什么么仪仪器器将将溶溶液液稀稀释释至至100ml？分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第六节第六节 紫外紫外-可见吸收光谱在有机化合物结构分析中的应用简介可见吸收光谱在有机化合物结构分析中的应用简介7利利用用分分光光光光度度法法测测定定血血清清中中镁镁的的含含量量。取取浓浓度度为为10.0mmol/L的的镁镁标标准准溶溶液液10.0 l置置于于容容量量瓶瓶中中，加加3.00ml显显色色剂剂进进行行显显色色后后，稀稀释释至至刻刻线线，摇摇匀匀，测测得得吸吸光光度度为为0.32；另另取取待待
82、测测血血清清50.0 l置置于于另另一一相相同同规规格格的的容容量量瓶瓶中中，加加3.00ml显显色色剂剂进进行行显显色色后后，稀稀释释至至刻刻线线，摇摇匀匀，在在相相同同条条件件下下测测得得吸吸光光度度为为0.47，试试计计算血清中镁的含量。算血清中镁的含量。分析化学（第分析化学（第2版）版） 谢庆娟娟 李李维斌斌全国高全国高职高高专药品品类专业卫生部生部“十二五十二五”规划教划教材材第六节第六节 紫外紫外-可见吸收光谱在有机化合物结构分析中的应用简介可见吸收光谱在有机化合物结构分析中的应用简介8有有两两种种化化合合物物A、B的的混混合合溶溶液液，已已知知化化合合物物A在在282nm和和238nm波波长长处处的的比比吸吸光光系系数数分分别别为为720 g100ml-1和和270g100ml-1；而而化化合合物物B在在上上述述两两波波长长处处的的吸吸光光度度相相等等。现现把把化化合合物物A、B的的混混合合溶溶液液盛盛于于1cm的的吸吸收收池池中中，测测得得282nm波波长长处处的的吸吸光光度度为为0.442，238nm波波长长处处的的吸吸光光度度为为0.278，试试求求混混合合溶溶液液中中化合物化合物A的浓度。的浓度。 汇报结束谢谢大家!请各位批评指正
