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1、皮肤病学相关研究中皮肤病学相关研究中所涉及的细胞培养问题所涉及的细胞培养问题中国医学科学院皮肤病研究所中国医学科学院皮肤病研究所李新宇李新宇20042004年年年年2 2月月月月9/12/20249/12/20241 1角唤窃槽赚埃巳审上瞥裔矗莫墩桥宝治寒导婿讹匹蘑刮访叮墨芜缓舷垦辟皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件一一.细胞培养涉及的基本知识细胞培养涉及的基本知识9/12/20249/12/20242 2雏驳缎土宿保胆男裔敬梗硼腾殷木泡消终眨洁伸津叉糯魏赦碉睛恋迷蜀涯皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件最常见的两种生长
2、型细胞最常见的两种生长型细胞贴壁依赖性细胞贴壁依赖性细胞(Anchorage-dependent cells)(Anchorage-dependent cells) 贴附于不起化学作用的物质(玻璃、或塑料等无活性物质)的表面生长、生存和维持。悬浮培养细胞悬浮培养细胞(Suspension culture)(Suspension culture) 细胞或细胞聚集体悬浮于液体培养基中增殖。9/12/20249/12/20243 3磁拱代骑锯粕肃吸齿捶损您趋典烹瓣蛀袜拿错屉绞葫剧裂隆拓嘶雍遣叙颊皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件细胞培养中常用的几个术语细胞培养中
3、常用的几个术语细胞系细胞系(Cell line)： 原代培养物经首次传代成功后即成细胞系。 连续传代 连续传代 连续细胞系 有限细胞系 (已建成的细胞系) 9/12/20249/12/20244 4赎落诈落沤鹏魔溯拍孩饥迸禾戏削醉藐挝棉新茬率膘项区墒苹罐艇镣欢折皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件细胞株细胞株(Cell strain): 由具有某些特性与标志的细胞选择或克隆化而派生的亚系。细胞周期细胞周期(Cell cycle) 细胞前一次分裂结束开始至本次分裂结束所经历的时相过程。 4个时期：S期：DNA合成期 M期：有丝分裂期 G1期：有丝分裂完成至DN
4、A合成开始的间隙期 G2期：DNA复制结束至有丝分裂开始的间隙期 G0期：某种原因导致细胞不再沿周期进行，进入 休眠状态9/12/20249/12/20245 5监夸淮遏器种期教它署涸坏奴腿噶差叙疵捆哪午虞歼喘忘峡迁介勘凡骆说皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件细胞一代时间细胞一代时间(Cell generation time) 单个细胞两次连续分裂的时间间隔。群体倍增时间群体倍增时间(Population doubling time) 在对数生长期进行计算的细胞增加一倍所 需要的时间。9/12/20249/12/20246 6耶毋名臂梁逞瘦芋百硕棋规寐锥永
5、预策媳云书瞻咏帮寸唤夫菜十英腑阻瞳皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件克隆克隆(Clone) 单个细胞通过有丝分裂形成的细胞群体，它们的遗传特性相同。细胞融合细胞融合(Cell fusion) 体外培养条件下，经化学试剂、病毒或物理方法诱发，使不同体细胞融合成杂交细胞(Hybrid)。细胞汇合细胞汇合(Confluence) 器皿中培养的细胞彼此汇合形成单层。9/12/20249/12/20247 7茎窿义仲征慌淫瓦狗种钉鬃拜霍费犀篱整揩诱阶原逗机辉隅驯湛诧状璃郎皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件原代培养原代培养(Pri
6、mary culture) 从直接取自生物体细胞、组织或器官开始的 培养。传代培养传代培养(Passage)(Subculture) 细胞从一个培养器皿转移至另一个培养器皿 中培养。再培养再培养(Reculture) 单层细胞不经任何丢失而转移到新鲜培养基 中的过程。9/12/20249/12/20248 8当吱族画厩肛瘩洛娇绒嗓环熊栽催春断作淮盅鸿可置复抗耀妈些枣好益搬皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件集落形成率集落形成率(Plating efficiency) 细胞接种到培养器皿内所形成的集落的百分率。 单个细胞 集落 克隆形成率(Cloningeff
7、iciency)群体密度群体密度(Population density) 培养器皿内，每单位面积或体积中的细胞数(细 胞数/cm2)。饱和密度饱和密度(Saturation density) 特定条件下，培养器皿中能达到的最高细胞数 (细胞数/cm2或细胞数/cm3)。9/12/20249/12/20249 9贱累椅廉鲸矿绅凰棱恶晓衅琐痴肇室豌怠兆锦彦团绝力蚂瞻瓢跃耽扎荔逢皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件培养基培养基培养基培养基 天然培养基 合成培养基 基本培养基(通用培养基)(MEM ) 无血清培养基 无蛋白培养基 血清基本培养基(通用培养基) 完全培
8、养基9/12/20249/12/20241010硫爹毯娘交宝谷遍垄喘晌种蓄吟势铭披招舷奖华谢叼蹭桩门桅碟哉掉镭氟皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件基本培养基的组分基本培养基的组分 四大类物质 无机盐 氨基酸 维生素 碳水化合物 pH指示剂 酚红9/12/20249/12/20241111惜幕乱做锁言枢聋萎招元肺瑶嵌舅吴则忙疥固芬甜肛欢当倒枢贬婴挛甄榷皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件常用基本培养基常用基本培养基 RPMI 1640 应用最广泛 DMEM 高糖型 4500g/L 葡萄糖， 低糖型 1000g/L葡萄糖 H
9、amF12 无血清培养基常用的基础培养 基 199 9/12/20249/12/20241212动入纺升酝寂苛悍堂幢夹备秧都奸派晕甩中茬暖静巨辉未险扇暂茨置噶虱皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件培养基的选择培养基的选择 培养细胞的首选培养基 常用培养基 根据细胞株特点、实验需要选择 用生长曲线、集落形成率等指标选择9/12/20249/12/20241313蒸瞒蚀怀悸砂雕颖跑墨作舷皮兆裴糯枚固访诱兆辜乡墓秒阎性谍雏节衡受皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件培养基配制时的注意事项培养基配制时的注意事项 严格按说明书要求添加
10、必要成分 NaHCO3 谷氨酰胺 HEPES - 各成分顺序溶解 配制培养基用水、器皿 灭菌 分装、保存 9/12/20249/12/20241414腥树壬庄望非绦添裴崇腰窥彻径昂欢折妹匙搔朽羊炬嘿阂匙酋项便崖茬低皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件培养基添加成分培养基添加成分 NaHCO3 一般按说明书要求添加 封闭式培养用5.6%或7.4%液调节 谷氨酰胺 易降解，使用前添加 使用终浓度0.002mol/L HEPES(羟乙基哌嗪乙硫磺酸) 主要作用为防止培养基pH迅速变动 使用终浓度0.01- 0.015mol/L9/12/20249/12/20241
11、515戍锚袄旺饱瞻堆橇族治枫桑艳寄渭爪怕啡喊区鞋耪众室次窘限畸际好傲哥皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件完全培养基的添加成分完全培养基的添加成分牛血清牛血清 小牛血清：取自出生1030天的小牛。 新生牛血清：取自出生24小时之内的新生牛。 胎牛血清：取自剖腹产的胎牛或心脏穿刺方 法获得。 9/12/20249/12/20241616搀伸及筹筏栓定扯诅汗蔗霍卜错拥运噪猫最跟酪寸执隙兢康躇心孺通补拯皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件血清的主要作用血清的主要作用 提供细胞生长所需的基本营养物质。 (激素、生长因子、结合蛋白)
12、 提供贴壁和扩展因子 (纤连蛋白,层粘连蛋白)。 对培养中的细胞提供保护作用。 抗蛋白酶成分对细胞释放的蛋白酶起中和作用 终止贴壁细胞消化传代中所用胰蛋白酶的作用 血清蛋白的粘度保护悬浮培养搅拌时细胞所受的机 械损伤9/12/20249/12/20241717炊睹渠公墙仪蒲则馏硫雁军脂路惮赢黔涉鄙拭虾申橙楔序杀效登也克泞痔皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件使用血清的缺点使用血清的缺点 改变细胞在体内的正常状态 促进某些细胞生长同时抑制另一类细胞生长。 所含物质对细胞生长的影响或毒性作用 批间成分的一致性 支原体、病毒的潜在污染性9/12/20249/12/
13、20241818楞猩硬小辅痴池诱寂阑娩窖锥域背验及灸敲篙避皱渍胶伙淡柔轴揪淋贱郑皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件血清质量的判断血清质量的判断血清质量的判断血清质量的判断 质量鉴定报告质量鉴定报告 理化性质 微生物检测 促生长效果(培养细胞检测) 克隆形成率、贴壁率测定 连续传代培养 外观判断外观判断 透明清亮 土黄色或棕黄色 无沉淀或及少量沉淀 较粘稠9/12/20249/12/20241919咕忽感助烽桂钨那再拼层钝粪盎罩僵束绵饺彪也诸连臻悉蹄胯忠帝逃绵摆皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件血清的使用与贮存血清的使用
14、与贮存 灭活处理: 56水浴, 30分钟(去除补体) 贮存条件: 分装 -20 长期贮存, 避免反复冻融 4 , 140 代)。9/12/20249/12/20245454骑骏阵挥眶唉滔连挟巢芋赤渊冉祥馒限始檀殷览锯谐僳卉痊仇贬武叼湖污皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件三三. 细胞培养技术在皮肤病相细胞培养技术在皮肤病相关领域中的应用关领域中的应用9/12/20249/12/20245555扩沪挟磊淮斡呐忆魁爱堵样三毗病热清诲咱携庚氧残睹仪禄鬃娄毫嘛热呕皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件 微载体培养微载体培养 细胞在由
15、葡聚糖制成的小球表面成单层生长,通过轻轻搅拌使细胞维持悬浮状态。 特点特点特点特点 不增加培养容器表面积或培养基容积的前提下 提高培养表面积。 省却了容器等的清洗和准备工作。 细胞与培养液的分离简单。 减少繁复的操作步骤,降低污染率。 提高产率。 微载体制作材料的进展微载体制作材料的进展微载体制作材料的进展微载体制作材料的进展 葡聚糖 纤维素 聚乙烯和二氧化硅, 聚苯乙烯 明胶 9/12/20249/12/20245656锹蛛船虚否詹涅要斜颠瓶聋坏米饵齐琳间拍烘揉倡撕啪侣吧惑毯轧聂识却皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件在化妆品功效研究中的应用在化妆品功效研
16、究中的应用传统皮肤细胞培养方法的应用传统皮肤细胞培养方法的应用 单层的培养技术-皮肤组织获取和化妆品研发 培养黑素细胞-美白化妆品活性成分筛选 朗格罕细胞、和淋巴细胞共同培养 -体外筛选化妆品过敏作用 富含Merkel细胞的表皮细胞悬液培养 -局部应用药物的耐受机制研究 9/12/20249/12/20245757籍望莎剖云斌箍弧睡挫脂弥眩性颐撑掺性抛司凶孽佯弊绦赶挫翰砂蒂舰窃皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件成纤维细胞的培养 -抗衰老化妆品活性成分开发中应用(筛选中 草药有效成分的抗衰老活性) -化妆品生理功效研究中应用 9/12/20249/12/20
17、245858歼欣逆漏秒澳荣妄椎崖敦汉邵阅搂株做前便颤爆袄象皮喇痊返夸坑条血汕皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件皮肤细胞的皮肤细胞的“三维培养三维培养” 器官型培养器官型培养(气气-液体交界面培养液体交界面培养) 分离、培养皮肤的,使其在体外扩增, 然后将其接种于真皮类似物上, 暴露于空气中, 使表皮正常分化, 形成类似天然表皮的复层组织(体外重建表皮)。 真皮类似物 去表皮真皮 胶原基质 惰性材料 应用应用 真皮类似物和重建表皮的组合形成具有表皮和真皮 的简化的人皮肤。 用成纤维细胞研究从表皮透过的化妆品活性物质的 生物学效应,了解表、真皮之间的相互作用。
18、 将其他细胞(内皮细胞、白细胞)引入真皮类似层,扩大测试系统 的使用范围。9/12/20249/12/20245959械哭白栈恶激区妈彬志吗汝球涡隘跌觅淖明憋咐挚恿堤产尹悼贮荣伯猩弧皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件皮肤器官培养皮肤器官培养 活体皮肤于体外培养，并使其保持其一定的结构和功能 。 培养方法培养方法 液体浸没的皮肤器官培养 气-液面交界的皮肤器官培养 应用应用 化妆品对皮肤急性刺激毒性研究9/12/20249/12/20246060团讫栗含熏船踊佣徒力集席捎拄阳伴铲切席卑隋耽革忱甜佬椎讨乔襟彰机皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件皮肤科细胞培养
19、及临床应用 ppt课件 在化妆品研发中的应用在化妆品研发中的应用 延缓皮肤衰老化妆品延缓皮肤衰老化妆品 以皮肤和成纤维细胞为受试对象,寻找或筛 选具有抗衰老活性物质 ,确定该物质基本毒性情 况。 (观察对两种细胞增殖能力及活性的影响) 研究外界因素对皮肤的药理学或毒理学作用。 (如、药物及化妆品等) 将损伤作用作为模型进行化妆品的干预研究 9/12/20249/12/20246161戳铲四霖夯咀瓣枕论丁醚巷梗阅邪缚敛则苇柿宽光椰祈卵揽泛仑贫踢篓为皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件皮肤美白产品皮肤美白产品 将活的黑色素细胞引入重建真皮类似环境，作为体外皮肤美
20、白剂的初筛模型。 光生物学研究, 如防晒剂的效果评价。 9/12/20249/12/20246262菠殿咬笨诸冗酣肢陋越王蛋叹加窿泳杯深租掌茅久薯纪贺访锻景喳凑蜗狱皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件化妆品配方及成品的毒理学研究化妆品配方及成品的毒理学研究 单层皮肤细胞培养单层皮肤细胞培养单层皮肤细胞培养单层皮肤细胞培养 外来化学物的代谢及最初的刺激和过敏 反应。 皮肤三维培养皮肤三维培养皮肤三维培养皮肤三维培养 化妆品的细胞毒性、有效性研究及局部 应用化合物(药用化妆品、表面活性剂、渗 透剂和杀菌剂等)效果评价。 9/12/20249/12/2024636
21、3占拳廉村缎羞盆啮纂火弦底贤裕赡牲纺撩繁爆绿高赦券鲁器甫非丹军躬抽皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件毛发用化妆品毛发用化妆品 以毛根鞘上皮细胞为对象, 进行护发活性物质的筛选以及毛发用化妆品毒性测试研究。9/12/20249/12/20246464茵掳籍添携坷嘉诈诣剖袖苇涪赴薛用旧响杆丫面处损尺彻赐霓织忱纸栽卒皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件基础研究基础研究 皮肤三维培养皮肤三维培养(重建表皮、真皮类似物重建表皮、真皮类似物) -化妆品和洗护发产品对人体皮肤的刺激性化妆品和洗护发产品对人体皮肤的刺激性 研究研究 -重
22、建表皮可用于研究表皮终末分化以及研重建表皮可用于研究表皮终末分化以及研 究表皮细胞分化调节物、表皮对刺激反应究表皮细胞分化调节物、表皮对刺激反应 机制；机制；化妆品经皮吸收和化妆品对屏障功 能的保护作用 -真皮类似物用来研究真皮层的组成及生理 功能 -重建表皮重建表皮+真皮类似物真皮类似物共培养系统用来研究 皮肤生理代谢、化合物的光毒性、效 应和防晒剂的作用9/12/20249/12/20246565孩拄谁仪崭吱氢侣哉仓涨雁密挑靡砾温线哟蛀裤藕腆破淤柯氯旭陡捆笼郧皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件体外细胞培养模型体外细胞培养模型 角质形成细胞 黑色素细胞
23、朗罕氏细胞 成纤维细胞 皮脂细胞9/12/20249/12/20246666摇挤噪落谦抖又百辰棒单吕砒密霄徘犀棱瓶茅颠蚊棺字鬼撰郑红毗它伙葬皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件细胞培养评估方法及指标细胞培养评估方法及指标细胞培养评估方法及指标细胞培养评估方法及指标 评估目的评估目的评估目的评估目的 细胞模型细胞模型细胞模型细胞模型 评估指标评估指标评估指标评估指标 毒性 2,3-细胞培养 细胞形态, 细胞活性 (中性红MTT,LDH,PEG2) 美白 黑素细胞培养 黑素的生成 黑素细胞和 酪氨到酶活性 角朊细胞共培养 3-细胞培养 抗衰老 成纤维细胞培养 细
24、胞增殖, 胶原蛋白, 角朊细胞培养 弹性蛋白, 3-细胞培养 粘多糖等的生成9/12/20249/12/20246767氰羚督辫绪挝华雏挣魁郧灵亿墩梢霞围舷刀六味讥宏纳藻捌馒伟歼佑滴祷皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件在基因工程药物血药在基因工程药物血药浓度测定中的应用浓度测定中的应用 特定依赖细胞株培养法特定依赖细胞株培养法 以药物对特定依赖细胞的增殖或抑制、细 胞数目的增减为量效指标。 细胞增殖法 : 促进特定依赖细胞株增殖, 抑制增殖法: 抑制细胞增殖 9/12/20249/12/20246868堤偷钾袖潦糕称抹充术呐杨价段仅霞矗造步淳越症抬谗俄辽讯
25、湘撒遭览坑皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件细胞培养量效指标的测定方法细胞培养量效指标的测定方法 3H-胸腺嘧啶脱氧核苷掺入法(3H-TdR) 59Fe核素标记法 四氮唑盐法(MTT) 直接计数法 其他间接法9/12/20249/12/20246969渗千免半壤壮令捶鸥佳旅麦罕樊廊幼郧娟隆撂限邢棺浑羞栋绑不落屑捏坎皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件细胞毒性的观察方法细胞毒性的观察方法 放射性同位素摄入法放射性同位素摄入法放射性同位素摄入法放射性同位素摄入法 3H-胸腺嘧啶胸腺嘧啶- 3H-亮氨酸亮氨酸-培养基中掺入3H
26、-亮氨酸，根据 3H-亮 氨酸在细胞内含量测定细胞内蛋白质合 成情况 。 同位素法特点同位素法特点 揭示细胞分子水平的动态变化,是研究细胞代谢 状态的重要手段。 放射性损害。 需要特殊实验室和特殊设备。 四甲基偶氮唑盐比色法四甲基偶氮唑盐比色法四甲基偶氮唑盐比色法四甲基偶氮唑盐比色法(MTT(MTT法法法法) ) 9/12/20249/12/20247070燎唬驴卧旭天披舌优芥哄皮僵肩矾主很差缓轿淤警豆托钞垃呸遭迅嗣阿巨皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件 荧光染色法荧光染色法 乙酰乙酸荧光素法乙酰乙酸荧光素法 当细胞受到损伤时,细胞膜的选择通透性 屏障作用
27、消失,利用乙酰乙酸荧光素和溴化 乙锭快速进出细胞膜受损的细胞特点。在 荧光显微镜下迅速区分受损细胞。 9/12/20249/12/20247171噪碰宇口豺堰救缨届圣惋扣堂郑躯抿光姑惋雀戊策懈缴沮俺骄鸳亏酚衣癌皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件 发光细胞活力测试发光细胞活力测试 采用一种独特的、稳定性荧光素酶来检测有活力 细胞。荧光素酶利用荧光素、氧和ATP作为反应底 物，产生氧化荧光 素，并以光的形式释放能量。由 于荧光素酶反应需要ATP，因而反应产生光的总量 和反映有活力细胞数的ATP总量呈正比。产生的发 光信号和培养基中的有活力细胞数呈正比。 特点特
28、点 适用于高通量应用，测试大批量样品可快速得到 结果。需要特殊的发光仪或CCD相机读取发光信号。 9/12/20249/12/20247272奎类堆窖啡圾五刑庇庶栈镍习朱扫琅宵活艳厚盒傍剥歼翠镁胎但挛印庞耀皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件流式细胞光度术流式细胞光度术流式细胞光度术流式细胞光度术(FCM (FCM 法法法法) ) 利用鞘流原理,使被荧光标记的单个悬浮细胞排成单 列,按重力方向流动。细胞被激光照射后发射荧光,检测 器可逐个对细胞的荧光强度进行测定。 特点特点 对细胞测定能力为30-60万个细胞/分钟,同时可对细 胞的核酸,蛋白质酶、细胞周期分
29、布等八种参数进行 测定。 9/12/20249/12/20247373磅惦漫膳混淌嘿躁医跳签绥寻韭胃间甚袁已斧倡滨姐疡乾蹈养镍钙旨群嗓皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件在药物开发中的应用在药物开发中的应用药物筛选模型药物筛选模型 整体动物水平 组织器官水平 细胞分子水平细胞分子水平药物筛选模型细胞分子水平药物筛选模型细胞分子水平药物筛选模型细胞分子水平药物筛选模型 细胞系的生物学特征较为一致，用于观察药物对细胞形态及生理特征的影响，判断药物疗效及其毒性。 材料用量少，药物作用机制较明确，实现大规模筛选，缩短新药筛选周期。9/12/20249/12/2024
30、7474宁夏穗粤池淹搽垃窖宪处鱼魁蕴器妙摸坷蕴峨冯斗偿胰钻知摸帐穿走犹习皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件 模型优势模型优势模型优势模型优势 大样本量的筛选(扩大筛选对象和范围)。 一药多筛(样品量少，珍贵药物多模型筛选， 扩大新药范围)。 高通量药物筛选高通量药物筛选高通量药物筛选高通量药物筛选(HTS)(HTS) 计算机控制的自动化大规模筛选体系。利用细胞培养制出的新药利用细胞培养制出的新药 基因工程药物 细胞工程药物9/12/20249/12/20247575储拽括蛤烬辆暂瓤次缅峙轿铲诡绿藻褒胆彪磅泉涡欺盘眠瞧爪搞搜八雅矿皮肤科细胞培养及临床应用 p
31、pt课件皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件细胞培养中的药物试验问题细胞培养中的药物试验问题 细胞的选择 敏感株 原代 细胞 性别系(株) 药物的溶解和保存 溶剂的选择 药物剂量 半效剂量(ID50) 选择合适指标粗略估算法 借用药物LD50精确计算 药物作用时间 接种后约第48小时(指数生长期) 时-效曲线 9/12/20249/12/20247676炽槛糜豢伦打身允篱诫有矽仙恳现捕梭榴价柱抗掌掷丑钦抱辟子彰掸电捧皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件思考题思考题 1. 应用细胞培养技术进行实验研究中细胞应用细胞培养技术进行实验研究中细胞 生长、活力及细胞毒的测定方法生长、活力及细胞毒的测定方法 2. 角质形成细胞体外生长特点角质形成细胞体外生长特点9/12/20249/12/20247777聂剁咖店衅累坡咨拘辗宁珐域扎悯陷亭缨犊糜凉狠纺渍酷梯屑垦台已侗击皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件 谢谢 谢！谢！9/12/20249/12/20247878辱佑脉护捌懈鸵有揖祈矾咽拭京咙靖掷鄙锰赐苦扇铆伪纺署任褪丈荧懦扦皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件皮肤科细胞培养及临床应用 ppt课件
